| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-26页 |
| 1.1 外来入侵植物成功入侵的特点 | 第11-14页 |
| 1.1.1 繁殖特性 | 第11-12页 |
| 1.1.2 传播特性 | 第12页 |
| 1.1.3 对环境的忍耐性 | 第12页 |
| 1.1.4 表型可塑性 | 第12-13页 |
| 1.1.5 遗传结构 | 第13-14页 |
| 1.1.6 化感作用 | 第14页 |
| 1.2 紫茎泽兰侵入扩张的机理研究 | 第14-16页 |
| 1.2.1 紫茎泽兰侵入扩张的分子机理研究 | 第14-15页 |
| 1.2.2 紫茎泽兰有利于入侵的生物学特性 | 第15页 |
| 1.2.3 紫茎泽兰的生态适应性 | 第15-16页 |
| 1.2.4 紫茎泽兰的化感作用 | 第16页 |
| 1.3 植物小热激蛋白的研究进展 | 第16-23页 |
| 1.3.1 小分子热激蛋白的基本性质 | 第17-19页 |
| 1.3.2 sHSPs的功能 | 第19-23页 |
| 1.4 叶绿素荧光动力学在耐热生理研究中的应用 | 第23-26页 |
| 1.4.1 快速叶绿素荧光诱导动力学曲线的意义 | 第23-24页 |
| 1.4.2 叶绿素荧光在植物热胁迫研究中的应用 | 第24-26页 |
| 第二章 高温下紫茎泽兰HSP17.7基因的克隆和序列分析 | 第26-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第26页 |
| 2.1.3 酶及生化试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.4 碱裂解法少量提取质粒溶液配置 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-36页 |
| 2.2.1 利用TAINGEN公司的RNA提取试剂提取RNA | 第27页 |
| 2.2.2 反转录cDNA第一条链的合成 | 第27-28页 |
| 2.2.3 设计简并引物得到HSP17.7基因的中间片段 | 第28-32页 |
| 2.2.4 用RACE法得到HSP17.7基因的cDNA 3′端片段 | 第32-33页 |
| 2.2.5 用RACE法得到HSP17.7基因的cDNA 5′端片段 | 第33-35页 |
| 2.2.6 HSP17.7基因全长cDNA的克隆 | 第35-36页 |
| 2.3 结果与分析 | 第36-48页 |
| 2.3.1 紫茎泽兰HSP17.7的克隆 | 第36-38页 |
| 2.3.2 内含子检测 | 第38-39页 |
| 2.3.3 HSP17.7基因分析 | 第39-48页 |
| 2.4 讨论 | 第48-49页 |
| 第三章 半定量RT-PCR检测高温条件下不同种群小热激蛋白HSP17.7基因表达差异 | 第49-61页 |
| 3.1 实验材料 | 第49页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第49页 |
| 3.1.2 酶及生化试剂 | 第49页 |
| 3.2 实验方法 | 第49-52页 |
| 3.2.1 PCR引物设计 | 第49-50页 |
| 3.2.2 总RNA的提取与完整性检测 | 第50页 |
| 3.2.3 去除DNA | 第50-51页 |
| 3.2.4 反转录反应 | 第51页 |
| 3.2.5 HSP17.7和actin基因的PCR扩增 | 第51页 |
| 3.2.6 引物对之间竞争的控制 | 第51-52页 |
| 3.2.7 PCR反应产物的检测 | 第52页 |
| 3.3 结果与分析 | 第52-60页 |
| 3.3.1 紫茎泽兰总RNA完整性及纯度检测 | 第52页 |
| 3.3.2 引物对之间竞争对PCR的影响 | 第52-53页 |
| 3.3.3 半定量RT—PCR循环次数的确定 | 第53页 |
| 3.3.4 半定量RT-PCR体系的重复性检测 | 第53-54页 |
| 3.3.5 半定量RT—PCR检测HSP17.7基因的表达 | 第54-60页 |
| 3.4 讨论 | 第60-61页 |
| 第四章 紫茎泽兰小热激蛋白HP17.7基因的原核表达 | 第61-75页 |
| 4.1 实验材料 | 第61-62页 |
| 4.1.1 酶及生化试剂 | 第61页 |
| 4.1.2 菌株与质粒 | 第61页 |
| 4.1.3 主要试剂的配制 | 第61-62页 |
| 4.2 实验方法 | 第62-66页 |
| 4.2.1 引物设计 | 第62页 |
| 4.2.2 重组质粒及表达载体质粒DNA的制备 | 第62页 |
| 4.2.3 酶切及酶切产物回收 | 第62-63页 |
| 4.2.4 目的片段与表达载体pET-28a vector的连接 | 第63页 |
| 4.2.5 转化及筛选 | 第63-64页 |
| 4.2.6 融合表达载体的转化 | 第64页 |
| 4.2.7 融合蛋白的诱导表达 | 第64页 |
| 4.2.8 SDS聚丙烯酰胺电泳检测 | 第64-65页 |
| 4.2.9 不同条件下大肠杆菌的生长曲线 | 第65-66页 |
| 4.2.10 大肠杆菌细胞活力实验 | 第66页 |
| 4.3 结果与分析 | 第66-74页 |
| 4.3.1 大肠杆菌表达载体PET+HSP的构建和鉴定 | 第66-69页 |
| 4.3.2 不同条件下大肠杆菌的生长曲线 | 第69-71页 |
| 4.3.3 异源表达HSP17.7基因提高大肠杆菌在极端温度下的生存能力 | 第71-74页 |
| 4.4 讨论 | 第74-75页 |
| 第五章 紫茎泽兰高温耐受性分化的荧光检测 | 第75-84页 |
| 5.1 材料与方法 | 第75-77页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第75-76页 |
| 5.1.3 方法 | 第76-77页 |
| 5.2 结果 | 第77-82页 |
| 5.2.1 热胁迫对F_o等参数的影响 | 第77-81页 |
| 5.2.2 高温对紫茎泽兰电解质渗漏量的影响 | 第81-82页 |
| 5.3 讨论 | 第82-84页 |
| 全文讨论与总结 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
