| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 目录 | 第10-14页 |
| TABLE OF CONTENTS | 第14-17页 |
| 图目录 | 第17-19页 |
| 表目录 | 第19-20页 |
| 主要符号表 | 第20-21页 |
| 主要縮写表 | 第21-23页 |
| 细胞株名称 | 第23-24页 |
| 1 绪论 | 第24-50页 |
| 1.1 组蛋白去乙酰化酶 | 第24-28页 |
| 1.1.1 HDACs的分类 | 第24-26页 |
| 1.1.2 HDACs的功能 | 第26-27页 |
| 1.1.3 HDACs在肿瘤细胞中的异常变化 | 第27-28页 |
| 1.2 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 | 第28-40页 |
| 1.2.1 HDACIs的结构特征与分类 | 第30-35页 |
| 1.2.2 HDACIs的应用与临床试验 | 第35-37页 |
| 1.2.3 分子动力学模拟与药物潜在靶标开发 | 第37-40页 |
| 1.3 HDACIs的细胞毒性作用 | 第40-49页 |
| 1.3.1 诱导细胞周期阻滞 | 第40-41页 |
| 1.3.2 诱导细胞凋亡 | 第41-43页 |
| 1.3.3 诱导细胞分化 | 第43-44页 |
| 1.3.4 抗血管生成 | 第44-45页 |
| 1.3.5 抑制肿瘤转移 | 第45-47页 |
| 1.3.6 诱导细胞自噬 | 第47-49页 |
| 1.3.7 通过非组蛋白靶标发挥抑癌作用 | 第49页 |
| 1.4 主要研究思路 | 第49-50页 |
| 2 环肽类HDACIs的筛选与抗癌潜力 | 第50-72页 |
| 2.1 引言 | 第50-51页 |
| 2.2 实验材料与设备 | 第51-52页 |
| 2.2.1 实验材料与试剂 | 第51页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第51-52页 |
| 2.3 实验方法 | 第52-58页 |
| 2.3.1 环肽化合物的准备 | 第52-53页 |
| 2.3.2 溶液配制 | 第53-54页 |
| 2.3.3 细胞培养 | 第54页 |
| 2.3.4 原代细胞的分离与培养 | 第54-55页 |
| 2.3.5 增殖抑制实验 | 第55-56页 |
| 2.3.6 结晶紫染色 | 第56页 |
| 2.3.7 细胞周期检测 | 第56-57页 |
| 2.3.8 蛋白免疫印迹实验 | 第57页 |
| 2.3.9 蛋白浓度与caspase-3活性的测定 | 第57-58页 |
| 2.3.10 细胞骨架染色 | 第58页 |
| 2.3.11 统计分析 | 第58页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第58-71页 |
| 2.4.1 环肽类HDACIs的抗肿瘤细胞增殖活性 | 第58-62页 |
| 2.4.2 环肽类HDACIs对肿瘤细胞形态的影响 | 第62页 |
| 2.4.3 CTS203对肿瘤细胞的选择性 | 第62-65页 |
| 2.4.4 CTS203对胞内H3K14位点乙酰化水平的影响 | 第65-66页 |
| 2.4.5 CTS203对细胞周期分布的影响 | 第66-68页 |
| 2.4.6 CTS203对细胞凋亡的诱导 | 第68-70页 |
| 2.4.7 CTS203对细胞骨架的影响 | 第70-71页 |
| 2.5 本章小结 | 第71-72页 |
| 3 CTS203对MCF-7细胞的增殖抑制机制 | 第72-96页 |
| 3.1 引言 | 第72页 |
| 3.2 实验材料与设备 | 第72-73页 |
| 3.2.1 实验材料与试剂 | 第72-73页 |
| 3.2.2 实验设备 | 第73页 |
| 3.3 实验方法 | 第73-76页 |
| 3.3.1 溶液配制 | 第73页 |
| 3.3.2 AV/PI双染检测凋亡 | 第73-74页 |
| 3.3.3 免疫共沉淀 | 第74页 |
| 3.3.4 免疫荧光染色 | 第74-75页 |
| 3.3.5 等效线图解 | 第75页 |
| 3.3.6 耐受细胞株的诱导与分离 | 第75页 |
| 3.3.7 统计分析 | 第75-76页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第76-95页 |
| 3.4.1 CTS203对凋亡通路蛋白表达的影响 | 第76-77页 |
| 3.4.2 CTS203对不可逆细胞毒性的诱导 | 第77-78页 |
| 3.4.3 CTS203对自噬的诱导 | 第78-81页 |
| 3.4.4 自噬对肿瘤细胞增殖的影响 | 第81-84页 |
| 3.4.5 自噬在CTS203诱导细胞毒性中的作用 | 第84-87页 |
| 3.4.6 自噬与获得耐受性的关系 | 第87-88页 |
| 3.4.7 自噬抑制剂对CTS203凋亡诱导能力的影响 | 第88-92页 |
| 3.4.8 Beclin-1的剪切对凋亡进程的影响 | 第92-95页 |
| 3.5 本章小结 | 第95-96页 |
| 4 CTS203对肿瘤细胞迁移能力的影响 | 第96-114页 |
| 4.1 引言 | 第96页 |
| 4.2 实验材料与设备 | 第96-97页 |
| 4.2.1 实验材料与试剂 | 第96-97页 |
| 4.2.2 实验设备 | 第97页 |
| 4.3 实验方法 | 第97-100页 |
| 4.3.1 溶液配制 | 第97页 |
| 4.3.2 划痕实验 | 第97页 |
| 4.3.3 明胶酶谱实验 | 第97-98页 |
| 4.3.4 集落形成实验 | 第98-99页 |
| 4.3.5 分子对接 | 第99页 |
| 4.3.5.1 抑制剂配体的准备 | 第99页 |
| 4.3.5.2 酶受体的准备 | 第99页 |
| 4.3.5.3 对接参数的设定 | 第99页 |
| 4.3.6 统计分析 | 第99-100页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第100-113页 |
| 4.4.1 CTS203对MCF-7细胞侵袭能力的抑制作用 | 第100-101页 |
| 4.4.2 CTS203与MMP-2结合方式的分子动力学分析 | 第101-106页 |
| 4.4.3 CTS203对MMP-2胞外活性的抑制 | 第106-108页 |
| 4.4.4 CTS203对MMP-2活性的调控 | 第108-110页 |
| 4.4.5 CTS203对肿瘤细胞集落形成的抑制 | 第110-113页 |
| 4.5 本章小结 | 第113-114页 |
| 5 结论与展望 | 第114-116页 |
| 5.1 结论与创新点 | 第114页 |
| 5.2 创新点摘要 | 第114-115页 |
| 5.3 展望 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-129页 |
| 附录A 环肽化合物的HDACs抑制活性 | 第129-130页 |
| 附录B 部分分子模拟所用的参数文件 | 第130-138页 |
| 攻读博士学位期间科研项目及科研成果 | 第138-139页 |
| 致谢 | 第139-140页 |
| 作者简介 | 第140-141页 |
