摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
目录 | 第7-9页 |
插图和附表清单 | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-13页 |
第一章 序言 | 第13-21页 |
1.1 哮喘是严重的人类疾病 | 第13页 |
1.2 IL-13在哮喘中的核心病理角色 | 第13-14页 |
1.3 IL-13作为哮喘治疗靶点的依据 | 第14-15页 |
1.4 IL-13与其它潜在哮喘治疗靶点的比较 | 第15页 |
1.5 抗IL-13单克隆抗体临床试验进展 | 第15-16页 |
1.6 主动免疫较之被动免疫的优点 | 第16-17页 |
1.7 IL-13疫苗研究进展 | 第17页 |
1.8 疫苗病毒样颗粒形式是实现主动免疫干预的重要基础 | 第17-19页 |
1.9 IL-13疫苗临床安全性分析 | 第19-20页 |
1.10 本论文研究目的与意义 | 第20-21页 |
第二章 人IL-13病毒样颗粒疫苗构建及免疫性质研究 | 第21-43页 |
2.1 主要材料 | 第21-22页 |
2.1.1 菌株 | 第21页 |
2.1.2 质粒 | 第21页 |
2.1.3 实验动物 | 第21-22页 |
2.2 主要试剂 | 第22页 |
2.3 主要仪器 | 第22页 |
2.4 主要溶液及培养基 | 第22页 |
2.5 实验方法 | 第22-43页 |
2.5.1 hIL-13抗原肽病毒样颗粒疫苗的构建 | 第22-29页 |
2.5.2 hIL-13抗原肽疫苗的诱导表达 | 第29-31页 |
2.5.3 基于hIL-13全分子的疫苗构建 | 第31-37页 |
2.5.4 重组hIL-13全分子蛋白的表达 | 第37-38页 |
2.5.5 IL-13抗原肽疫苗的小鼠免疫及免疫性质检测 | 第38-43页 |
第三章 :结果与讨论 | 第43-67页 |
3.1 基于hIL-13抗原表位的病毒样颗粒疫苗构建 | 第43-50页 |
3.1.1 人IL-13抗原表位预测结果 | 第43-44页 |
3.1.2 成功构建hIL-13抗原肽疫苗重组质粒 | 第44-45页 |
3.1.3 HBcAg-hIL-13抗原肽嵌合蛋白的表达 | 第45-46页 |
3.1.4 HBcAg-hIL-13抗原肽嵌合蛋白的纯化与病毒样颗粒分析 | 第46-49页 |
3.1.5 讨论 | 第49-50页 |
3.2 基于hIL-13全分子蛋白的疫苗构建 | 第50-57页 |
3.2.1 重组基因片段及载体的制备 | 第50-51页 |
3.2.2 重组菌落的PCR鉴定 | 第51页 |
3.2.3 重组质粒酶切鉴定 | 第51-52页 |
3.2.4 重组hIL-13全分子蛋白的表达 | 第52-53页 |
3.2.5 重组hIL-13全分子蛋白的纯化 | 第53-56页 |
3.2.6 讨论 | 第56-57页 |
3.3 病毒样颗粒疫苗在小鼠中的免疫学特性研究 | 第57-67页 |
3.3.1 病毒样颗粒经皮下注射免疫的特点 | 第57-60页 |
3.3.2 病毒样颗粒经鼻腔粘膜免疫的特点 | 第60-64页 |
3.3.3 免疫获得的抗血清对IL-13活性的体外中和能力 | 第64-65页 |
3.3.4 讨论 | 第65-67页 |
第四章 总结与展望 | 第67-73页 |
成功获得了具有体内干预潜能的、基于IL-13抗原表位的病毒样颗粒疫苗 | 第67页 |
系统地了解了 IL-13抗原肽-病毒样颗粒疫苗的免疫学特性 | 第67-68页 |
获得了基因重组的人IL-13成熟蛋白 | 第68页 |
工作中的不足 | 第68-69页 |
工作展望 | 第69-73页 |
致谢 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-81页 |
附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第81-82页 |
附录B 主要试剂及其设备 | 第82-90页 |
附录C 测序结果 | 第90-95页 |