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miR-9靶向调控NRP1增强A549细胞放射敏感性的研究

内容提要第4-5页
中文摘要第5-9页
Abstract第9-13页
英文缩略表第16-18页
第1章 文献综述第18-28页
    1.1 MicroRNA 及其特点和作用第18页
    1.2 miRNAs 与肺癌第18-23页
        1.2.1 肺癌诊断中的 miRNAs第19-22页
        1.2.2 miRNAs 与肺癌的治疗第22-23页
    1.3 microRNA 与电离辐射第23-24页
    1.4 miR-9 与肿瘤第24-25页
    1.5 microRNA 的临床应用及其前景第25页
    1.6 NRP1 及其对肿瘤的影响第25-26页
    1.7 立题依据第26-28页
第2章 材料与方法第28-45页
    2.1 主要器材与试剂第28-31页
        2.1.1 实验器材第28页
        2.1.2 实验试剂第28-31页
    2.2 主要仪器第31-32页
    2.3 试剂的配制第32-34页
        2.3.1 细胞培养相关试剂的配制第32页
        2.3.2 细菌培养相关试剂的配制第32-33页
        2.3.3 Western blot 实验相关试剂的配制第33-34页
    2.4 细胞株第34页
        2.4.1 细胞培养第34页
        2.4.2 细胞转染第34页
    2.5 照射条件第34-35页
    2.6 应用生物信息学对靶基因的预测第35页
    2.7 双荧光报告基因分析第35-39页
        2.7.1 荧光素酶报告基因载体的构建第35-38页
        2.7.2 荧光素酶报告基因分析(Liciferase reporter assay)第38-39页
    2.8 细胞表型相关指标的检测第39-41页
        2.8.1 MTT 实验第39页
        2.8.2 细胞周期第39页
        2.8.3 细胞凋亡率的检测:Annexin V/PI 双染法第39-40页
        2.8.4 Transwell 法第40-41页
    2.9 细胞放射敏感性指标的检测第41-42页
    2.10 Real-Time PCR 法检测转录水平的变化第42-43页
    2.11 Western blot 法检测蛋白水平的变化第43-44页
    2.12 统计学分析第44-45页
第3章 实验结果第45-56页
    3.1 验证 miR-9 与 NRP1 的靶向调控关系第45-48页
        3.1.1 miR-9 靶基因的预测第45页
        3.1.2 pEZX-MT05-NRP1-3'UTR 质粒的构建第45-46页
        3.1.3 pEZX-MT05-NRP1-3'UTR 突变质粒的构建第46页
        3.1.4 双荧光素酶报告基因实验第46-47页
        3.1.5 miR-9 对 A549 细胞 NRP1 基因转录水平的影响第47-48页
        3.1.6 miR-9 对 A549 细胞 NRP1 蛋白表达水平的影响第48页
    3.2 miR-9 靶向调控 NRP1 对 A549 细胞辐射反应的影响第48-52页
        3.2.1 miR-9 对 A549 细胞生长增殖的影响第48-49页
        3.2.2 miR-9 对细胞周期的影响第49-50页
        3.2.3 miR-9 对 A549 细胞凋亡率的影响第50-51页
        3.2.4 miR-9 对 A549 细胞迁移、侵袭能力的影响第51-52页
    3.3 miR-9 增强 A549 细胞的放射敏感性第52-53页
        3.3.1 miR-9 对 A549 细胞集落形成能力的影响第52-53页
    3.4 miR-9 增强 A549 细胞的放射敏感性的信号通路机制第53-56页
第4章 讨论第56-61页
    4.1 miR-9 与靶基因 NRP1第57页
    4.2 miR-9 靶向调控 NRP1 对 A549 细胞辐射反应的影响第57-59页
    4.3 miR-9 增强 A549 细胞的辐射敏感性第59页
    4.4 miR-9 增强 A549 细胞辐射敏感性的信号通路机制第59-61页
结论第61-62页
参考文献第62-68页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第68-69页
致谢第69页

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