| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第1章 绪论 | 第11-18页 |
| 1.1 植物抗寒性的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.1.1 低温对植物的影响 | 第11页 |
| 1.1.2 植物抗寒性机制 | 第11-13页 |
| 1.2 紫花苜蓿的抗寒性 | 第13页 |
| 1.3 MADS-box转录因子的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.3.1 MADS-box转录因子的发现 | 第13-14页 |
| 1.3.2 MADS-box转录因子的结构和功能 | 第14-16页 |
| 1.4 植物抗逆基因工程的研究 | 第16-17页 |
| 1.5 本课题的研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 第2章 紫花苜蓿Ms MADS1基因的克隆 | 第18-34页 |
| 2.1 引言 | 第18页 |
| 2.2 实验材料 | 第18-21页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.2.2 载体和菌株 | 第18页 |
| 2.2.3 主要仪器设备 | 第18-19页 |
| 2.2.4 主要试剂 | 第19-21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-26页 |
| 2.3.1 紫花苜蓿总RNA提取 | 第21-22页 |
| 2.3.2 cDNA的合成 | 第22页 |
| 2.3.3 PCR扩增目的基因 | 第22-23页 |
| 2.3.4 MsMADS1基因片段的回收 | 第23页 |
| 2.3.5 克隆载体p MD18T-MsMADS1的构建 | 第23-24页 |
| 2.3.6 MsMADS1基因的生物信息学分析 | 第24页 |
| 2.3.7 MsMADS1基因的表达 | 第24-26页 |
| 2.4 实验结果 | 第26-33页 |
| 2.4.1 MsMADS1基因的克隆 | 第26-27页 |
| 2.4.2 pMD18T- Ms MADS1克隆载体的构建 | 第27页 |
| 2.4.3 MsMADS1基因序列的生物信息学分析 | 第27-30页 |
| 2.4.4 MsMADS1基因的表达 | 第30-33页 |
| 2.5 本章小结 | 第33-34页 |
| 第3章 MsMADS1基因对烟草的遗传转化 | 第34-45页 |
| 3.1 引言 | 第34页 |
| 3.2 实验材料 | 第34-35页 |
| 3.2.1 质粒载体与菌株 | 第34页 |
| 3.2.2 植物材料 | 第34页 |
| 3.2.3 实验仪器及药品 | 第34-35页 |
| 3.3 实验方法 | 第35-39页 |
| 3.3.1 pCAMBIA1305.1-Ms MADS1植物表达载体的构建 | 第35-37页 |
| 3.3.2 pCAMBIA1305.1-Ms MADS1农杆菌的转化 | 第37页 |
| 3.3.3 烟草的遗传转化 | 第37-38页 |
| 3.3.4 转基因烟草的分子鉴定 | 第38-39页 |
| 3.3.5 转基因烟草的qRT-PCR检测 | 第39页 |
| 3.4 实验结果 | 第39-44页 |
| 3.4.1 MsMADS1基因植物表达载体的构建 | 第39-41页 |
| 3.4.2 pCAMBIA1305.1-Ms MADS1转化农杆菌 | 第41-42页 |
| 3.4.3 MsMADS1基因对烟草的遗传转化 | 第42-43页 |
| 3.4.4 转基因烟草的PCR检测 | 第43-44页 |
| 3.4.5 转基因烟草的qRT-PCR检测 | 第44页 |
| 3.5 本章小结 | 第44-45页 |
| 第4章 转Ms MADS1基因烟草的抗寒性分析 | 第45-60页 |
| 4.1 引言 | 第45页 |
| 4.2 实验材料 | 第45页 |
| 4.3 实验方法 | 第45-54页 |
| 4.3.1 转Ms MADS1基因烟草的低温胁迫处理 | 第45-46页 |
| 4.3.2 转Ms MADS1基因烟草的生理指标检测 | 第46-53页 |
| 4.3.3 数据处理 | 第53-54页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第54-59页 |
| 4.4.1 转Ms MADS1基因烟草的低温表型分析 | 第54页 |
| 4.4.2 转Ms MADS1基因烟草的生理指标分析 | 第54-59页 |
| 4.5 本章小结 | 第59-60页 |
| 第5章 讨论 | 第60-64页 |
| 5.1 MADS-box转录因子的低温响应 | 第60页 |
| 5.2 Ms MADS1基因的克隆及功能预测 | 第60-61页 |
| 5.3 Ms MADS1基因的表达分析 | 第61-62页 |
| 5.4 转Ms MADS1基因烟草的抗寒性分析 | 第62-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-75页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
