摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
目录 | 第8-11页 |
1 前言 | 第11-26页 |
1.1 光逆境对植物光合作用的影响及其适应性机制研究进展 | 第11-16页 |
1.1.1 弱光逆境对植物光合特性的影响及其适应性机制 | 第11-13页 |
1.1.2 强光逆境对植物光合特性的影响及其适应性机制 | 第13-16页 |
1.2 植物叶绿体蛋白质组学研究进展 | 第16-20页 |
1.2.1 蛋白质组学的概念 | 第16页 |
1.2.2 蛋白质组学研究技术 | 第16-18页 |
1.2.3 植物叶绿体蛋白质组学的研究进展 | 第18-20页 |
1.3 植物磷酸化蛋白质组学研究进展 | 第20-21页 |
1.4 木薯光合作用研究进展 | 第21-22页 |
1.5 木薯蛋白质组学研究进展 | 第22-23页 |
1.6 本研究目的与意义 | 第23-24页 |
1.7 研究内容和技术路线 | 第24-26页 |
1.7.1 研究内容 | 第24-25页 |
1.7.2 技术路线 | 第25-26页 |
2 实验材料与方法 | 第26-48页 |
2.1 木薯材料 | 第26页 |
2.2 木薯叶绿体响应不同光照条件的生理生化变化研究 | 第26-30页 |
2.2.1 总叶绿素含量测定 | 第26页 |
2.2.2 膜损伤相关指标丙二醛含量的测定 | 第26-27页 |
2.2.3 淀粉含量的测定 | 第27页 |
2.2.4 渗透调节相关指标测定 | 第27页 |
2.2.5 叶片抗氧化酶活性的测定 | 第27-30页 |
2.3 木薯叶绿体响应不同光照条件的差异蛋白质组学研究 | 第30-37页 |
2.3.1 叶绿体分离 | 第30页 |
2.3.2 叶绿体蛋白质的提取 | 第30-31页 |
2.3.3 叶绿体蛋白质的检测 | 第31-32页 |
2.3.4 叶绿体蛋白质的双向电泳 | 第32-34页 |
2.3.5 凝胶染色及图像扫描采集 | 第34-35页 |
2.3.6 凝胶图像分析 | 第35页 |
2.3.7 质谱鉴定 | 第35-37页 |
2.4 差异蛋白质的生物信息学分析 | 第37-39页 |
2.4.1 数据来源 | 第37页 |
2.4.2 分析软件 | 第37页 |
2.4.3 试验方法 | 第37-39页 |
2.5 差异蛋白质的mRNA水平的验证 | 第39-42页 |
2.5.1 木薯叶片RNA提取 | 第39页 |
2.5.2 cDNA合成 | 第39-40页 |
2.5.3 基因半定量实验 | 第40-41页 |
2.5.4 基因实时荧光定量实验 | 第41-42页 |
2.6 木薯叶绿体响应不同光照条件的磷酸化蛋白质组学研究 | 第42-44页 |
2.6.1 叶绿体分离及其蛋白质的提取、检测和双向电泳 | 第42页 |
2.6.2 凝胶染色及图像扫描采集 | 第42-43页 |
2.6.3 凝胶图像分析 | 第43页 |
2.6.4 质谱鉴定 | 第43页 |
2.6.5 差异蛋白质的生物信息学分析 | 第43-44页 |
2.7 木薯高光效相关基因的克隆和序列分析 | 第44-48页 |
2.7.1 木薯叶片RNA提取 | 第44页 |
2.7.2 引物设计 | 第44页 |
2.7.3 基因保守区扩增 | 第44页 |
2.7.4 基因3'RACE扩增 | 第44-45页 |
2.7.5 基因5'RACE扩增 | 第45-48页 |
3 结果与分析 | 第48-99页 |
3.1 木薯叶绿体响应不同光照条件的生理学变化 | 第48-53页 |
3.1.1 不同光照条件对木薯叶片叶绿素含量的影响 | 第48-49页 |
3.1.2 不同光照条件对木薯叶片丙二醛含量的影响 | 第49页 |
3.1.3 不同光照条件对木薯叶片淀粉含量的影响 | 第49-50页 |
3.1.4 不同光照条件对木薯叶片渗透保护物质积累影响 | 第50-51页 |
3.1.5 不同光照条件对木薯叶片抗氧化保护酶活性的影响 | 第51-53页 |
3.2 差异蛋白质的鉴定 | 第53-64页 |
3.2.1 叶绿体蛋白质的检测 | 第53-54页 |
3.2.2 差异蛋白质的筛选与分析 | 第54-59页 |
3.2.3 差异蛋白质的鉴定分析 | 第59-64页 |
3.3 差异蛋白质的生物信息学分析 | 第64-79页 |
3.3.1 GO注释分析 | 第64-70页 |
3.3.2 Cluster聚类分析 | 第70-72页 |
3.3.3 KEGG Pathway分析 | 第72-79页 |
3.4 差异蛋白质的mRNA水平分析 | 第79-83页 |
3.4.1 引物设计 | 第79-80页 |
3.4.2 转录水平分析 | 第80-83页 |
3.5 不同光照条件下木薯叶绿体磷酸化蛋白质组学研究 | 第83-91页 |
3.5.1 磷酸化差异蛋白质鉴定 | 第83-84页 |
3.5.2 磷酸化差异蛋白质的GO注释和KEGG Pathway分析 | 第84-91页 |
3.6 木薯高光效相关基因的克隆和序列分析 | 第91-99页 |
3.6.1 保守区扩增 | 第92页 |
3.6.2 3'-RACE扩增 | 第92页 |
3.6.3 5'-RACE扩增 | 第92-93页 |
3.6.4 序列分析 | 第93-99页 |
4 讨论 | 第99-105页 |
4.1 木薯叶绿体蛋白质组学技术体系的建立 | 第99-100页 |
4.2 不同光照条件下木薯叶片抗氧化机制 | 第100-101页 |
4.3 不同光照条件下木薯叶绿体差异蛋白质的细胞通路分析 | 第101-104页 |
4.4 差异蛋白质的转录水平验证 | 第104-105页 |
5 结论 | 第105-106页 |
参考文献 | 第106-117页 |
附表 | 第117-127页 |
致谢 | 第127页 |