摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-18页 |
1.1 现在规模化养猪面临的问题 | 第11页 |
1.2 肠道微生物生态系统的组成 | 第11-12页 |
1.2.1 肠道微生物菌群 | 第11页 |
1.2.2 益生菌 | 第11-12页 |
1.3 益生菌的功能与作用 | 第12-15页 |
1.3.1 调节肠道内环境 | 第12页 |
1.3.2 益生菌对动物肠道中病原菌的抑制作用 | 第12-13页 |
1.3.3 益生菌对肠道免疫的作用 | 第13-15页 |
1.3.3.1 益生菌对IgA的影响 | 第13页 |
1.3.3.2 益生菌对巨噬细胞的影响 | 第13-14页 |
1.3.3.3 益生菌对免疫信号通路的影响 | 第14页 |
1.3.3.4 益生菌对代谢的影响 | 第14-15页 |
1.4 炎症信号通路 | 第15页 |
1.5 炎症模型 | 第15-16页 |
1.5.1 炎症反应 | 第15页 |
1.5.2 炎症模型 | 第15-16页 |
1.5.2.1 三硝基苯磺酸(TNBS)诱导炎症性肠病模型 | 第15-16页 |
1.5.2.2 硫酸葡聚糖钠(DSS)溃疡性结肠炎模型 | 第16页 |
1.5.2.3 LPS急性肠炎模型 | 第16页 |
1.6 本试验的目的、意义和研究内容 | 第16-18页 |
1.6.1 试验目的及意义 | 第16页 |
1.6.2 研究内容 | 第16-18页 |
1.6.2.1 技术路线图 | 第17-18页 |
第二章 乳酸杆菌对LPS诱导仔猪肠道炎症的免疫调节及机制 | 第18-45页 |
2.1 材料与方法 | 第18-29页 |
2.1.1 试剂与仪器 | 第18-19页 |
2.1.2 菌株及培养基 | 第19页 |
2.1.3 乳酸杆菌的抗性筛选 | 第19页 |
2.1.4 鼠李糖乳酸杆菌冻干粉的制备 | 第19-20页 |
2.1.5 乳酸杆菌冻干粉存活率的检测 | 第20页 |
2.1.6 实验动物 | 第20页 |
2.1.6.1 仔猪的饲养与管理 | 第20页 |
2.1.7 动物分组及饲养实验 | 第20页 |
2.1.8 样品采集 | 第20-21页 |
2.1.8.1 粪便 | 第20页 |
2.1.8.2 血清 | 第20-21页 |
2.1.8.3 肠道组织、肠道微生物、肝脏及肾脏的采集 | 第21页 |
2.1.9 粪便中鼠李糖乳酸杆菌的数量检测 | 第21页 |
2.1.10 仔猪肠道消化吸收的检测 | 第21-22页 |
2.1.11 猪血清炎症因子的ELISA检测 | 第22-23页 |
2.1.12 免疫印迹Western blot | 第23-26页 |
2.1.12.1 组织全蛋白的提取 | 第23页 |
2.1.12.2 蛋白含量的测定(Bradford法) | 第23页 |
2.1.12.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-PAGE | 第23-25页 |
2.1.12.4 湿转Western blot | 第25-26页 |
2.1.13 免疫组化 | 第26-27页 |
2.1.14 16s rRNA基因序列高通量测序 | 第27-28页 |
2.1.15 GC-MS代谢组学 | 第28-29页 |
2.1.16 数据与分析 | 第29页 |
2.2 结果和分析 | 第29-43页 |
2.2.1 仔猪粪便中乳酸杆菌的排出情况 | 第29-30页 |
2.2.2 仔猪肠道的绒毛结构 | 第30-32页 |
2.2.3 仔猪的血清免疫指标 | 第32-33页 |
2.2.4 乳酸杆菌对仔猪肠道组织免疫信号通路表达水平的影响 | 第33页 |
2.2.5 免疫组化验证鼠李糖乳酸杆菌介导仔猪肠道免疫信号通路的影响 | 第33-35页 |
2.2.6 仔猪回肠内容物 16sRNA高通量测序结果 | 第35-37页 |
2.2.7 仔猪回肠内容物GC-MS代谢组学的结 | 第37-43页 |
2.3 讨论 | 第43-44页 |
2.4 小结 | 第44-45页 |
第三章 乳酸杆菌对LPS诱导基因敲除小鼠肠道炎症的免疫调节及机制 | 第45-58页 |
3.1 材料与方法 | 第45-49页 |
3.1.1 试剂与仪器 | 第45页 |
3.1.2 菌株与培养基 | 第45页 |
3.1.3 鼠李糖乳酸杆菌的抗性筛选 | 第45页 |
3.1.4 实验动物 | 第45-46页 |
3.1.4.1 小鼠的饲养与管理 | 第46页 |
3.1.4.2 试验动物分组和饲养实验 | 第46页 |
3.1.5 样品采集 | 第46-47页 |
3.1.5.1 粪便的收集 | 第46-47页 |
3.1.5.2 采集血清 | 第47页 |
3.1.5.3 肠道组织及肠道微生物 | 第47页 |
3.1.6 肠道内乳酸杆菌的数量检测 | 第47页 |
3.1.7 肠道消化吸收的检测 | 第47页 |
3.1.8 小鼠血清因子的ELISA检测 | 第47-48页 |
3.1.8.1 SOD测定 | 第47-48页 |
3.1.8.2 MDA测定 | 第48页 |
3.1.8.3 D-xylose测定 | 第48页 |
3.1.9 小鼠肠道组织的信号通路表达水平的检测 | 第48页 |
3.1.10 免疫组化试验 | 第48页 |
3.1.11 数据分析 | 第48-49页 |
3.2 结果与分析 | 第49-56页 |
3.2.1 乳酸杆菌的排除情况及在肠道的定植情况 | 第49-50页 |
3.2.1.1 小鼠粪便乳酸杆菌的排出情况 | 第49-50页 |
3.2.1.2 小鼠肠道乳酸杆菌的定植情况 | 第50页 |
3.2.2 小鼠肠道的绒毛结构 | 第50-51页 |
3.2.3 小鼠血清中的免疫指标 | 第51-53页 |
3.2.4 免疫组化验证鼠李糖乳酸杆菌介导小鼠肠道免疫信号通路的影响 | 第53-55页 |
3.2.5 仔猪空肠内容物 16sRNA高通量测序结果 | 第55-56页 |
3.3 讨论 | 第56-57页 |
3.4 小结 | 第57-58页 |
第四章 总结、创新点和后续研究进展 | 第58-59页 |
4.1 总结 | 第58页 |
4.2 创新点 | 第58页 |
4.3 研究与展望 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-64页 |
缩略词表 | 第64-65页 |
作者简介 | 第65-67页 |
致谢 | 第67页 |