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糖基工程酵母表面呈现抗体库的构建和抗真菌β-甘露糖型抗体的筛选

缩略词表第5-6页
摘要第6-9页
Abstract第9-11页
前言第12-18页
第一部分 实验材料第18-22页
    1.1 质粒第18页
    1.2 菌株和蛋白第18页
    1.3 工具酶、抗体及试剂第18-19页
    1.4 主要培养基第19页
    1.5 主要溶液第19页
    1.6 引物设计第19-22页
第二部分 实验方法第22-32页
    2.1 糖基工程酵母抗体库的构建第22-27页
        2.1.1 锚定蛋白表达载体pGE-AOX-Fc-Sed质粒的构建第22-24页
        2.1.2 抗HA7抗体表达载体的构建第24-26页
        2.1.3 糖基工程酵母抗体库的构建第26-27页
    2.2 糖基工程酵母抗体库的筛选第27-29页
        2.2.1 羧基免疫磁珠偶联HA7蛋白第27-28页
        2.2.2 HA7免疫磁珠筛选抗体库第28页
        2.2.3 磁珠筛选的单克隆表达抗体的活性检测第28-29页
    2.3 N2-抗体结合靶点和功能分析第29-32页
        2.3.1 N2-2 抗体的表达和纯化第29页
        2.3.2 N2-2 抗体结合的靶点分析第29-31页
        2.3.3 N2-2 抗体的功能分析第31-32页
第三部分 实验结果第32-44页
    3.1 糖基工程酵母抗体库的构建第32-38页
        3.1.1 锚定蛋白表达载体pGE-AOX-Fc-Sed质粒的构建第32-33页
        3.1.2 抗HA7抗体表达载体的构建第33-35页
        3.1.3 糖基工程酵母抗体库的构建第35-38页
    3.2 糖基工程酵母抗体库的筛选第38页
    3.3 N2-2 抗体结合靶点分析第38-41页
        3.3.1 PNGase F酶对糖链酶切的分析第38-40页
        3.3.2 β-甘露糖苷酶对糖链酶切的分析第40-41页
    3.4 N2-2 抗体的活性和功能分析第41-44页
        3.4.1 N2-2 抗体对白色念珠菌的结合能力第41页
        3.4.2 N2-2 抗体对白色念珠菌的中和活性的检测第41-44页
第四部分 结论第44-46页
第五部分 讨论第46-50页
    5.1 糖基工程酵母抗体库的构建第46-47页
    5.2 抗体库的免疫磁珠法筛选第47页
    5.3 N2-2 抗体靶点测定和活性检测第47-50页
参考文献第50-54页
论著第54-66页
个人简历第66-68页
致谢第68页

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