| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1 四个基因的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.1 ZP2基因研究进展 | 第11页 |
| 1.2 Stat5b基因研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3 AMH基因研究进展 | 第12-13页 |
| 1.4 MDH1基因研究进展 | 第13-14页 |
| 2 DNA甲基化 | 第14-15页 |
| 2.1 DNA甲基化与CpG岛 | 第14-15页 |
| 2.2 DNA甲基化的研究方法 | 第15页 |
| 3 真核生物启动子研究简介 | 第15-16页 |
| 3.1 真核启动子的结构 | 第15-16页 |
| 3.2 启动子的研究热点 | 第16页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第16-18页 |
| 第二章 四个基因在300日龄京海黄鸡个体中的表达谱及高低产中的差异表达分析 | 第18-26页 |
| 1 材料与方法 | 第18-21页 |
| 1.1 试验材料 | 第18-19页 |
| 1.1.1 试验动物 | 第18页 |
| 1.1.2 主要试验仪器 | 第18-19页 |
| 1.1.3 主要试验试剂 | 第19页 |
| 1.2 试验方法 | 第19-21页 |
| 1.2.1 组织RNA的提取 | 第19-20页 |
| 1.2.2 RNA检测 | 第20页 |
| 1.2.3 qRT-PCR引物设计 | 第20页 |
| 1.2.4 mRNA反转录 | 第20页 |
| 1.2.5 目的基因和内参基因引物的PCR扩增检测 | 第20-21页 |
| 1.2.6 实时荧光定量PCR | 第21页 |
| 1.3 统计软件和方法 | 第21页 |
| 2 结果与分析 | 第21-23页 |
| 2.1 RNA质量检测 | 第21-22页 |
| 2.2 四个基因的组织表达谱分析 | 第22-23页 |
| 2.3 四个基因在300日龄高、低产组京海黄鸡卵巢组织中的差异表达分析 | 第23页 |
| 3 讨论 | 第23-25页 |
| 4 结论 | 第25-26页 |
| 第三章 ZP2基因启动子区缺失载体的构建及核心启动子分析 | 第26-33页 |
| 1 材料与方法 | 第26-31页 |
| 1.1 试验材料 | 第26-28页 |
| 1.1.1 试验动物 | 第26页 |
| 1.1.2 主要试验仪器 | 第26-27页 |
| 1.1.3 主要试验试剂及配制 | 第27-28页 |
| 1.2 试验方法 | 第28-31页 |
| 1.2.1 鸡基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
| 1.2.2 ZP2基因核心启动子区预测 | 第29页 |
| 1.2.3 ZP2基因启动子区缺失载体构建 | 第29-30页 |
| 1.2.4 DF-1细胞培养和传代 | 第30页 |
| 1.2.5 细胞瞬时转染 | 第30页 |
| 1.2.6 荧光素酶活性测定 | 第30-31页 |
| 1.3 数据处理和分析 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-32页 |
| 2.1 ZP2基因核心启动子区预测 | 第31页 |
| 2.2 缺失载体转染DF-1细胞后的活性测定与分析 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32页 |
| 4 结论 | 第32-33页 |
| 第四章 ZP2基因启动子区甲基化对mRNA表达的影响分析 | 第33-46页 |
| 1 材料与方法 | 第33-39页 |
| 1.1 试验材料 | 第33-34页 |
| 1.1.1 试验动物 | 第33页 |
| 1.1.2 主要试验仪器 | 第33-34页 |
| 1.1.3 主要生物信息学分析软件 | 第34页 |
| 1.1.4 主要试剂 | 第34页 |
| 1.2 试验方法 | 第34-39页 |
| 1.2.1 卵巢组织DNA提取与质检 | 第34-35页 |
| 1.2.2 ZP2基因启动子区CpG岛分析及BSP引物设计 | 第35页 |
| 1.2.3 DNA亚硫酸盐处理及纯化 | 第35-36页 |
| 1.2.4 PCR扩增及检测 | 第36-37页 |
| 1.2.5 BSP测序 | 第37-39页 |
| 1.3 统计方法 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-44页 |
| 2.1 DNA的提取结果 | 第39页 |
| 2.2 ZP2基因CpG岛预测结果 | 第39-40页 |
| 2.3 目的基因的扩增片段 | 第40页 |
| 2.4 ZP2基因CpG岛甲基化BSP测序结果 | 第40-42页 |
| 2.5 甲基化与基因表达量的皮尔森相关性分析 | 第42页 |
| 2.6 ZP2基因潜在转录因子结合位点预测 | 第42-44页 |
| 3 讨论 | 第44-45页 |
| 4 结论 | 第45-46页 |
| 全文结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 攻读学位期间发表学术论文 | 第58-59页 |
