| 中文摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 1 引言 | 第16-37页 |
| 1.1 古生菌 | 第16-28页 |
| 1.1.1 古生菌名称的由来 | 第16-17页 |
| 1.1.2 古生菌的分类 | 第17-19页 |
| 1.1.3 古生菌的形态和细胞学特征 | 第19-22页 |
| 1.1.4 古生菌的生态环境 | 第22页 |
| 1.1.5 古生菌的基本遗传学特征 | 第22-25页 |
| 1.1.6 古生菌的启动子 | 第25-28页 |
| 1.2 嗜盐古生菌 | 第28-34页 |
| 1.2.1 嗜盐古生菌的概述 | 第28-30页 |
| 1.2.2 嗜盐古生菌的基因组研究 | 第30-31页 |
| 1.2.3 嗜盐古生菌中构建的遗传操作系统 | 第31-34页 |
| 1.2.4 嗜盐古生菌中的Natrinema属的简单介绍 | 第34页 |
| 1.3 古生菌噬菌体在古生菌遗传操作系统中的应用 | 第34-35页 |
| 1.4 本研究的背景、内容和意义 | 第35-37页 |
| 2 Natrinema sp.J7-2遗传操作系统的初步构建 | 第37-107页 |
| 2.1 实验材料 | 第37-48页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第37-43页 |
| 2.1.2 试剂、溶液及仪器 | 第43-48页 |
| 2.2 实验方法 | 第48-65页 |
| 2.2.1 常用的分子生物学方法 | 第48-53页 |
| 2.2.2 Natrinema sp.J7-2的诱变处理 | 第53-54页 |
| 2.2.3 Natrinema sp.J7-2营养缺陷型菌株的筛选及验证 | 第54页 |
| 2.2.4 Natrinema sp.J7-2营养缺陷型菌株缺陷类型的鉴定 | 第54-56页 |
| 2.2.5 嗜盐古生菌基因组DNA的提取 | 第56页 |
| 2.2.6 Natrinema sp.J7-2营养缺陷型菌株缺陷突变基因及突变位点的确定 | 第56-57页 |
| 2.2.7 菌株转化 | 第57-58页 |
| 2.2.8 转化子的鉴定 | 第58-59页 |
| 2.2.9 Natrinema sp.J7-2营养缺陷型菌株转化子中检测α-淀粉酶基因 | 第59页 |
| 2.2.10 pHH205转化Natrinema sp.J7-2及CJ7后的噬菌斑检测 | 第59-60页 |
| 2.2.11 Natrinema sp.J7-2的抗性实验 | 第60-61页 |
| 2.2.12 穿梭载体的构建流程 | 第61-62页 |
| 2.2.13 质粒稳定性实验 | 第62-63页 |
| 2.2.14 噬菌体的相关实验 | 第63-65页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第65-102页 |
| 2.3.1 营养缺陷型菌株的诱变与筛选 | 第65-81页 |
| 2.3.2 以pHH205为基础构建的E.coli-Natrinema sp.J7-2穿梭载体 | 第81-102页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第102-107页 |
| 3 Natrinema sp.J7-2启动子跨域启动活性现象的普遍性分析 | 第107-167页 |
| 3.1 实验材料 | 第107-121页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第107-117页 |
| 3.1.2 试剂、溶液及仪器 | 第117-121页 |
| 3.2 实验方法 | 第121-132页 |
| 3.2.1 大肠杆菌质粒DNA的碱裂解法提取 | 第121页 |
| 3.2.2 基因的扩增 | 第121页 |
| 3.2.3 一步提质粒 | 第121页 |
| 3.2.4 多克隆位点序列的构建 | 第121-122页 |
| 3.2.5 限制性内切酶的酶切反应体系 | 第122页 |
| 3.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第122页 |
| 3.2.7 电泳DNA样品的回收纯化 | 第122页 |
| 3.2.8 末端补平 | 第122-123页 |
| 3.2.9 酶切载体后去磷酸化处理 | 第123页 |
| 3.2.10 DNA样品纯化 | 第123页 |
| 3.2.11 连接反应 | 第123页 |
| 3.2.12 大肠杆菌转化实验 | 第123页 |
| 3.2.13 嗜盐古生菌转化实验 | 第123-124页 |
| 3.2.14 转化子鉴定 | 第124页 |
| 3.2.15 嗜盐古生菌质粒DNA的提取 | 第124页 |
| 3.2.16 嗜盐古生菌基因组DNA的提取 | 第124页 |
| 3.2.17 氯霉素抗性实验及CAT ELISA测定 | 第124-126页 |
| 3.2.18 总蛋白的测定 | 第126-127页 |
| 3.2.19 WF146蛋白酶检测 | 第127页 |
| 3.2.20 α-淀粉酶检测及酶活测定 | 第127-128页 |
| 3.2.21 β-半乳糖苷酶检测及酶活测定 | 第128-129页 |
| 3.2.22 Western blot | 第129-130页 |
| 3.2.23 RNA提取 | 第130-131页 |
| 3.2.24 5'-3'RACE | 第131-132页 |
| 3.3 实验结果 | 第132-165页 |
| 3.3.1 在古生菌中检测启动子活性的载体 | 第132-146页 |
| 3.3.2 在细菌中检测启动子活性的载体 | 第146-153页 |
| 3.3.3 有跨域启动活性的古生菌启动子 | 第153-165页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第165-167页 |
| 总结 | 第167-169页 |
| 中外文参考文献 | 第169-184页 |
| 攻博期间取得的科研成果 | 第184-185页 |
| 致谢 | 第185-187页 |
