| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 引言 | 第10-14页 |
| 第二章 CSE在乳腺癌细胞中的生物学作用 | 第14-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-19页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第14-15页 |
| 2.1.2 细胞株 | 第15页 |
| 2.1.3 主要药品与试剂 | 第15-16页 |
| 2.1.4 转染试剂及siRNA序列 | 第16页 |
| 2.1.5 相关试剂的配制 | 第16-19页 |
| 2.1.6 相关药品的配制 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-25页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第19页 |
| 2.2.2 siRNA转染 | 第19-20页 |
| 2.2.3 MTT法检测细胞活性 | 第20页 |
| 2.2.4 亚甲基蓝法检测内源性硫化氢 | 第20-21页 |
| 2.2.5 EdU检测法检测细胞增殖 | 第21-22页 |
| 2.2.6 细胞迁移能力的检测 | 第22-23页 |
| 2.2.7 Western blot检测蛋白的表达 | 第23-24页 |
| 2.2.8 细胞周期检测 | 第24-25页 |
| 2.2.9 细胞凋亡检测 | 第25页 |
| 2.2.10 数据与统计学分析 | 第25页 |
| 2.3 实验结果 | 第25-35页 |
| 2.3.1 正常乳腺及癌细胞中CSE蛋白的表达水平 | 第25-26页 |
| 2.3.2 CSE siRNA及CSE抑制剂PAG对MCF-7 细胞H2S水平的影响 | 第26-28页 |
| 2.3.3 CSE siRNA及CSE抑制剂PAG对MCF-7 细胞生长的影响 | 第28-29页 |
| 2.3.4 CSE siRNA及CSE抑制剂PAG对MCF-7 增殖的影响 | 第29-30页 |
| 2.3.5 CSE siRNA及CSE抑制剂PAG对MCF-7 细胞周期的影响 | 第30-32页 |
| 2.3.6 CSE siRNA及CSE抑制剂PAG对MCF-7 细胞迁移的影响 | 第32-34页 |
| 2.3.7 CSE siRNA及CSE抑制剂PAG对MCF-7 细胞凋亡的影响 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-37页 |
| 2.5 结论 | 第37-38页 |
| 第三章 STAT3对CSE基因表达调控及转录机制的研究 | 第38-52页 |
| 3.1 实验材料 | 第38-40页 |
| 3.1.1 主要仪器 | 第38页 |
| 3.1.2 细胞株 | 第38页 |
| 3.1.3 主要药品与试剂 | 第38-39页 |
| 3.1.4 转染试剂及STAT3 siRNA | 第39页 |
| 3.1.5 扩增CSE基因启动子区所用引物的序列 | 第39页 |
| 3.1.6 相关试剂的配制 | 第39-40页 |
| 3.2 实验方法 | 第40-44页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第40页 |
| 3.2.2 转染 | 第40页 |
| 3.2.3 RT-PCR检测mRNA水平 | 第40-41页 |
| 3.2.4 Western blot检测蛋白的表达 | 第41页 |
| 3.2.5 检测内源性硫化氢的释放 | 第41页 |
| 3.2.6 STAT3与CSE结合位点预测 | 第41页 |
| 3.2.7 pGL3-basic-CSE启动区的构建 | 第41-43页 |
| 3.2.8 荧光素酶报告基因检测 | 第43-44页 |
| 3.2.9 数据与统计学分析 | 第44页 |
| 3.3 实验结果 | 第44-50页 |
| 3.3.1 STAT3与CSE相关性的检测 | 第44-45页 |
| 3.3.2 STAT3对MCF-7 细胞CSEmRNA水平的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.3 STAT3对MCF-7 细胞CSE蛋白水平的影响 | 第46页 |
| 3.3.4 STAT3对内源性硫化氢水平的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.5 生物信息学分析STAT3与CSE启动子结合 | 第47-48页 |
| 3.3.6 CSE基因启动子区的克隆 | 第48-49页 |
| 3.3.7 STAT3在转录水平调控CSE基因的表达 | 第49-50页 |
| 3.4 讨论 | 第50-51页 |
| 3.5 小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-62页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第62-63页 |
