摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第1章 文献综述 | 第15-30页 |
1.1 昆虫抗药性研究进展 | 第15-22页 |
1.1.1 昆虫的靶标抗性 | 第15-17页 |
1.1.2.昆虫的代谢抗性 | 第17-18页 |
1.1.3 棉铃虫羧酸酯酶(CarEs)与代谢抗性产生 | 第18-21页 |
1.1.4 羧酸酯酶在解毒酶制剂中的应用 | 第21-22页 |
1.2 有机磷类和拟除虫菊酯杀虫剂生化特性 | 第22-26页 |
1.2.1 有机磷杀虫剂 | 第22-25页 |
1.2.2 拟除虫菊酯杀虫剂 | 第25-26页 |
1.3 原核表达系统 | 第26-28页 |
1.3.1 概述 | 第26页 |
1.3.2 原核表达载体、宿主菌和诱导表达 | 第26-28页 |
1.4 论文的选题、设计思路及研究目的 | 第28-30页 |
第2章 棉铃虫羧酸酯酶原核表达体系的建立 | 第30-42页 |
2.1 材料与方法 | 第30-36页 |
2.1.1 材料 | 第30-31页 |
2.1.2 方法 | 第31-36页 |
2.2 结果与分析 | 第36-40页 |
2.2.1 表达载体构建 | 第36页 |
2.2.2 目的基因表达产物检测 | 第36-38页 |
2.2.3 目的蛋白浓度测定 | 第38页 |
2.2.4 纯化蛋白对 α-NA酶的促动力学测定 | 第38-40页 |
2.2.5 纯化蛋白对 β-氯氰菊酯的代谢活性 | 第40页 |
2.3 小结与讨论 | 第40-42页 |
2.3.1 小结 | 第40页 |
2.3.2 讨论 | 第40-42页 |
第3章 棉铃虫羧酸酯酶CarE001C的原核表达和活性测定 | 第42-50页 |
3.1 材料与方法 | 第42-43页 |
3.1.1 材料 | 第42页 |
3.1.2 方法 | 第42-43页 |
3.2 结果与分析 | 第43-48页 |
3.2.1 重组体构建 | 第43-45页 |
3.2.2 目的基因表达产物检测 | 第45页 |
3.2.3 目的蛋白浓度测定 | 第45页 |
3.2.4 纯化蛋白对 α-NA酶的促动力学测定 | 第45-47页 |
3.2.5 纯化蛋白对杀虫剂的代谢活性 | 第47-48页 |
3.3 小结和讨论 | 第48-50页 |
3.3.1 小结 | 第48页 |
3.3.2 讨论 | 第48-50页 |
第4章 CarE001C单位点突变体对拟除虫菊酯杀虫剂的代谢作用 | 第50-60页 |
4.1 材料与方法 | 第50-52页 |
4.1.1 材料 | 第50页 |
4.1.2 仪器设备 | 第50页 |
4.1.3 方法 | 第50-52页 |
4.2 结果分析 | 第52-58页 |
4.2.1 突变基因的序列验证 | 第52-55页 |
4.2.2 突变酶的SDS-PAGE和Western-Blot检测 | 第55页 |
4.2.3 突变酶的浓度测定 | 第55页 |
4.2.4 突变酶对 α-NA的酶促降解活性 | 第55-57页 |
4.2.5 突变酶对拟除虫菊酯杀虫剂的代谢降解活性 | 第57-58页 |
4.3 小结与讨论 | 第58-60页 |
4.3.1 小结 | 第58页 |
4.3.2 讨论 | 第58-60页 |
第5章 CarE001C多位点突变体对有机磷杀虫剂的代谢作用 | 第60-69页 |
5.1 材料与方法 | 第60-62页 |
5.1.1 材料 | 第60页 |
5.1.2 仪器设备 | 第60页 |
5.1.3 方法 | 第60-62页 |
5.2 结果分析 | 第62-67页 |
5.2.1 突变基因的序列验证 | 第62页 |
5.2.2 突变酶的SDS-PAGE和Western-Blot检测 | 第62-65页 |
5.2.3 突变酶的浓度确定 | 第65页 |
5.2.4 突变酶对 α-NA的酶促降解活性 | 第65-66页 |
5.2.5 突变酶对有机磷杀虫剂的代谢降解活性 | 第66-67页 |
5.3 小结与讨论 | 第67-69页 |
5.3.1 小结 | 第67页 |
5.3.2 讨论 | 第67-69页 |
第6章 全文总结 | 第69-72页 |
6.1 论文创新点 | 第69页 |
6.2 主要结论 | 第69页 |
6.3 讨论 | 第69-71页 |
6.4 下一步研究工作 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-78页 |
附录 | 第78-83页 |
缩略语 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
作者简介 | 第85页 |