| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第12-21页 |
| 1.1 绿藻生物制氢的研究背景 | 第12-15页 |
| 1.1.1 绿藻光合产氢的发现 | 第12页 |
| 1.1.2 莱茵衣藻产氢的机理 | 第12-13页 |
| 1.1.3 提高莱茵衣藻的光合产氢量 | 第13-15页 |
| 1.1.3.1 增强氢化酶对氧气的耐受性 | 第14页 |
| 1.1.3.2 抑制氧气的释放 | 第14-15页 |
| 1.2 绿藻非编码RNA的研究概况 | 第15-19页 |
| 1.2.1 莱茵衣藻microRNA（miRNA）的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2.1.1 miRNA的特点及作用机理 | 第15-16页 |
| 1.2.1.2 miRNA调控衣藻产氢的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.2 lncRNA的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.2.2.1 lncRNA的起源及种类 | 第17页 |
| 1.2.2.2 lncRNA的作用机理 | 第17-18页 |
| 1.2.2.3 lncRNA在植物中的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3 非编码RNA调控绿藻光合产氢的新策略探索 | 第19-21页 |
| 1.3.1 新策略探索的基本思路 | 第19-20页 |
| 1.3.2 实验创新点及先进性 | 第20-21页 |
| 第2章 过表达内源性miR1166.1 转化子的产氢机理探索 | 第21-39页 |
| 2.1 材料与方法 | 第21-23页 |
| 2.1.1 实验藻株 | 第21页 |
| 2.1.2 实验试剂及仪器 | 第21-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 莱茵衣藻的培养 | 第23页 |
| 2.2.2 转化子miRNA-1166.1 生长曲线绘制 | 第23页 |
| 2.2.3 转化子miRNA-1166.1 叶绿素荧光参数的检测 | 第23-24页 |
| 2.2.3.1 莱茵衣藻的定量培养 | 第23页 |
| 2.2.3.2 Fv/Fm的测量 | 第23-24页 |
| 2.2.3.3 Yield的测量 | 第24页 |
| 2.2.3.4 ETR与qP的测量 | 第24页 |
| 2.2.4 转化子miRNA-1166.1 体外氢酶活性的检测 | 第24-25页 |
| 2.2.5 转化子miRNA-1166.1 淀粉含量的检测 | 第25页 |
| 2.2.5.1 藻粉的收集 | 第25页 |
| 2.2.5.2 淀粉含量的检测 | 第25页 |
| 2.2.6 转化子miRNA-1166.1 总蛋白含量的检测 | 第25-26页 |
| 2.2.6.1 藻粉的收集 | 第25页 |
| 2.2.6.2 总蛋白含量的检测 | 第25-26页 |
| 2.2.7 转化子miRNA-1166.1 总脂肪酸的检测 | 第26页 |
| 2.2.7.1 藻粉的收集 | 第26页 |
| 2.2.7.2 脂肪酸的甲酯化 | 第26页 |
| 2.2.7.3 脂肪酸含量GC-MS检测 | 第26页 |
| 2.2.8 转化子miRNA-1166.1 光合产氢相关基因的表达 | 第26-29页 |
| 2.2.8.1 莱茵衣藻RNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.8.2 莱茵衣藻RNA的反转录 | 第27页 |
| 2.2.8.3 SYBR green实时荧光定量PCR检测 | 第27-29页 |
| 2.3 实验结果及分析 | 第29-37页 |
| 2.3.1 转化子miRNA-1166.1 生长曲线绘制 | 第29-30页 |
| 2.3.2 转化子miRNA-1166.1 叶绿素荧光参数的变化 | 第30-31页 |
| 2.3.3 转化子miRNA-1166.1 体外氢酶活性的检测 | 第31-32页 |
| 2.3.4 转化子miRNA-1166.1 淀粉含量的变化 | 第32-33页 |
| 2.3.5 转化子miRNA-1166.1 总蛋白含量的结果 | 第33页 |
| 2.3.6 转化子miRNA-1166.1 总脂肪酸含量的结果 | 第33-34页 |
| 2.3.7 转化子miRNA-1166.1 光合产氢相关基因的表达 | 第34-37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第3章 高产氢转化子人工miRNA-D1调控机理的探索 | 第39-46页 |
| 3.1 材料与方法 | 第39页 |
| 3.1.1 实验藻株 | 第39页 |
| 3.1.2 实验试剂及仪器 | 第39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39页 |
| 3.3 实验结果及分析 | 第39-44页 |
| 3.3.1 转化子amiRNA-D1生长曲线的绘制 | 第39-40页 |
| 3.3.2 转化子amiRNA-D1叶绿素荧光参数的变化 | 第40-41页 |
| 3.3.3 转化子amiRNA-D1体外氢酶活性的检测 | 第41页 |
| 3.3.4 转化子amiRNA-D1淀粉含量的结果 | 第41-42页 |
| 3.3.5 转化子amiRNA-D1总蛋白含量的结果 | 第42页 |
| 3.3.6 转化子amiRNA-D1总脂肪酸含量的结果 | 第42-43页 |
| 3.3.7 转化子amiRNA-D1光合产氢相关基因的表达 | 第43-44页 |
| 3.4 讨论 | 第44-46页 |
| 第4章 莱茵衣藻长链非编码RNA的全基因组筛选、验证与对比 | 第46-60页 |
| 4.1 材料与方法 | 第46-47页 |
| 4.1.1 实验藻株 | 第46页 |
| 4.1.2 实验试剂及仪器 | 第46-47页 |
| 4.2 实验方法 | 第47-51页 |
| 4.2.1 莱茵衣藻培养 | 第47页 |
| 4.2.2 RNA提取及检测 | 第47页 |
| 4.2.2.1 RNA的提取 | 第47页 |
| 4.2.2.2 RNA的检测 | 第47页 |
| 4.2.3 文库构建及库检 | 第47-48页 |
| 4.2.4 生物信息学分析 | 第48页 |
| 4.2.4.1 lncRNA分析 | 第48页 |
| 4.2.4.2 lncRNA与mRNA的比较 | 第48页 |
| 4.2.5 qRT-PCR验证 | 第48-51页 |
| 4.2.5.1 RNA的提取及检测 | 第48页 |
| 4.2.5.2 RNA的反转录 | 第48-49页 |
| 4.2.5.3 SYBR green实时荧光定量PCR检测 | 第49-51页 |
| 4.3 实验结果及分析 | 第51-59页 |
| 4.3.1 莱茵衣藻lncRNA筛选及特性分析 | 第51-53页 |
| 4.3.1.1 莱茵衣藻lncRNA筛选 | 第51-52页 |
| 4.3.1.2 莱茵衣藻lncRNA特性分析 | 第52-53页 |
| 4.3.2 莱茵衣藻光合作用相关的lncRNA的分析 | 第53-57页 |
| 4.3.3 莱茵衣藻lncRNA与mRNA比较 | 第57-58页 |
| 4.3.3.1 lncRNA与mRNA在表达水平上的比较 | 第57页 |
| 4.3.3.2 lncRNA与mRNA在结构上的比较 | 第57-58页 |
| 4.3.4 qRT-PCR验证结果 | 第58-59页 |
| 4.4 讨论 | 第59-60页 |
| 第5章 结论与展望 | 第60-62页 |
| 5.1 结论 | 第60-61页 |
| 5.2 展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
