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水稻WRKY13通过选择性结合不同顺式作用元件调控非生物和生物胁迫信号路径间的互作

縮略词表第7-8页
中文摘要第8-9页
Abstract第9页
1 前言第10-29页
    1.1 WRKY家族结构特征和分类第10-11页
    1.2 WRKY家族起源于真核生物并在植物中扩张第11-12页
    1.3 功能第12-18页
        1.3.1 非生物胁迫下的功能第12-13页
        1.3.2 生物胁迫下的功能第13-16页
        1.3.3 WRKY在生长、发育和衰亡中的功能第16-18页
        1.3.4 WRKY同时在非生物和生物胁迫下发挥功能第18页
    1.4 WRKY转录因子与DNA选择性结合第18-19页
    1.5 植物抗病信号途径及WRKY转录因子的研究手段第19-27页
        1.5.1 功能获得与缺失第20-21页
        1.5.2 突变体技术第21-22页
        1.5.3 蛋白质/蛋白质及蛋白质/DNA互作研究技术第22-23页
        1.5.4 串联亲和纯化标签技术第23页
        1.5.5 染色质免疫共沉淀第23-24页
        1.5.6 芯片技术与生物信息学第24-26页
        1.5.7 定点突变第26-27页
    1.6 研究目的和意义第27-29页
2 材料与方法第29-48页
    2.1 水稻材料与基因来源第29-30页
        2.1.1 水稻材料与来源第29页
        2.1.2 用于遗传转化的水稻基因片断第29页
        2.1.3 实验所用到的菌株、质粒、载体和感受态细胞第29-30页
    2.2 遗传转化载体的构建和转化第30-38页
        2.2.1 WRKY13反义抑制表达遗传转化载体构建第30-31页
        2.2.2 GUS和GFP融合表达载体的构建第31-37页
        2.2.3 定点突变及载体构建第37-38页
    2.3 遗传转化第38-39页
        2.3.1 农杆菌介导的稳定遗传转化第38-39页
        2.3.2 农杆菌介导的瞬时表达系统第39页
    2.4 核酸操作及分子杂交分析第39-40页
        2.4.1 DNA和RNA的抽提第39页
        2.4.2 RT-PCR和定量RT-PCR分析第39-40页
    2.5 GUS和GFP的定性及定量分析第40-41页
        2.5.1 GUS的定量及定性分析第40-41页
        2.5.2 GFP的定性及定量分析第41页
    2.6 核蛋白抽提及凝胶阻滞实验第41-43页
        2.6.1 核蛋白抽提第41-42页
        2.6.2 凝胶阻滞实验第42-43页
    2.7 ChIP实验第43-45页
    2.8 病原物接种及病情调查第45页
    2.9 非生物胁迫处理第45-46页
        2.9.1 WRKY13超量表达转基因植株失水速率的测量第45页
        2.9.2 温室WRKY13超量表达转基因水稻抗旱性筛选第45-46页
    2.10 DNA序列测定和启动子顺式作用元件分析和预测第46-47页
    2.11 数据分析第47-48页
3 结果与分析第48-70页
    3.1 WRKY13抑制表达植株的创造及共分离检测第48-50页
    3.2 WRKY13抑制表达植株中WRKY家族基因的表达第50-52页
    3.3 WRKY13超量表达植株抗逆性分析第52-56页
        3.3.1 非生物胁迫影响WRKY13的表达第52-53页
        3.3.2 WRKY13超量表达植株对干旱胁迫的敏感性增强第53-54页
        3.3.3 WRKY13超量表达植株对盐胁迫的敏感性增强第54-55页
        3.3.4 WRKY13超量表达植株对冷胁迫的敏感性增强第55-56页
    3.4 WRKY13是转录抑制因子第56-58页
    3.5 在生物和非生物胁迫过程中,WRKY13与SNAC1,WRKY13和WRKY45-1启动子区已知的顺式作用元件选择性地结合第58-61页
    3.6 在非生物和生物胁迫下WRKY13偏爱于结合到类W盒和PRE4元件来调节基因的表达第61-68页
    3.7 白叶枯病菌感染和干旱胁迫时WRKY13在微管组织和保卫细胞中受诱导第68-70页
4 讨论第70-76页
    4.1 WRKY13特异性结合水稻多种类型的顺式作用元件第70-71页
    4.2 WRKY13与顺式调控元件的关系第71-72页
    4.3 WRKY13选择性地结合到不同靶基因顺式作用元件来差异性调节生物和非生物应激反应第72-73页
    4.4 WRKY13自调节其自身基因表达第73-74页
    4.5 WRKY13是转录抑制子第74页
    4.6 关于WRKY13基因功能深入研究的设想第74-76页
5 结论第76-77页
参考文献第77-91页
致谢第91-92页
附录第92-96页

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