| 摘要 | 第7-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 缩略词表 | 第15-17页 |
| 一、前言 | 第17-23页 |
| (一) 蛋白泛素化 | 第17页 |
| (二) 由E2酶UbcH5c催化的信号蛋白泛素化在TNF-α介导的NF-κB活化过程中的调控作用 | 第17-20页 |
| (三) 菊科植物中含量丰富的倍半萜内酯类成分,多具抗炎药理活性 | 第20-23页 |
| 二、实验材料 | 第23-27页 |
| (一) 细胞株 | 第23页 |
| (二) 化合物 | 第23页 |
| (三) 实验试剂 | 第23-26页 |
| (四) 实验仪器 | 第26-27页 |
| 三、实验方法 | 第27-41页 |
| (一) 溶液配制 | 第27-28页 |
| (二) Western blot(SDS-PAGE电泳) | 第28-29页 |
| (三) 体外E2酶活测定 | 第29-30页 |
| (四) 细胞复苏、培养、冻存 | 第30-31页 |
| (五) 荧光素酶报告基因检测NF-κB活性 | 第31-33页 |
| (六) Western Blot检测化合物对NF-κB通路的影响 | 第33-34页 |
| (七) Biacore(生物大分子相互作用) | 第34-35页 |
| (八) 免疫共沉淀 | 第35-36页 |
| (九) qPCR检测细胞中相关炎症因子的mRNA表达水平 | 第36-39页 |
| (十) DNCB诱导的小鼠湿疹皮炎模型的建立及药物作用评价 | 第39-41页 |
| 四、统计分析方法 | 第41-43页 |
| 五、实验结果 | 第43-71页 |
| (一) 不同结构类型的天然倍半萜内酯类化合物对UbcH5c的抑制活性 | 第43-44页 |
| (二) α-山道年衍生物中UbcH5c抑制剂的发现及其抗炎活性研究 | 第44-57页 |
| 1、α-山道年衍生的倍半萜内酯化合物的UbcH5c抑制活性 | 第44-46页 |
| 2、化合物6的结构修饰及所得衍生物的UbcH5c抑制活性 | 第46-47页 |
| 3、化合物10的结构修饰及所得衍生物的UbcH5c抑制活性 | 第47-48页 |
| 4、化合物20的结构修饰及所得衍生物的UbcH5c抑制活性 | 第48-49页 |
| 5、初步筛选所得的具有UbcH5c抑制活性的山道年衍生物对NF-κB通路的抑制活性 | 第49-52页 |
| 6、山道年衍生物抑制UbcH5c的量效关系及其对Ubc13活性的影响 | 第52-54页 |
| 7、活性化合物与UbcH5c的结合动力学 | 第54页 |
| 8、活性化合物6d与UbcH5c的结合方式 | 第54-55页 |
| 9、活性化合物6d对TNF-α介导的NEMO线性泛素化影响 | 第55-56页 |
| 10、活性化合物6d对原代滑膜细胞表达炎症因子的影响 | 第56-57页 |
| (三) 土木香内酯、异土木香内酯及土木香总内酯的UbcH5c抑制活性及其抗炎活性 | 第57-71页 |
| 1、土木香内酯、异土木香内酯对及土木香总内酯对UbcH5c酶活性的影响 | 第57-59页 |
| 2、土木香内酯和异土木香内酯与UbcH5c的相互作用 | 第59-60页 |
| 3、土木香内酯与UbcH5c的结合方式 | 第60-61页 |
| 4、土木香内酯、异土木香内酯及土木香总内酯对TNF-α诱导的炎症相关细胞内NF-κB及MAPK通路活化的影响 | 第61-63页 |
| 5、土木香内酯、异土木香内酯及土木香总内酯对TNF-α刺激的HaCaT细胞内NF-κB通路活化及炎症因子表达的影响 | 第63-65页 |
| 6、土木香总内酯的体内抗炎作用 | 第65-71页 |
| 六、讨论 | 第71-78页 |
| 参考文献 | 第78-83页 |
| 文献综述 | 第83-92页 |
| 参考文献 | 第88-92页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
