摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
前言 | 第13-21页 |
1 引言 | 第13-14页 |
2 阿霉素研究背景 | 第14页 |
3 基于DNA构建的纳米给药系统的研究现状 | 第14-19页 |
3.1 DNA生物材料 | 第15页 |
3.2 多聚酶链式反应(PolymeraseChainReaction,PCR)技术 | 第15-16页 |
3.3 DNA 折纸术及其在给药系统中的应用 | 第16-18页 |
3.4 核酸适配体在纳米给药系统中的应用 | 第18-19页 |
4 本课题的设计思路及研究目的 | 第19-21页 |
主要缩略用语 | 第21-22页 |
第一章 适配体修饰的DNA纳米载体的构建及表征 | 第22-46页 |
1 材料与仪器 | 第22-23页 |
1.1 材料 | 第22页 |
1.2 仪器 | 第22-23页 |
2 实验内容 | 第23-30页 |
2.1 实验所用各种溶液的配制 | 第23-24页 |
2.1.1 10×TAE溶液的配制 | 第23页 |
2.1.2 5× buffer溶液(折纸缓冲液)的配制 | 第23页 |
2.1.3 各小链DNA的溶解 | 第23-24页 |
2.2 载体的制备 | 第24-27页 |
2.2.1 空白载体的制备 | 第26页 |
2.2.2 缓冲盐浓度的优化 | 第26页 |
2.2.3 靶向载体的构建 | 第26-27页 |
2.3 载体的表征 | 第27-28页 |
2.3.1 琼脂糖凝胶电泳对矩形片折纸的表征 | 第27页 |
2.3.2 DNA矩形片折纸的AFM表征 | 第27-28页 |
2.4 DNA矩形片折纸载药量的测定及条件优化 | 第28-30页 |
2.4.1 阿霉素标准曲线的建立 | 第28-29页 |
2.4.2 DNA矩形片折纸装载阿霉素药物的条件优化及载药量的测定 | 第29-30页 |
3 实验结果与讨论 | 第30-45页 |
3.1 琼脂糖凝胶电泳 | 第30-34页 |
3.1.1 空白载体的电泳表征 | 第30-31页 |
3.1.2 缓冲盐浓度的优化 | 第31-32页 |
3.1.3 靶向载体的电泳表征 | 第32-33页 |
3.1.4 DNA折纸的纯化 | 第33-34页 |
3.2 原子力显微镜(AFM)对DNA折纸结构的表征 | 第34-38页 |
3.2.1 AFM简介 | 第34-35页 |
3.2.2 DNA矩形片折纸的AFM表征 | 第35-38页 |
3.2.3 靶向DNA折纸的AFM表征 | 第38页 |
3.3 载体载药量的测定及条件优化 | 第38-45页 |
3.3.1 阿霉素浓度标准曲线的建立 | 第38-39页 |
3.3.2 离心对阿霉素的影响 | 第39-40页 |
3.3.3 离心对DNA矩形片折纸结果的影响 | 第40-41页 |
3.3.4 阿霉素载药浓度的考察 | 第41-45页 |
4 本章小结 | 第45-46页 |
第二章 适配体修饰的DNA纳米载体的稳定性考察及体外释放研究 | 第46-54页 |
1 材料与仪器 | 第46-47页 |
1.1 实验材料 | 第46页 |
1.2 实验仪器 | 第46-47页 |
2 实验内容 | 第47-49页 |
2.1 DNA折纸载药系统的稳定性考察 | 第47-48页 |
2.1.1 培养基血清浓度的筛选 | 第47页 |
2.1.2 DNA折纸载药后的稳定性考察 | 第47页 |
2.1.3 嵌入到DNA折纸中的阿霉素稳定性考察 | 第47-48页 |
2.2 载药折纸的体外释放研究 | 第48-49页 |
3 实验结果与讨论 | 第49-53页 |
3.1 DNA折纸载药系统的稳定性考察 | 第49-51页 |
3.1.1 培养基血清浓度的筛选 | 第49页 |
3.1.2 DNA折纸载药后的稳定性考察 | 第49-50页 |
3.1.3 嵌入到DNA折纸中的盐酸阿霉素稳定性考察 | 第50-51页 |
3.2 载药折纸的体外释放研究 | 第51-53页 |
4 本章小结 | 第53-54页 |
第三章 适配体修饰的DNA纳米载体的细胞学研究 | 第54-71页 |
1 实验仪器与材料 | 第54-56页 |
1.1 实验材料 | 第54-55页 |
1.1.1 细胞 | 第54页 |
1.1.2 实验试剂 | 第54-55页 |
1.2 实验仪器 | 第55-56页 |
2 实验内容 | 第56-61页 |
2.1 细胞学研究基础 | 第56-58页 |
2.1.1 实验所用各种溶液的配制 | 第56页 |
2.1.2 细胞实验基本操作 | 第56-58页 |
2.2 体外肿瘤细胞抑制率考察 | 第58-60页 |
2.2.1 实验所用缓冲液对淋巴瘤细胞的毒性考察 | 第58页 |
2.2.2 DNA材料对淋巴瘤细胞的毒性考察 | 第58-59页 |
2.2.3 DNA矩形片折纸载药后对淋巴瘤细胞的增殖抑制作用 | 第59页 |
2.2.4 C2NP(Apt)修饰的DNA矩形片折纸载体对淋巴瘤细胞的生物活性研究 | 第59-60页 |
2.2.5 C2NP修饰的靶向DNA折纸载体载药后对淋巴瘤细胞的生物作用联合化学作用的研究 | 第60页 |
2.3 K299细胞对DNA折纸载药系统的摄取情况考察 | 第60-61页 |
2.3.1 体外肿瘤细胞定性摄取考察 | 第60-61页 |
2.3.2 体外肿瘤细胞定量摄取考察 | 第61页 |
2.3.3 折纸载药后进入细胞位置的考察 | 第61页 |
3 实验结果与讨论 | 第61-70页 |
3.1 体外淋巴瘤细胞的抑制率情况考察 | 第61-66页 |
3.1.1 折纸缓冲液对淋巴瘤细胞的影响 | 第62页 |
3.1.2 DNA材料对淋巴瘤细胞的毒性考察 | 第62-63页 |
3.1.3 DNA矩形片折纸载药后对淋巴瘤细胞的抑制率考察 | 第63-64页 |
3.1.4 C2NP修饰的DNA矩形片折纸载体对淋巴瘤细胞的生物活性研究 | 第64-65页 |
3.1.5 C2NP修饰的载药靶向DNA折纸载体对淋巴瘤细胞的生物作用联合化学作用的研究 | 第65-66页 |
3.2 K299细胞对DNA矩形片折纸载药系统的摄取考察 | 第66-70页 |
3.2.1 定性摄取 | 第66-68页 |
3.2.2 定量摄取 | 第68-69页 |
3.2.3 载体进入细胞位置的考察 | 第69-70页 |
4 本章小结 | 第70-71页 |
第四章 载药系统抑制淋巴瘤细胞生长的机制研究 | 第71-82页 |
1 实验材料与仪器 | 第71页 |
1.1 实验试剂 | 第71页 |
1.2 实验仪器 | 第71页 |
2 实验内容 | 第71-74页 |
2.1 体外肿瘤细胞的凋亡考察 | 第71-72页 |
2.2 体外肿瘤细胞的细胞周期考察 | 第72-73页 |
2.3 细胞内的活性氧含量考察 | 第73-74页 |
3 实验结果与讨论 | 第74-81页 |
3.1 体外肿瘤细胞凋亡实验 | 第74-76页 |
3.1.1 检测原理 | 第74页 |
3.1.2 细胞凋亡检测结果 | 第74-76页 |
3.2 体外肿瘤细胞周期实验 | 第76-79页 |
3.2.1 细胞周期检测试剂盒原理 | 第76页 |
3.2.2 细胞周期检测结果 | 第76-79页 |
3.3 体外肿瘤细胞活性氧含量实验 | 第79-81页 |
3.3.1 活性氧含量检测试剂盒原理 | 第79页 |
3.3.2 活性氧含量检测结果 | 第79-81页 |
4 本章小结 | 第81-82页 |
全文总结 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-87页 |
附录 | 第87-94页 |
个人简历 | 第94-95页 |
致谢 | 第95页 |