| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 1 前言 | 第15-28页 |
| 1.1 植物细胞周期蛋白与蛋白激酶研究 | 第15-20页 |
| 1.1.1 细胞周期蛋白 | 第16-18页 |
| 1.1.1.1 植物B型细胞周期蛋白的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.1.2 细胞周期蛋白依赖性激酶 | 第18-20页 |
| 1.2 植物表皮毛的研究进展 | 第20-26页 |
| 1.2.1 植物表皮毛的功能 | 第20-22页 |
| 1.2.2 单细胞表皮毛的形成的分子机制 | 第22-23页 |
| 1.2.3 多细胞表皮毛的调控机制的研究进展 | 第23-26页 |
| 1.2.3.1 番茄表皮毛的研究进展 | 第24-25页 |
| 1.2.3.2 烟草等其他多细胞表皮毛的研究进展 | 第25-26页 |
| 1.3 细胞周期蛋白与表皮毛发育的关系 | 第26页 |
| 1.4 植物花发育的研究进展 | 第26-28页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-38页 |
| 2.1 植物材料 | 第28页 |
| 2.2 试剂、菌株和载体 | 第28-29页 |
| 2.2.1 农杆菌和植物表达载体 | 第28-29页 |
| 2.2.2 大肠杆菌和克隆载体 | 第29页 |
| 2.2.3 主要的试剂 | 第29页 |
| 2.3 生物信息学分析 | 第29-31页 |
| 2.3.1 番茄、烟草及拟南芥SlCyc B2型周期蛋白的鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.2 番茄、烟草和拟南芥中已知功能B型周期蛋白的统计 | 第30页 |
| 2.3.3 系统进化树的构建 | 第30页 |
| 2.3.4 番茄SlCycB2型周期蛋白基因结构和motif预测 | 第30-31页 |
| 2.4 表达载体的构建和遗传转化 | 第31-34页 |
| 2.4.1 超量表达载体的构建 | 第31页 |
| 2.4.2 RNAi抑制表达载体的构建 | 第31-32页 |
| 2.4.3 PSlCycB2: GUS-YFP载体的构建 | 第32-33页 |
| 2.4.4 EGFP融合表达载体的构建 | 第33页 |
| 2.4.5 农杆菌转化 | 第33-34页 |
| 2.4.5.1 农杆菌感受态的制备 | 第33页 |
| 2.4.5.2 电激转化法 | 第33-34页 |
| 2.4.6 番茄遗传转化 | 第34页 |
| 2.4.7 烟草遗传转化 | 第34页 |
| 2.4.8 转基因植株的阳性检测 | 第34页 |
| 2.5 基因定量分析 | 第34-35页 |
| 2.5.1 半定量RT-PCR | 第34-35页 |
| 2.5.2 实时定量RT-PCR | 第35页 |
| 2.6 目标蛋白的亚细胞定位分析 | 第35页 |
| 2.6.1 质粒提取 | 第35页 |
| 2.6.2 洋葱表皮细胞的准备及转化 | 第35页 |
| 2.7 GUS组织化学分析 | 第35-36页 |
| 2.8 扫描电镜观察 | 第36页 |
| 2.9 抗虫实验 | 第36-37页 |
| 2.10 RNA-Seq分析 | 第37-38页 |
| 2.10.1 样品的准备及文库构建 | 第37页 |
| 2.10.2 差异表达基因的分析 | 第37-38页 |
| 2.11 萜类含量的分析 | 第38页 |
| 3 实验结果与分析 | 第38-68页 |
| 3.1 番茄、烟草和拟南芥中的SlCyc B2型细胞周期蛋白 | 第38-39页 |
| 3.2 番茄、烟草和拟南芥SlCycB2型周期蛋白基因结构分析 | 第39-40页 |
| 3.3 不同物种SlCycB2型细胞周期蛋白系统进化树分析 | 第40-42页 |
| 3.4 SlCycB2和SlCycB3在番茄不同组织的表达模式 | 第42-43页 |
| 3.5 番茄、烟草和拟南芥中SlCyc B2型基因表达载体构建 | 第43-44页 |
| 3.5.1 超量表达载体构建 | 第43-44页 |
| 3.5.2 RNAi抑制表达载体构建 | 第44页 |
| 3.6 转基因植株的阳性检测 | 第44-45页 |
| 3.7 SlCycB2转基因植株的表型观察和表达量分析 | 第45-51页 |
| 3.7.1 表型观察 | 第45-51页 |
| 3.7.2 表达量的分析 | 第51页 |
| 3.8 SlCycB2启动子驱动GUS-YFP表达分析 | 第51-54页 |
| 3.8.1 SlCycB2启动子分析 | 第51-53页 |
| 3.8.2 GUS组织化学分析 | 第53-54页 |
| 3.9 SlCycB2周期蛋白亚细胞定位分析 | 第54-55页 |
| 3.10 SlCycB2转基因番茄植株的抗虫性分析 | 第55-57页 |
| 3.10.1 SlCycB2超量表达转基因番茄叶片中的萜烯类物质含量测定 | 第56页 |
| 3.10.2 双向选择抗虫性分析 | 第56-57页 |
| 3.10.3 非双向选择抗虫性分析 | 第57页 |
| 3.11 SlCycB2转基因番茄植株转录组数据分析 | 第57-62页 |
| 3.11.1 差异表达基因的分析及鉴定 | 第58-61页 |
| 3.11.2 候选DEGs表达量分析 | 第61-62页 |
| 3.12 番茄、烟草和拟南芥等其他SlCycB2型基因在番茄中的功能分析 | 第62-64页 |
| 3.13 番茄、烟草和拟南芥SlCycB2型基因在烟草中的功能分析 | 第64-66页 |
| 3.14 SlCycB2型细胞周期蛋白之间表达关系 | 第66-68页 |
| 4 讨论 | 第68-73页 |
| 4.1 不同物种中SlCycB2型细胞周期蛋白的功能分析 | 第68页 |
| 4.2 茄科物种的多细胞表皮毛可能有着相同的调控网络 | 第68-69页 |
| 4.3 SlCycB2调控表皮毛形成的机制分析 | 第69-70页 |
| 4.4 SlCycB2参与的调控途径分析 | 第70-71页 |
| 4.5 SlCycB2在番茄抗性育种中的应用前景分析 | 第71-72页 |
| 4.6 未来展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-87页 |
| 附录 | 第87-114页 |
| 作者简介 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
