| 1． 文献综述与前言 | 第14-36页 |
| 1．1 稻瘟病菌与稻瘟病 | 第14-15页 |
| 1．2 稻瘟病菌的生活史、病害循环与防治 | 第15-16页 |
| 1．3 稻瘟病菌的侵入过程 | 第16-24页 |
| 1．3．1 稻瘟病菌的侵染前期 | 第16-19页 |
| 1．3．1．1 稻瘟病菌分生孢子的吸附、萌发和附着胞形成 | 第16-18页 |
| 1．3．1．2 稻瘟病菌附着胞形成的诱导因子和表面识别 | 第18-19页 |
| 1．3．2 稻瘟病菌的侵入 | 第19-23页 |
| 1．3．3 稻瘟病菌在寄主中的定殖 | 第23-24页 |
| 1．4 稻瘟病菌附着胞形成过程的信号传导与调控 | 第24-29页 |
| 1．5 稻瘟病菌致病相关基因 | 第29-31页 |
| 1．6 附着胞内甘油合成的前体物质 | 第31-32页 |
| 1．7 附着胞形成过程的脂肪代谢 | 第32-34页 |
| 1．8 异柠檬酸裂解酶 | 第34-35页 |
| 1．9 本研究的目的与意义 | 第35-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-50页 |
| 2．1 实验菌株、保存与培养条件 | 第36页 |
| 2．2 ICL1基因片段的PCR扩增 | 第36-37页 |
| 2．3 GUY11的基因组文库和分生孢子的cDNA文库筛选 | 第37-40页 |
| 2．3．1 GUY11的λ基因组文库筛选 | 第37-38页 |
| 2．3．2 GUY11的cosmid基因组文库筛选 | 第38页 |
| 2．3．3 GUY11的分生孢子cDNA文库筛选 | 第38页 |
| 2．3．4 λ噬菌体DNA的提取 | 第38-39页 |
| 2．3．5 含ICL1 cDNA的Bluescript质粒拯救 | 第39-40页 |
| 2．4 DNA操作与分析 | 第40-45页 |
| 2．4．1 CTAB法大量提取基因组DNA | 第40-41页 |
| 2．4．2 DNA操作方法 | 第41页 |
| 2．4．3 基因组DNA的限制性酶切 | 第41页 |
| 2．4．4 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第41页 |
| 2．4．5 DNA片段的胶回收 | 第41-42页 |
| 2．4．6 Southern转移 | 第42页 |
| 2．4．7 DNA探针制备 | 第42页 |
| 2．4．8 Southern杂交 | 第42-43页 |
| 2．4．9 DNA克隆程序 | 第43-45页 |
| 2．4．9．1 质粒的少量快速提取 | 第43页 |
| 2．4．9．2 高纯度质粒DNA的少量或大量提取 | 第43页 |
| 2．4．9．3 DNA连接 | 第43-44页 |
| 2．4．9．4 感受态细胞的制备 | 第44-45页 |
| 2．4．9．5 细菌转化 | 第45页 |
| 2．5 ICL1 cDNA和基因组DNA序列分析 | 第45页 |
| 2．6 稻瘟病菌的转化与转化子DNA提取 | 第45-47页 |
| 2．6．1 稻瘟病菌原生质体制备 | 第45-46页 |
| 2．6．2 DNA转化 | 第46页 |
| 2．6．3 CTAB法提取转化子DNA | 第46-47页 |
| 2．7 突变体的表型分析 | 第47-49页 |
| 2．7．1 野生菌株、ectopic转化子及ICL1突变体生长速度比较 | 第47页 |
| 2．7．2 M．grisea分生孢子萌发及附着胞形成 | 第47-48页 |
| 2．7．3 附着胞膨压测定 | 第48页 |
| 2．7．4 脂肪微滴的移动 | 第48页 |
| 2．7．5 ICL1突变体在不同培养基上的生长表型 | 第48-49页 |
| 2．8 ICL1突变体的互补转化 | 第49页 |
| 2．9 致病性测定 | 第49页 |
| 2．10 GFP与ICL1启动子的融合表达 | 第49-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-90页 |
| 3．1 ICL1基因片段的PCR扩增 | 第50-51页 |
| 3．1．1 引物设计与PCR反应 | 第50页 |
| 3．1．2 PCR产物的克隆与序列分析 | 第50-51页 |
| 3．2 ICL1基因在GUY11基因组DNA中的拷贝数 | 第51页 |
| 3．3 GUY11的基因组文库和分生孢子的cDNA文库筛选 | 第51-53页 |
| 3．3．1 GUY11的λ基因组文库筛选 | 第51-52页 |
| 3．3．2 GUY11的cosmid基因组文库筛选 | 第52-53页 |
| 3．3．3 GUY11的分生孢子λcDNA文库筛选 | 第53页 |
| 3．4 ICL1基因位点片段的亚克隆和ICL1 cDNA的鉴定与序列分析 | 第53-63页 |
| 3．4．1 ICL1基因位点片段的亚克隆 | 第53-55页 |
| 3．4．2 含ICL1 cDNA的Bluescript质粒拯救与序列分析 | 第55-57页 |
| 3．4．3 ICL1基因位点的基因组DNA序列、cDNA序列和推测的蛋白序列 | 第57-63页 |
| 3．5 ICL1基因位点的限制性酶切图谱与ICL1基因置换载体的构建 | 第63-67页 |
| 3．5．1 ICL1基因位点的限制性酶切图谱 | 第63页 |
| 3．5．2 ICL1基因置换载体的构建 | 第63-67页 |
| 3．5．2．1 潮霉素抗性基因（HPH）的PCR扩增、克隆与鉴定 | 第63-64页 |
| 3．5．2．2 ICL1基因置换载体构建的策略 | 第64-66页 |
| 3．5．2．3 ICL1基因置换载体的鉴定 | 第66-67页 |
| 3．6 真菌转化与△ICL1突变体的获得 | 第67-70页 |
| 3．6．1 ICL1基因敲除（Knock out）转化 | 第67页 |
| 3．6．2 M．grisea ICL1基因的目标置换过程 | 第67-69页 |
| 3．6．3 ΔICL1突变体的PCR和Southern杂交鉴定 | 第69-70页 |
| 3．7 ΔICL1突变体的表型（Phenotypes）分析 | 第70-85页 |
| 3．7．1 ΔICL1突变体在CM培养基上的菌落形态、生长速度与产孢 | 第70-73页 |
| 3．7．2 ΔICL1突变体对不同碳源的利用 | 第73页 |
| 3．7．3 ΔICL1突变体的分生孢子萌发、附着胞形成 | 第73-77页 |
| 3．7．4 ΔICL1突变体的附着胞膨压 | 第77-79页 |
| 3．7．5 ΔICL1突变体萌发过程中的脂肪微滴移动 | 第79页 |
| 3．7．6 ΔICL1突变体对洋葱内表皮的穿透作用 | 第79-82页 |
| 3．7．7 ΔICL1突变体对水稻和大麦的致病性 | 第82-85页 |
| 3．8 ICL1基因的时空表达分析 | 第85-88页 |
| 3．8．1 ICL1基因启动子与绿色荧光蛋白基因（GFP）的融合 | 第85-87页 |
| 3．8．2 ICL1基因的时空表达 | 第87-88页 |
| 3．9 ΔICL1突变体的互补 | 第88-90页 |
| 4 讨论 | 第90-96页 |
| 5 参考文献 | 第96-106页 |
