縮略词表 | 第7-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9页 |
1 前言 | 第10-29页 |
1.1 WRKY家族结构特征和分类 | 第10-11页 |
1.2 WRKY家族起源于真核生物并在植物中扩张 | 第11-12页 |
1.3 功能 | 第12-18页 |
1.3.1 非生物胁迫下的功能 | 第12-13页 |
1.3.2 生物胁迫下的功能 | 第13-16页 |
1.3.3 WRKY在生长、发育和衰亡中的功能 | 第16-18页 |
1.3.4 WRKY同时在非生物和生物胁迫下发挥功能 | 第18页 |
1.4 WRKY转录因子与DNA选择性结合 | 第18-19页 |
1.5 植物抗病信号途径及WRKY转录因子的研究手段 | 第19-27页 |
1.5.1 功能获得与缺失 | 第20-21页 |
1.5.2 突变体技术 | 第21-22页 |
1.5.3 蛋白质/蛋白质及蛋白质/DNA互作研究技术 | 第22-23页 |
1.5.4 串联亲和纯化标签技术 | 第23页 |
1.5.5 染色质免疫共沉淀 | 第23-24页 |
1.5.6 芯片技术与生物信息学 | 第24-26页 |
1.5.7 定点突变 | 第26-27页 |
1.6 研究目的和意义 | 第27-29页 |
2 材料与方法 | 第29-48页 |
2.1 水稻材料与基因来源 | 第29-30页 |
2.1.1 水稻材料与来源 | 第29页 |
2.1.2 用于遗传转化的水稻基因片断 | 第29页 |
2.1.3 实验所用到的菌株、质粒、载体和感受态细胞 | 第29-30页 |
2.2 遗传转化载体的构建和转化 | 第30-38页 |
2.2.1 WRKY13反义抑制表达遗传转化载体构建 | 第30-31页 |
2.2.2 GUS和GFP融合表达载体的构建 | 第31-37页 |
2.2.3 定点突变及载体构建 | 第37-38页 |
2.3 遗传转化 | 第38-39页 |
2.3.1 农杆菌介导的稳定遗传转化 | 第38-39页 |
2.3.2 农杆菌介导的瞬时表达系统 | 第39页 |
2.4 核酸操作及分子杂交分析 | 第39-40页 |
2.4.1 DNA和RNA的抽提 | 第39页 |
2.4.2 RT-PCR和定量RT-PCR分析 | 第39-40页 |
2.5 GUS和GFP的定性及定量分析 | 第40-41页 |
2.5.1 GUS的定量及定性分析 | 第40-41页 |
2.5.2 GFP的定性及定量分析 | 第41页 |
2.6 核蛋白抽提及凝胶阻滞实验 | 第41-43页 |
2.6.1 核蛋白抽提 | 第41-42页 |
2.6.2 凝胶阻滞实验 | 第42-43页 |
2.7 ChIP实验 | 第43-45页 |
2.8 病原物接种及病情调查 | 第45页 |
2.9 非生物胁迫处理 | 第45-46页 |
2.9.1 WRKY13超量表达转基因植株失水速率的测量 | 第45页 |
2.9.2 温室WRKY13超量表达转基因水稻抗旱性筛选 | 第45-46页 |
2.10 DNA序列测定和启动子顺式作用元件分析和预测 | 第46-47页 |
2.11 数据分析 | 第47-48页 |
3 结果与分析 | 第48-70页 |
3.1 WRKY13抑制表达植株的创造及共分离检测 | 第48-50页 |
3.2 WRKY13抑制表达植株中WRKY家族基因的表达 | 第50-52页 |
3.3 WRKY13超量表达植株抗逆性分析 | 第52-56页 |
3.3.1 非生物胁迫影响WRKY13的表达 | 第52-53页 |
3.3.2 WRKY13超量表达植株对干旱胁迫的敏感性增强 | 第53-54页 |
3.3.3 WRKY13超量表达植株对盐胁迫的敏感性增强 | 第54-55页 |
3.3.4 WRKY13超量表达植株对冷胁迫的敏感性增强 | 第55-56页 |
3.4 WRKY13是转录抑制因子 | 第56-58页 |
3.5 在生物和非生物胁迫过程中,WRKY13与SNAC1,WRKY13和WRKY45-1启动子区已知的顺式作用元件选择性地结合 | 第58-61页 |
3.6 在非生物和生物胁迫下WRKY13偏爱于结合到类W盒和PRE4元件来调节基因的表达 | 第61-68页 |
3.7 白叶枯病菌感染和干旱胁迫时WRKY13在微管组织和保卫细胞中受诱导 | 第68-70页 |
4 讨论 | 第70-76页 |
4.1 WRKY13特异性结合水稻多种类型的顺式作用元件 | 第70-71页 |
4.2 WRKY13与顺式调控元件的关系 | 第71-72页 |
4.3 WRKY13选择性地结合到不同靶基因顺式作用元件来差异性调节生物和非生物应激反应 | 第72-73页 |
4.4 WRKY13自调节其自身基因表达 | 第73-74页 |
4.5 WRKY13是转录抑制子 | 第74页 |
4.6 关于WRKY13基因功能深入研究的设想 | 第74-76页 |
5 结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
附录 | 第92-96页 |