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乳酸杆菌对LPS诱导肠道炎症的免疫调节作用及机制研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 文献综述第11-18页
    1.1 现在规模化养猪面临的问题第11页
    1.2 肠道微生物生态系统的组成第11-12页
        1.2.1 肠道微生物菌群第11页
        1.2.2 益生菌第11-12页
    1.3 益生菌的功能与作用第12-15页
        1.3.1 调节肠道内环境第12页
        1.3.2 益生菌对动物肠道中病原菌的抑制作用第12-13页
        1.3.3 益生菌对肠道免疫的作用第13-15页
            1.3.3.1 益生菌对IgA的影响第13页
            1.3.3.2 益生菌对巨噬细胞的影响第13-14页
            1.3.3.3 益生菌对免疫信号通路的影响第14页
            1.3.3.4 益生菌对代谢的影响第14-15页
    1.4 炎症信号通路第15页
    1.5 炎症模型第15-16页
        1.5.1 炎症反应第15页
        1.5.2 炎症模型第15-16页
            1.5.2.1 三硝基苯磺酸(TNBS)诱导炎症性肠病模型第15-16页
            1.5.2.2 硫酸葡聚糖钠(DSS)溃疡性结肠炎模型第16页
            1.5.2.3 LPS急性肠炎模型第16页
    1.6 本试验的目的、意义和研究内容第16-18页
        1.6.1 试验目的及意义第16页
        1.6.2 研究内容第16-18页
            1.6.2.1 技术路线图第17-18页
第二章 乳酸杆菌对LPS诱导仔猪肠道炎症的免疫调节及机制第18-45页
    2.1 材料与方法第18-29页
        2.1.1 试剂与仪器第18-19页
        2.1.2 菌株及培养基第19页
        2.1.3 乳酸杆菌的抗性筛选第19页
        2.1.4 鼠李糖乳酸杆菌冻干粉的制备第19-20页
        2.1.5 乳酸杆菌冻干粉存活率的检测第20页
        2.1.6 实验动物第20页
            2.1.6.1 仔猪的饲养与管理第20页
        2.1.7 动物分组及饲养实验第20页
        2.1.8 样品采集第20-21页
            2.1.8.1 粪便第20页
            2.1.8.2 血清第20-21页
            2.1.8.3 肠道组织、肠道微生物、肝脏及肾脏的采集第21页
        2.1.9 粪便中鼠李糖乳酸杆菌的数量检测第21页
        2.1.10 仔猪肠道消化吸收的检测第21-22页
        2.1.11 猪血清炎症因子的ELISA检测第22-23页
        2.1.12 免疫印迹Western blot第23-26页
            2.1.12.1 组织全蛋白的提取第23页
            2.1.12.2 蛋白含量的测定(Bradford法)第23页
            2.1.12.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-PAGE第23-25页
            2.1.12.4 湿转Western blot第25-26页
        2.1.13 免疫组化第26-27页
        2.1.14 16s rRNA基因序列高通量测序第27-28页
        2.1.15 GC-MS代谢组学第28-29页
        2.1.16 数据与分析第29页
    2.2 结果和分析第29-43页
        2.2.1 仔猪粪便中乳酸杆菌的排出情况第29-30页
        2.2.2 仔猪肠道的绒毛结构第30-32页
        2.2.3 仔猪的血清免疫指标第32-33页
        2.2.4 乳酸杆菌对仔猪肠道组织免疫信号通路表达水平的影响第33页
        2.2.5 免疫组化验证鼠李糖乳酸杆菌介导仔猪肠道免疫信号通路的影响第33-35页
        2.2.6 仔猪回肠内容物 16sRNA高通量测序结果第35-37页
        2.2.7 仔猪回肠内容物GC-MS代谢组学的结第37-43页
    2.3 讨论第43-44页
    2.4 小结第44-45页
第三章 乳酸杆菌对LPS诱导基因敲除小鼠肠道炎症的免疫调节及机制第45-58页
    3.1 材料与方法第45-49页
        3.1.1 试剂与仪器第45页
        3.1.2 菌株与培养基第45页
        3.1.3 鼠李糖乳酸杆菌的抗性筛选第45页
        3.1.4 实验动物第45-46页
            3.1.4.1 小鼠的饲养与管理第46页
            3.1.4.2 试验动物分组和饲养实验第46页
        3.1.5 样品采集第46-47页
            3.1.5.1 粪便的收集第46-47页
            3.1.5.2 采集血清第47页
            3.1.5.3 肠道组织及肠道微生物第47页
        3.1.6 肠道内乳酸杆菌的数量检测第47页
        3.1.7 肠道消化吸收的检测第47页
        3.1.8 小鼠血清因子的ELISA检测第47-48页
            3.1.8.1 SOD测定第47-48页
            3.1.8.2 MDA测定第48页
            3.1.8.3 D-xylose测定第48页
        3.1.9 小鼠肠道组织的信号通路表达水平的检测第48页
        3.1.10 免疫组化试验第48页
        3.1.11 数据分析第48-49页
    3.2 结果与分析第49-56页
        3.2.1 乳酸杆菌的排除情况及在肠道的定植情况第49-50页
            3.2.1.1 小鼠粪便乳酸杆菌的排出情况第49-50页
            3.2.1.2 小鼠肠道乳酸杆菌的定植情况第50页
        3.2.2 小鼠肠道的绒毛结构第50-51页
        3.2.3 小鼠血清中的免疫指标第51-53页
        3.2.4 免疫组化验证鼠李糖乳酸杆菌介导小鼠肠道免疫信号通路的影响第53-55页
        3.2.5 仔猪空肠内容物 16sRNA高通量测序结果第55-56页
    3.3 讨论第56-57页
    3.4 小结第57-58页
第四章 总结、创新点和后续研究进展第58-59页
    4.1 总结第58页
    4.2 创新点第58页
    4.3 研究与展望第58-59页
参考文献第59-64页
缩略词表第64-65页
作者简介第65-67页
致谢第67页

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