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DMBA影响猪卵母细胞减数分裂成熟的效应和机制研究

摘要第8-10页
英文摘要第10-12页
1 前言第13-29页
    1.1 7,12-二甲基苯并蒽(DMBA)第13-20页
        1.1.1 DMBA的定义第13页
        1.1.2 DMBA的来源和分布第13-14页
        1.1.3 DMBA代谢第14-15页
        1.1.4 DMBA的致癌作用第15-16页
        1.1.5 DMBA的致凋亡作用第16-17页
        1.1.6 DMBA在哺乳动物生殖发育中的作用第17-20页
    1.2 卵母细胞减数分裂成熟第20-27页
        1.2.1 卵子发生第20-21页
        1.2.2 卵丘细胞在减数分裂成熟过程中的作用第21-23页
        1.2.3 卵母细胞核成熟第23-26页
        1.2.4 卵母细胞胞质成熟第26-27页
    1.3 本研究的目的与意义第27-29页
2 材料与方法第29-40页
    2.1 实验材料第29-34页
        2.1.1 实验动物第29页
        2.1.2 主要仪器设备第29页
        2.1.3 主要试剂及配置第29-34页
    2.2 实验方法第34-40页
        2.2.1 猪卵母细胞体外成熟培养第34-35页
        2.2.2 胚胎孤雌激活第35页
        2.2.3 细胞免疫荧光检测第35-36页
        2.2.4 RT-q PCR第36-37页
        2.2.5 蛋白印迹杂交(Western blot)第37-38页
        2.2.6 细胞内活性氧水平的检测第38页
        2.2.7 线粒体膜电位检测第38页
        2.2.8 凋亡Annexin V检测第38-39页
        2.2.9 凋亡Tunel检测第39页
        2.2.10 数据统计第39-40页
3 结果与分析第40-58页
    3.1 DMBA对卵母细胞核成熟的影响第40-47页
        3.1.1 DMBA影响COC来源的卵母细胞第一极体排出第40页
        3.1.2 DMBA改变COC来源的卵母细胞GVBD率第40-41页
        3.1.3 DMBA提高COC卵母细胞的p ERK1/2 水平第41-42页
        3.1.4 DMBA作用于卵丘细胞继而通过缝隙连接促进COC来源的卵母细胞第一极体排出第42-43页
        3.1.5 DMBA通过MAPK信号通路促进COC来源的卵母细胞第一极体排出第43-44页
        3.1.6 DMBA通过PLC信号通路促进COC来源的卵母细胞第一极体排出第44-45页
        3.1.7 抑制AHR信号通路不影响DMBA对COC来源的卵母细胞PB1率的效应第45-46页
        3.1.8 DMBA影响COC来源的MⅡ卵母细胞组蛋白甲基化水平第46-47页
        3.1.9 DMBA引起COC来源的MⅡ卵母细胞的DNA损伤第47页
    3.2 DMBA对卵母细胞胞质成熟的影响第47-49页
        3.2.1 DMBA提高MⅡ卵母细胞中活性氧水平,降低线粒体膜电位水平第47-48页
        3.2.2 DMBA诱导COC来源的MⅡ卵母细胞发生早期凋亡第48-49页
        3.2.3 DMBA诱导卵母细胞胞质内荧光物质产生第49页
    3.3 DMBA对卵母细胞周围卵丘细胞的影响第49-51页
        3.3.1 DMBA改变卵母细胞周围的卵丘细胞扩展程度第49页
        3.3.2 DMBA诱导卵母细胞周围的卵丘细胞产生DNA损伤第49-51页
        3.3.3 DMBA不影响卵母细胞周围的卵丘细胞凋亡第51页
    3.4 DMBA对成熟卵母细胞后续发育能力的影响第51-58页
        3.4.1 DMBA降低成熟卵母细胞后续发育能力第51-52页
        3.4.2 DMBA对孤雌胚胎原核形成的影响第52-58页
4 讨论第58-61页
    4.1 DMBA与卵母细胞核成熟第58-59页
    4.2 DMBA与卵母细胞胞质成熟第59-60页
    4.3 DMBA与卵丘细胞的变化第60页
    4.4 DMBA与卵母细胞发育潜能第60-61页
5 结论第61-62页
致谢第62-63页
参考文献第63-74页
附录第74-78页
攻读博士学位期间发表的学术论文第78页

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