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利用基因工程技术培育低芥酸油菜的研究

搞要第5-6页
Abstract第6-7页
英文缩略表第11-12页
第一章 引言第12-26页
    1.1 植物质体中脂肪酸的合成第12页
    1.2 植物超长链脂肪酸的合成第12-16页
        1.2.1 酮酰CoA合酶第13-15页
            1.2.1.1 酮酰CoA合酶(KCS)的生物学功能第13-14页
            1.2.1.2 酮酰CoA合酶的催化机制第14页
            1.2.1.3 酮酰CoA合酶的表达及底物特异性第14-15页
        1.2.2 延长酶复合体中的其他酶第15-16页
    1.3 油菜籽油品质的改良第16-24页
        1.3.1 常规育种技术改良脂肪酸组成第16-18页
            1.3.1.1 低芥酸育种第16页
            1.3.1.2 高芥酸育种第16-17页
            1.3.1.3 低亚麻酸育种第17页
            1.3.1.4 高油酸育种第17-18页
        1.3.2 基因工程技术改良脂肪酸组成第18-23页
            1.3.2.1 高中链脂肪酸第18-19页
            1.3.2.2 高硬脂酸(C18:0)第19-20页
            1.3.2.3 高油酸(C18:1)第20页
            1.3.2.4 高芥酸(C22:1)第20页
            1.3.2.5 合成工业用途的特殊脂肪酸第20-22页
            1.3.2.6 合成多不饱和脂肪酸第22-23页
        1.3.3 功能性营养成分的改良第23-24页
    1.4 本研究的目的意义及技术路线第24-26页
第二章 低芥酸油菜育种的分子基础第26-41页
    2.1 材料与方法第26-30页
        2.1.1 植物材料及菌株第26-27页
        2.1.2 DNA的提取和基因克隆第27页
        2.1.3 酵母真核表达第27-28页
        2.1.4 Western blot杂交第28页
        2.1.5 气相色谱分析第28-29页
        2.1.6 荧光定量PCR第29页
        2.1.7 高分辨率溶解曲线分析第29-30页
    2.2 结果与分析第30-38页
        2.2.1 栽培种FAE1突变类型分析第30-33页
        2.2.2 酵母表达及脂肪酸分析第33-35页
        2.2.3 不同突变类型FAE1在种子发育过程中的表达变化第35-36页
        2.2.4 突变位点的HRM分析第36-38页
    2.3 讨论第38-41页
        2.3.1 低芥酸的基因源和合成调控第38-39页
        2.3.2 Fae1对延长酶复合体的影响第39-40页
        2.3.3 不同类型fae1的检测第40-41页
第三章 干扰FAE1、ECR、KCR和HCD对油菜芥酸合成的影响第41-56页
    3.1 材料与方法第41-46页
        3.1.1 植物材料、菌株及质粒第41页
        3.1.2 DNA片段的克隆、纯化和连接第41-42页
        3.1.3 转基因载体的构建第42-43页
        3.1.4 大肠杆菌感受态的制备和转化第43页
        3.1.5 农杆菌感受态的制备及转化第43-44页
        3.1.6 油菜的遗传转化第44-45页
        3.1.7 转化株的分子鉴定第45页
        3.1.8 脂肪酸分析第45-46页
    3.2 结果与分析第46-55页
        3.2.1 遗传转化载体构建第46-48页
        3.2.2 植物遗传转化第48-49页
        3.2.3 转基因株系T_2代脂肪酸种子分析第49-55页
    3.3 讨论第55-56页
第四章 基因工程技术培育低芥酸油菜第56-83页
    4.1 材料与方法第56-59页
        4.1.1 植物材料、菌株及质粒第56-57页
        4.1.2 CTAB法大量提取DNA第57页
        4.1.3 转化株的分子鉴定第57-59页
        4.1.4 脂肪酸分析第59页
    4.2 结果与分析第59-80页
        4.2.1 转化株的分子鉴定第59-60页
        4.2.2 转基因株系的表达分析第60-63页
        4.2.3 转基因油菜T_2代种子脂肪酸组成分析第63-68页
        4.2.4 转基因株系T_2代种子中蛋白、硫含量和含油量分析第68-69页
        4.2.5 转基因株系i800-821068A18相关基因的转录变化第69-74页
        4.2.6 显性转基因低芥酸株系的鉴定第74-80页
    4.3 讨论第80-83页
        4.3.1 影响RNA干扰效果的因素第80-81页
        4.3.2 干扰FAE1对脂肪酸合成基因转录的影响第81-83页
第五章 全文总结第83-86页
参考文献第86-94页
附录第94-100页
致谢第100-101页
作者简历第101页

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