| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略词表 | 第7-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-22页 |
| 1.1 氧化应激对胚胎发育的影响 | 第11-12页 |
| 1.2 氧化应激影响骨发育过程 | 第12-15页 |
| 1.3 氧化应激诱导Ferroptosis细胞死亡方式 | 第15-17页 |
| 1.4 氧化应激模型研究进展 | 第17-19页 |
| 1.5 鸡胚模型及其应用 | 第19-21页 |
| 1.6 立题依据 | 第21-22页 |
| 第二章 AAPH诱导的氧化应激对鸡胚骨发育的影响 | 第22-39页 |
| 2.1 实验材料与方法 | 第22-30页 |
| 2.1.1 主要材料 | 第22-23页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.3 试剂配置 | 第24页 |
| 2.1.4 给药方案 | 第24-25页 |
| 2.1.5 统计鸡胚死亡率及体重 | 第25-26页 |
| 2.1.6 骨骼染色 | 第26-27页 |
| 2.1.7 SOD试剂盒检测软骨中SOD酶水平 | 第27-28页 |
| 2.1.8 MDA试剂盒检测软骨组织中MDA含量 | 第28-29页 |
| 2.1.9 蛋白质浓度测试 | 第29-30页 |
| 2.1.10 液相色谱测GSH含量 | 第30页 |
| 2.2 实验结果 | 第30-37页 |
| 2.2.1 AAPH对鸡胚死亡率的影响 | 第30-31页 |
| 2.2.2 AAPH对鸡胚体重的影响 | 第31-33页 |
| 2.2.3 AAPH对鸡胚胫骨形态的影响 | 第33-35页 |
| 2.2.4 AAPH对鸡胚软骨氧化应激水平的影响 | 第35-37页 |
| 2.3 小结与讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 AAPH影响鸡胚软骨发育通过铁凋亡途径 | 第39-66页 |
| 3.1 实验材料与方法 | 第39-56页 |
| 3.1.1 主要材料 | 第39-41页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第41页 |
| 3.1.3 试剂的配置 | 第41-42页 |
| 3.1.4 给药方案 | 第42-43页 |
| 3.1.5 胫骨石蜡切片制作 | 第43-44页 |
| 3.1.6 石蜡切片HE染色 | 第44页 |
| 3.1.7 PCNA免疫荧光染色 | 第44-45页 |
| 3.1.8 蛋白质组学iTRAQ测试 | 第45-51页 |
| 3.1.9 统计鸡胚死亡率及体重 | 第51页 |
| 3.1.10 骨骼染色 | 第51页 |
| 3.1.11 胫骨生长板增殖区及肥大区长度测量 | 第51-52页 |
| 3.1.12 RT-PCR检测软骨组织基因表达 | 第52-55页 |
| 3.1.13 Western blotting测软骨组织蛋白含量 | 第55-56页 |
| 3.2 实验结果 | 第56-65页 |
| 3.2.1 AAPH对胫骨生长板增殖区的影响 | 第56-57页 |
| 3.2.2 AAPH对胫骨增殖区细胞增殖情况的影响 | 第57-58页 |
| 3.2.3 鸡胚软骨的蛋白质组学分析 | 第58-61页 |
| 3.2.4 Fer-1 对鸡胚死亡及体重的保护作用 | 第61-62页 |
| 3.2.6 Fer-1 对鸡胚胫骨发育的保护作用 | 第62-64页 |
| 3.2.7 铁凋亡通路上代表性物质基因及蛋白表达情况 | 第64-65页 |
| 3.3 小结与讨论 | 第65-66页 |
| 第四章 AAPH诱导ATDC5细胞发生铁凋亡的机制研究 | 第66-80页 |
| 4.1 实验材料与方法 | 第66-72页 |
| 4.1.1 主要材料 | 第66-68页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第68页 |
| 4.1.3 试剂的配置 | 第68-69页 |
| 4.1.4 细胞实验方案 | 第69-70页 |
| 4.1.5 ATDC5细胞阿利新蓝染色 | 第70-71页 |
| 4.1.6 流式测ATDC5细胞脂质过氧化程度 | 第71页 |
| 4.1.7 RT-PCR检测ATDC5细胞基因表达 | 第71-72页 |
| 4.1.8 Western blotting测软骨组织蛋白含量 | 第72页 |
| 4.2 实验结果 | 第72-78页 |
| 4.2.1 AAPH及Erastin对ATDC5细胞抑制率的影响 | 第72-73页 |
| 4.2.2 各通路抑制剂在AAPH及Erastin模型上对细胞的保护作用 | 第73-76页 |
| 4.2.3 AAPH对ATDC5细胞分化及脂质过氧化状态的影响 | 第76-77页 |
| 4.2.5 ATDC5细胞铁凋亡通路相关的基因和蛋白表达 | 第77-78页 |
| 4.3 小结与讨论 | 第78-80页 |
| 第五章 结论与展望 | 第80-82页 |
| 5.1 总结 | 第80-81页 |
| 5.2 创新点 | 第81页 |
| 5.3 展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
| 在学期间发表论文 | 第95页 |
