| 中文摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 文献综述 | 第11-21页 |
| 1 核盘菌概述 | 第11-14页 |
| 1.1 核盘菌简介 | 第11-13页 |
| 1.2 核盘菌致病机制 | 第13-14页 |
| 1.3 核盘菌UF-70 | 第14页 |
| 2 酿酒酵母MCM1和Cdc28的功能 | 第14-17页 |
| 2.1 酿酒酵母MCM1的功能 | 第14-15页 |
| 2.2 酿酒酵母Cdc28的功能 | 第15-17页 |
| 3 酵母双杂交技术 | 第17-19页 |
| 3.1 酵母双杂交技术的起源 | 第17-18页 |
| 3.2 酵母双杂交研究的主要方法 | 第18页 |
| 3.3 酵母双杂交技术的优劣 | 第18-19页 |
| 4 双分子荧光互补技术 | 第19-20页 |
| 4.1 双分子荧光互补技术的起源 | 第19页 |
| 4.2 双分子荧光互补研究的主要方法 | 第19页 |
| 4.3 双分子荧光互补技术的优劣 | 第19-20页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第一章 pGBKT7-SsMCM1载体构建和互作蛋白初步筛选 | 第21-37页 |
| 1 材料 | 第21-22页 |
| 1.1 菌株及载体 | 第21页 |
| 1.2 主要试剂 | 第21页 |
| 1.3 主要仪器 | 第21页 |
| 1.4 主要培养基 | 第21-22页 |
| 2 方法 | 第22-31页 |
| 2.1 pGBKT7-SsMCM1载体的构建 | 第22-26页 |
| 2.2 pGBKT7-SsMCM1载体自激活和毒性检测 | 第26-28页 |
| 2.3 互作蛋白的筛选 | 第28-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-37页 |
| 3.1 获得酵母双杂交诱饵载体并转化酵母细胞 | 第31-33页 |
| 3.2 诱饵载体无自激活性无毒性 | 第33-34页 |
| 3.3 筛选出13个与SsMCM1互作的候选蛋白 | 第34-37页 |
| 第二章 13个候选互作蛋白酵母双杂交验证 | 第37-47页 |
| 1 材料 | 第37页 |
| 1.1 菌株及载体 | 第37页 |
| 1.2 主要试剂 | 第37页 |
| 1.3 主要仪器 | 第37页 |
| 1.4 主要培养基的配置 | 第37页 |
| 2 方法 | 第37-42页 |
| 2.1 pGADT7重组载体的构建 | 第37-41页 |
| 2.2 共转验证 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-47页 |
| 3.1 成功构建p GADT7重组质粒 | 第42-44页 |
| 3.2 获得12个与SsMCM1互作的候选蛋白 | 第44-47页 |
| 第三章 KEGG Pathway预测SsMCM1下游调控蛋白 | 第47-54页 |
| 1 材料 | 第47页 |
| 1.1 菌株及载体 | 第47页 |
| 1.2 主要试剂 | 第47页 |
| 1.3 主要仪器 | 第47页 |
| 1.4 主要培养基的配置 | 第47页 |
| 2 方法 | 第47-48页 |
| 2.1 KEGG Pathway预测SsMCM1下游调控蛋白 | 第47页 |
| 2.2 酵母双杂筛选与Ss Cdc28互作的蛋白 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-54页 |
| 3.1 预测SS1G_02296 位于SsMCM1下游 | 第48-51页 |
| 3.2 构建pGBKT7-Ss Cdc28诱饵载体 | 第51-52页 |
| 3.3 酵母双杂交筛选出与Ss Cdc28互作的蛋白Ss IP86 | 第52-54页 |
| 第四章 SsMCM1-Ss IP86蛋白互作的双分子荧光互补验证 | 第54-61页 |
| 1 材料 | 第54-55页 |
| 1.1 菌株及载体 | 第54页 |
| 1.2 主要试剂 | 第54页 |
| 1.3 主要仪器 | 第54-55页 |
| 1.4 主要培养基和材料 | 第55页 |
| 2 方法 | 第55-58页 |
| 2.1 双分子荧光互补重组载体的构建 | 第55-57页 |
| 2.2 拟南芥原生质体转化及荧光观察 | 第57-58页 |
| 3 结果与分析 | 第58-61页 |
| 3.1 构建了双分子荧光互补验证载体 | 第58-59页 |
| 3.2 SsMCM1与Ss IP86在细胞核内互作 | 第59-61页 |
| 讨论 | 第61-63页 |
| 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-73页 |
| 作者简介 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
