利用生物信息学方法制备尖吻蝮蛇蛇毒DNA疫苗
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 前言及研究背景 | 第9-15页 |
| ·毒蛇种类及危害 | 第9-10页 |
| ·研究背景及意义 | 第10-15页 |
| 第二章 材料和方法 | 第15-30页 |
| ·材料 | 第15-18页 |
| ·实验动物 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15-16页 |
| ·试剂配制 | 第16-17页 |
| ·仪器设备 | 第17-18页 |
| ·主要方法 | 第18-30页 |
| ·总RNA 提取 | 第18页 |
| ·通过RT-PCR 方法进行cDNA 合成 | 第18-19页 |
| ·扩增PI 金属蛋白酶cDNA 序列 | 第19-20页 |
| ·扩增PIII 金属蛋白酶cDNA 序列 | 第20-22页 |
| ·胶回收DNA 片段 | 第22-23页 |
| ·连接T 载体 | 第23页 |
| ·转化DH5α感受态细胞 | 第23-24页 |
| ·质粒小量提取 | 第24-25页 |
| ·序列测定 | 第25页 |
| ·生物信息学方法进行抗原位点分析 | 第25页 |
| ·连接真核表达载体pIRESneo | 第25-27页 |
| ·质粒大量制备 | 第27-28页 |
| ·质粒免疫小鼠 | 第28页 |
| ·全毒免疫马 | 第28-29页 |
| ·用ELISA 法检测抗体水平 | 第29页 |
| ·出血中和实验 | 第29页 |
| ·攻毒实验 | 第29页 |
| ·实验结果数据统计分析 | 第29-30页 |
| 第三章 结果及数据分析 | 第30-44页 |
| ·总RNA 提取结果和鉴定 | 第30页 |
| ·扩增PI 金属蛋白酶cDNA 序列结果 | 第30-31页 |
| ·扩增PIII 金属蛋白酶cDNA 序列结果 | 第31-32页 |
| ·酶切鉴定pMD19-T 质粒 | 第32-33页 |
| ·测定的金属蛋白酶cDNA 序列 | 第33-35页 |
| ·用BLAST 检索到的序列 | 第35-36页 |
| ·生物信息学方法分析得到的抗原位点 | 第36-38页 |
| ·人工合成序列 | 第38-39页 |
| ·连接真核表达载体pIRESneo 结果 | 第39-40页 |
| ·用ELISA 法检测抗体水平结果 | 第40-41页 |
| ·出血中和实验结果 | 第41-42页 |
| ·攻毒实验结果 | 第42-44页 |
| 第四章 讨论及展望 | 第44-47页 |
| ·重叠延伸PCR 方法的使用 | 第44页 |
| ·生物信息学方法进行抗原位点分析 | 第44-45页 |
| ·蛇毒DNA 疫苗和佐剂 | 第45页 |
| ·免疫效果评价 | 第45-46页 |
| ·下一步实验计划 | 第46页 |
| ·展望 | 第46-47页 |
| 小结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
