搞要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-26页 |
1.1 植物质体中脂肪酸的合成 | 第12页 |
1.2 植物超长链脂肪酸的合成 | 第12-16页 |
1.2.1 酮酰CoA合酶 | 第13-15页 |
1.2.1.1 酮酰CoA合酶(KCS)的生物学功能 | 第13-14页 |
1.2.1.2 酮酰CoA合酶的催化机制 | 第14页 |
1.2.1.3 酮酰CoA合酶的表达及底物特异性 | 第14-15页 |
1.2.2 延长酶复合体中的其他酶 | 第15-16页 |
1.3 油菜籽油品质的改良 | 第16-24页 |
1.3.1 常规育种技术改良脂肪酸组成 | 第16-18页 |
1.3.1.1 低芥酸育种 | 第16页 |
1.3.1.2 高芥酸育种 | 第16-17页 |
1.3.1.3 低亚麻酸育种 | 第17页 |
1.3.1.4 高油酸育种 | 第17-18页 |
1.3.2 基因工程技术改良脂肪酸组成 | 第18-23页 |
1.3.2.1 高中链脂肪酸 | 第18-19页 |
1.3.2.2 高硬脂酸(C18:0) | 第19-20页 |
1.3.2.3 高油酸(C18:1) | 第20页 |
1.3.2.4 高芥酸(C22:1) | 第20页 |
1.3.2.5 合成工业用途的特殊脂肪酸 | 第20-22页 |
1.3.2.6 合成多不饱和脂肪酸 | 第22-23页 |
1.3.3 功能性营养成分的改良 | 第23-24页 |
1.4 本研究的目的意义及技术路线 | 第24-26页 |
第二章 低芥酸油菜育种的分子基础 | 第26-41页 |
2.1 材料与方法 | 第26-30页 |
2.1.1 植物材料及菌株 | 第26-27页 |
2.1.2 DNA的提取和基因克隆 | 第27页 |
2.1.3 酵母真核表达 | 第27-28页 |
2.1.4 Western blot杂交 | 第28页 |
2.1.5 气相色谱分析 | 第28-29页 |
2.1.6 荧光定量PCR | 第29页 |
2.1.7 高分辨率溶解曲线分析 | 第29-30页 |
2.2 结果与分析 | 第30-38页 |
2.2.1 栽培种FAE1突变类型分析 | 第30-33页 |
2.2.2 酵母表达及脂肪酸分析 | 第33-35页 |
2.2.3 不同突变类型FAE1在种子发育过程中的表达变化 | 第35-36页 |
2.2.4 突变位点的HRM分析 | 第36-38页 |
2.3 讨论 | 第38-41页 |
2.3.1 低芥酸的基因源和合成调控 | 第38-39页 |
2.3.2 Fae1对延长酶复合体的影响 | 第39-40页 |
2.3.3 不同类型fae1的检测 | 第40-41页 |
第三章 干扰FAE1、ECR、KCR和HCD对油菜芥酸合成的影响 | 第41-56页 |
3.1 材料与方法 | 第41-46页 |
3.1.1 植物材料、菌株及质粒 | 第41页 |
3.1.2 DNA片段的克隆、纯化和连接 | 第41-42页 |
3.1.3 转基因载体的构建 | 第42-43页 |
3.1.4 大肠杆菌感受态的制备和转化 | 第43页 |
3.1.5 农杆菌感受态的制备及转化 | 第43-44页 |
3.1.6 油菜的遗传转化 | 第44-45页 |
3.1.7 转化株的分子鉴定 | 第45页 |
3.1.8 脂肪酸分析 | 第45-46页 |
3.2 结果与分析 | 第46-55页 |
3.2.1 遗传转化载体构建 | 第46-48页 |
3.2.2 植物遗传转化 | 第48-49页 |
3.2.3 转基因株系T_2代脂肪酸种子分析 | 第49-55页 |
3.3 讨论 | 第55-56页 |
第四章 基因工程技术培育低芥酸油菜 | 第56-83页 |
4.1 材料与方法 | 第56-59页 |
4.1.1 植物材料、菌株及质粒 | 第56-57页 |
4.1.2 CTAB法大量提取DNA | 第57页 |
4.1.3 转化株的分子鉴定 | 第57-59页 |
4.1.4 脂肪酸分析 | 第59页 |
4.2 结果与分析 | 第59-80页 |
4.2.1 转化株的分子鉴定 | 第59-60页 |
4.2.2 转基因株系的表达分析 | 第60-63页 |
4.2.3 转基因油菜T_2代种子脂肪酸组成分析 | 第63-68页 |
4.2.4 转基因株系T_2代种子中蛋白、硫含量和含油量分析 | 第68-69页 |
4.2.5 转基因株系i800-821068A18相关基因的转录变化 | 第69-74页 |
4.2.6 显性转基因低芥酸株系的鉴定 | 第74-80页 |
4.3 讨论 | 第80-83页 |
4.3.1 影响RNA干扰效果的因素 | 第80-81页 |
4.3.2 干扰FAE1对脂肪酸合成基因转录的影响 | 第81-83页 |
第五章 全文总结 | 第83-86页 |
参考文献 | 第86-94页 |
附录 | 第94-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
作者简历 | 第101页 |