中文摘要 | 第4-9页 |
Abstract | 第9-13页 |
缩略语说明 | 第17-18页 |
前言 | 第18-20页 |
研究现状、成果 | 第18页 |
研究目的、方法 | 第18-20页 |
一、CAFs旁分泌效应诱导肿瘤转移机制的体外研究 | 第20-54页 |
1.1 实验材料 | 第20-27页 |
1.1.1 细胞系 | 第20页 |
1.1.2 实验材料 | 第20-27页 |
1.2 实验方法 | 第27-41页 |
1.2.1 细胞培养 | 第27-28页 |
1.2.2 Western blotting检测蛋白质的表达水平 | 第28-30页 |
1.2.3 ChIP分析蛋白质与DNA的相互作用 | 第30-33页 |
1.2.4 Real-time PCR检测HOTAIR的表达水平 | 第33-34页 |
1.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第34-35页 |
1.2.6 FISH检测HOTAIR的表达水平 | 第35-36页 |
1.2.7 IF检测蛋白质的表达水平 | 第36-37页 |
1.2.8 Wound Healing和Transwell检测细胞迁移和侵袭能力 | 第37-38页 |
1.2.9 ELISA检测细胞上清中TGF-β1的含量 | 第38-40页 |
1.2.10 统计学方法 | 第40-41页 |
1.3 结果 | 第41-50页 |
1.3.1 CAFs通过旁分泌TGF-β1诱导乳腺癌细胞的转移 | 第41-43页 |
1.3.2 CAFs通过激活HOTAIR异常表达诱导侵袭性表型 | 第43-46页 |
1.3.3 CAFs激活TGF-β1/SMAD信号通路转录调控HOTAIR | 第46-48页 |
1.3.4 CAFs通过转录激活HOTAIR靶向激活CDK5信号通路 | 第48-50页 |
1.4 讨论 | 第50-53页 |
1.4.1 CAFs在肿瘤微环境中的重要作用 | 第50-51页 |
1.4.2 HOTAIR对肿瘤侵袭的影响 | 第51-53页 |
1.5 小结 | 第53-54页 |
二、CAFs旁分泌效应诱导肿瘤转移机制的体内研究 | 第54-64页 |
2.1 实验材料 | 第54-55页 |
2.1.1 细胞系及重组慢病毒载体 | 第54页 |
2.1.2 实验动物 | 第54页 |
2.1.3 实验药品与试剂 | 第54页 |
2.1.4 实验仪器和材料 | 第54-55页 |
2.2 实验方法 | 第55-58页 |
2.2.1 构建重组慢病毒及转染 | 第55页 |
2.2.2 乳腺癌原位肿瘤建模 | 第55页 |
2.2.3 动物模型数据采集 | 第55页 |
2.2.4 动物活体成像 | 第55页 |
2.2.5 动物解剖及组织处理 | 第55-56页 |
2.2.6 H&E染色 | 第56页 |
2.2.7 FISH检测HOTAIR的表达水平 | 第56页 |
2.2.8 IHC检测相关蛋白质的表达水平 | 第56-57页 |
2.2.9 统计学处理 | 第57-58页 |
2.3 结果 | 第58-61页 |
2.3.1 HOTAIR的敲降抑制CAFs诱导的肿瘤生长和转移 | 第58-59页 |
2.3.2 治疗措施对肺转移的影响 | 第59-60页 |
2.3.3 FISH检测HOTAIR水平及IHC检测蛋白水平 | 第60-61页 |
2.4 讨论 | 第61-63页 |
2.4.1 shHOTAIR在肿瘤治疗中的重要作用 | 第61-62页 |
2.4.2 HOTAIR在临床水平中的重要作用 | 第62-63页 |
2.5 小结 | 第63-64页 |
三、乳腺癌中CAFs/HOTAIR与肿瘤转移及预后的相关性分析 | 第64-70页 |
3.1 实验材料 | 第64页 |
3.1.1 石蜡切片 | 第64页 |
3.1.2 药品试剂 | 第64页 |
3.1.3 仪器材料 | 第64页 |
3.2 实验方法 | 第64-65页 |
3.2.1 FISH检测HOTAIR的表达水平 | 第64页 |
3.2.2 IHC检测相关蛋白质的表达水平 | 第64页 |
3.2.3 统计学处理 | 第64-65页 |
3.3 结果 | 第65-68页 |
3.3.1 CAFs标志物与肿瘤转移及预后不良呈正相关 | 第65-66页 |
3.3.2 CAFs诱导HOTAIR高表达导致肿瘤转移及预后不良 | 第66-67页 |
3.3.3 CAFs通过分泌TGF-β1诱导肿瘤转移机制示意图 | 第67-68页 |
3.4 讨论 | 第68-70页 |
结论 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-79页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第79-80页 |
综述 应力转导和YAP相关基质重塑对CAFs的发生和维持 | 第80-97页 |
综述参考文献 | 第87-97页 |
致谢 | 第97-98页 |
个人简历 | 第98页 |