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棉铃虫羧酸酯酶CarE001C原核表达及突变酶活性研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
第1章 文献综述第15-30页
    1.1 昆虫抗药性研究进展第15-22页
        1.1.1 昆虫的靶标抗性第15-17页
        1.1.2.昆虫的代谢抗性第17-18页
        1.1.3 棉铃虫羧酸酯酶(CarEs)与代谢抗性产生第18-21页
        1.1.4 羧酸酯酶在解毒酶制剂中的应用第21-22页
    1.2 有机磷类和拟除虫菊酯杀虫剂生化特性第22-26页
        1.2.1 有机磷杀虫剂第22-25页
        1.2.2 拟除虫菊酯杀虫剂第25-26页
    1.3 原核表达系统第26-28页
        1.3.1 概述第26页
        1.3.2 原核表达载体、宿主菌和诱导表达第26-28页
    1.4 论文的选题、设计思路及研究目的第28-30页
第2章 棉铃虫羧酸酯酶原核表达体系的建立第30-42页
    2.1 材料与方法第30-36页
        2.1.1 材料第30-31页
        2.1.2 方法第31-36页
    2.2 结果与分析第36-40页
        2.2.1 表达载体构建第36页
        2.2.2 目的基因表达产物检测第36-38页
        2.2.3 目的蛋白浓度测定第38页
        2.2.4 纯化蛋白对 α-NA酶的促动力学测定第38-40页
        2.2.5 纯化蛋白对 β-氯氰菊酯的代谢活性第40页
    2.3 小结与讨论第40-42页
        2.3.1 小结第40页
        2.3.2 讨论第40-42页
第3章 棉铃虫羧酸酯酶CarE001C的原核表达和活性测定第42-50页
    3.1 材料与方法第42-43页
        3.1.1 材料第42页
        3.1.2 方法第42-43页
    3.2 结果与分析第43-48页
        3.2.1 重组体构建第43-45页
        3.2.2 目的基因表达产物检测第45页
        3.2.3 目的蛋白浓度测定第45页
        3.2.4 纯化蛋白对 α-NA酶的促动力学测定第45-47页
        3.2.5 纯化蛋白对杀虫剂的代谢活性第47-48页
    3.3 小结和讨论第48-50页
        3.3.1 小结第48页
        3.3.2 讨论第48-50页
第4章 CarE001C单位点突变体对拟除虫菊酯杀虫剂的代谢作用第50-60页
    4.1 材料与方法第50-52页
        4.1.1 材料第50页
        4.1.2 仪器设备第50页
        4.1.3 方法第50-52页
    4.2 结果分析第52-58页
        4.2.1 突变基因的序列验证第52-55页
        4.2.2 突变酶的SDS-PAGE和Western-Blot检测第55页
        4.2.3 突变酶的浓度测定第55页
        4.2.4 突变酶对 α-NA的酶促降解活性第55-57页
        4.2.5 突变酶对拟除虫菊酯杀虫剂的代谢降解活性第57-58页
    4.3 小结与讨论第58-60页
        4.3.1 小结第58页
        4.3.2 讨论第58-60页
第5章 CarE001C多位点突变体对有机磷杀虫剂的代谢作用第60-69页
    5.1 材料与方法第60-62页
        5.1.1 材料第60页
        5.1.2 仪器设备第60页
        5.1.3 方法第60-62页
    5.2 结果分析第62-67页
        5.2.1 突变基因的序列验证第62页
        5.2.2 突变酶的SDS-PAGE和Western-Blot检测第62-65页
        5.2.3 突变酶的浓度确定第65页
        5.2.4 突变酶对 α-NA的酶促降解活性第65-66页
        5.2.5 突变酶对有机磷杀虫剂的代谢降解活性第66-67页
    5.3 小结与讨论第67-69页
        5.3.1 小结第67页
        5.3.2 讨论第67-69页
第6章 全文总结第69-72页
    6.1 论文创新点第69页
    6.2 主要结论第69页
    6.3 讨论第69-71页
    6.4 下一步研究工作第71-72页
参考文献第72-78页
附录第78-83页
缩略语第83-84页
致谢第84-85页
作者简介第85页

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