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华东地区鸭源禽致病性大肠杆菌系统进化群及毒力相关基因特性分析

摘要第9-12页
ABSTRACT第12-15页
前言第16-18页
符号及缩略语说明第18-19页
上篇 文献综述第19-59页
    第一章 禽致病性大肠杆菌的研究进展第19-39页
        1 病原学第19-20页
        2 流行病学第20-21页
        3 致病机理第21页
        4 禽致病性大肠杆菌的毒力因子第21-32页
            4.1 黏附素(Adhesin)第22-24页
            4.2 摄铁系统(Ferric uptake regulator,Fur)第24-25页
            4.3 溶血素(Haemolysin)第25-26页
            4.4 抗血清存活因子第26-30页
            4.5 毒素(Toxin)第30页
            4.6 侵袭素第30-31页
            4.7 其它的毒力因子第31-32页
        参考文献第32-39页
    第二章 Red重组技术研究进展第39-45页
        1 Red重组系统的结构第39页
        2 Red系统的重组机制第39-40页
        3 Red系统的同源重组过程第40-41页
        4 Red重组系统的应用第41-42页
            4.1 染色体上基因的修饰与改造第41页
            4.2 质粒DNA的靶向修饰第41-42页
        5 Red重组技术的应用前景第42-43页
        参考文献第43-45页
    第三章 细胞凋亡的研究进展第45-59页
        1 细胞凋亡的一般概念第45-48页
            1.1 细胞凋亡的概念第45-46页
            1.2 细胞凋亡与坏死的鉴别及研究方法第46-48页
        2 细胞凋亡的生物学特征第48-49页
            2.1 形态学变化第48页
            2.2 生物化学改变第48-49页
        3 细胞凋亡的分子调控机理第49-52页
        4 细胞凋亡的检测方法第52-55页
            4.1 细胞凋亡的形态学检测第52-53页
            4.2 细胞凋亡的生化检测第53-54页
            4.3 细胞凋亡检测方法的选择第54-55页
        5 细胞凋亡与医学的关系第55-56页
            5.1 细胞凋亡与免疫学的关系第55页
            5.2 细胞凋亡与疾病的关系第55页
            5.3 细胞凋亡与临床医学的关系第55-56页
        参考文献第56-59页
下篇 研究内容第59-165页
    第四章 华东地区鸭源APEC的分离鉴定与系统进化群分析第59-73页
        摘要第59-61页
        1 材料与方法第61-63页
            1.1 病料及菌株来源第61页
            1.2 试剂和仪器第61页
            1.3 细菌的分离与纯培养第61-62页
            1.4 生化试验第62页
            1.5 大肠杆菌显色培养基快速鉴定第62页
            1.6 系统进化群分析第62-63页
            1.7 统计分析第63页
        2 结果第63-66页
            2.1 临床病例大肠杆菌分离第63-65页
            2.2 PCR扩增第65页
            2.3 分离菌株的系统进化群分析第65-66页
        3 小结与讨论第66-68页
        参考文献第68-71页
        ABSTRACT第71-73页
    第五章 华东地区鸭源APEC非侵袭相关的16个毒力基因的检测第73-93页
        摘要第73-74页
        1 材料与方法第74-78页
            1.1 菌株来源第74-75页
            1.2 试剂和仪器第75页
            1.3 检测用毒力基因第75-76页
            1.4 DNA模板的制备第76页
            1.5 引物设计及PCR检测第76-78页
            1.6 PCR产物电泳鉴定第78页
            1.7 多重PCR方法的建立第78页
            1.8 统计分析第78页
        2 结果第78-86页
            2.1 PCR检测电泳结果第78-80页
            2.2 临床分离株非侵袭相关的毒力基因的PCR检测结果第80-81页
            2.3 临床分离株非侵袭相关的毒力基因的分布第81-82页
            2.4 临床分离株中非侵袭相关的毒力基因间的分布第82-83页
            2.5 临床分离株非侵袭相关的毒力基因的分布模式第83-86页
        3 讨论与小结第86-89页
        参考文献第89-91页
        ABSTRACT第91-93页
    第六章 华东地区鸭源APEC侵袭相关基因的检测第93-109页
        摘要第93-94页
        1 材料与方法第94-96页
            1.1 菌株来源第94页
            1.2 主要材料第94页
            1.3 检测用侵袭相关基因第94页
            1.4 DNA模板的制备第94-95页
            1.5 引物设计及PCR检测第95-96页
            1.6 PCR产物电泳鉴定第96页
            1.7 多重PCR方法的建立第96页
            1.8 统计分析第96页
        2 结果第96-103页
            2.1 PCR检测电泳结果第96-98页
            2.2 临床分离株侵袭相关基因的PCR检测结果第98-99页
            2.3 临床分离株侵袭相关基因的分布第99-100页
            2.4 临床分离株中两个侵袭相关基因间的关系第100页
            2.5 侵袭相关基因的分布模式第100-103页
            2.6 毒力相关基因和系统进化群的关系第103页
        3 讨论与小结第103-106页
        参考文献第106-108页
        ABSTRACT第108-109页
    第七章 核酸斑点杂交法检测鸭源APEC毒力相关基因第109-121页
        摘要第109-110页
        1 材料和方法第110-112页
            1.1 菌株来源第110页
            1.2 试剂和器材第110页
            1.3 引物设计及PCR第110页
            1.4 地高辛标记探针的制备第110-111页
            1.5 地高辛标记探针的效率检测第111页
            1.6 地高辛标记探针的敏感性检测第111页
            1.7 探针特异性检测第111-112页
            1.8 样品检测第112页
        2 结果第112-116页
            2.1 PCR法对目的基因扩增第112-113页
            2.2 探针标记效率第113页
            2.3 探针敏感性第113-114页
            2.4 探针特异性第114页
            2.5 临床样品的检测第114-116页
        3 讨论与小结第116-118页
        参考文献第118-120页
        ABSTRACT第120-121页
    第八章 鸭源APEC分离株DE205B的主要特性研究第121-135页
        摘要第121-122页
        1 材料与方法第122-125页
            1.1 菌株、细胞和实验动物第122-123页
            1.2 主要试剂及仪器第123页
            1.3 溶血反应第123页
            1.4 SUMECs的体外培养第123-124页
            1.5 分离株的致病性试验第124-125页
        2 结果第125-129页
            2.1 溶血反应第125页
            2.2 细胞生长曲线第125-126页
            2.3 感染SUMECs的光镜观察第126-127页
            2.4 体外感染SUMECs DNA琼脂糖电泳分析第127页
            2.5 流式细胞仪分析第127-128页
            2.6 SUMECs的侵袭率第128页
            2.7 致病性试验第128-129页
        3 讨论与小结第129-131页
        参考文献第131-133页
        ABSTRACT第133-135页
    第九章 鸭源APEC分离株DE205B侵袭相关基因IBEA的序列分析第135-149页
        摘要第135-136页
        1 材料与方法第136-139页
            1.1 材料第136页
            1.2 方法第136-139页
        2 结果第139-146页
            2.1 基因的PCR结果第139-140页
            2.2 重组质粒的鉴定第140-141页
            2.3 基因片段全长序列测定第141-142页
            2.4 基因片段遗传起源分析第142页
            2.5 基因序列差异性分析第142-146页
        3 讨论与小结第146-147页
        参考文献第147-148页
        ABSTRACT第148-149页
    第十章 鸭源APEC分离株DE205B侵袭相关基因IBEA的缺失及主要生物学特性分析第149-165页
        摘要第149-151页
        1 材料与方法第151-154页
            1.1 材料第151-152页
            1.2 PCR引物设计和扩增条件第152页
            1.3 DE205B电击感受态细胞的制备及电击转化第152-153页
            1.4 DE205B/pKD46电击感受态细胞的制备及电击转化第153页
            1.5 缺失株的筛选第153页
            1.6 卡那霉素抗性基因的去除第153页
            1.7 缺失株的主要生物学特性分析第153-154页
        2 结果第154-159页
            2.1 线性打靶DNA的制备第154-155页
            2.2 大肠杆菌DE205B缺失突变株的构建第155-156页
            2.3 大肠杆菌DE205B缺失突变株抗性基因的去除与验证第156页
            2.4 缺失株的主要生物学特性分析第156-159页
        3 讨论与小结第159-161页
        参考文献第161-163页
        ABSTRACT第163-165页
全文总结第165-167页
致谢第167-169页
攻读博士学位期间发表及待发表的文章第169页

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