| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13页 |
| 1.1 葡萄糖二酸概述 | 第7-9页 |
| 1.1.1 葡萄糖二酸简介 | 第7页 |
| 1.1.2 葡萄糖二酸的应用 | 第7-8页 |
| 1.1.3 葡萄糖二酸的生产方法 | 第8-9页 |
| 1.2 微生物合成葡萄糖二酸进展 | 第9-11页 |
| 1.2.1 大肠杆菌合成葡萄糖二酸进展 | 第9-11页 |
| 1.2.2 酵母合成葡萄糖二酸进展 | 第11页 |
| 1.3 立题背景与意义 | 第11-12页 |
| 1.4 主要研究内容 | 第12-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-22页 |
| 2.1 实验材料 | 第13-15页 |
| 2.1.1 质粒和菌株 | 第13-14页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第14-15页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第15页 |
| 2.1.4 培养基 | 第15页 |
| 2.2 实验方法 | 第15-22页 |
| 2.2.1 分子生物学操作 | 第15-17页 |
| 2.2.2 重组菌的构建 | 第17-19页 |
| 2.2.3 菌株培养方法 | 第19-20页 |
| 2.2.4 MIOX随机突变体库的构建和高通量筛选 | 第20页 |
| 2.2.5 测定及分析方法 | 第20-22页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第22-38页 |
| 3.1 酿酒酵母中葡萄糖二酸合成途径的构建和强化 | 第22-28页 |
| 3.1.1 葡萄糖二酸合成菌株的构建 | 第22-23页 |
| 3.1.2 葡萄糖二酸的定量检测 | 第23-24页 |
| 3.1.3 过量表达肌醇合成途径关键酶强化葡萄糖二酸的合成 | 第24-26页 |
| 3.1.4 INO1上游激活序列对葡萄糖二酸产量的影响 | 第26-27页 |
| 3.1.5 小结 | 第27-28页 |
| 3.2 敲除PFK1/PFK2基因强化葡萄糖二酸的合成 | 第28-30页 |
| 3.2.1 PFK1/PFK2基因敲除菌株的鉴定 | 第28页 |
| 3.2.2 PFK1/PFK2基因缺失菌株的生长特征研究 | 第28-29页 |
| 3.2.3 敲除PFK1/PFK2对葡萄糖二酸产量的影响 | 第29页 |
| 3.2.4 小结 | 第29-30页 |
| 3.3 葡萄糖二酸合成途径关键基因MIOX的突变 | 第30-34页 |
| 3.3.1 MIOX突变体库的高通量筛选 | 第30-31页 |
| 3.3.2 MIOX突变体的酶活测定 | 第31-32页 |
| 3.3.3 MIOX突变体的作用力分析 | 第32-33页 |
| 3.3.4 MIOX突变体对葡萄糖二酸产量的影响 | 第33页 |
| 3.3.5 小结 | 第33-34页 |
| 3.4 重组菌的发酵优化 | 第34-38页 |
| 3.4.1 摇瓶发酵优化 | 第34-36页 |
| 3.4.2 重组菌分批补料发酵 | 第36-37页 |
| 3.4.3 小结 | 第37-38页 |
| 主要结论与展望 | 第38-40页 |
| 主要结论 | 第38页 |
| 展望 | 第38-40页 |
| 致谢 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第47页 |
