| 中英文缩略词表 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-13页 |
| 前言 | 第14-20页 |
| 一、食管癌发病机制的研究进展 | 第14-15页 |
| 二、上皮-间质转化在食管鳞癌中的研究进展 | 第15-17页 |
| 三、EYA基因家族在肿瘤中的研究进展 | 第17-20页 |
| 实验材料 | 第20-25页 |
| 一、实验试剂 | 第20-23页 |
| 二、主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 三、溶液配制 | 第24-25页 |
| 实验方法 | 第25-56页 |
| 一、食管鳞癌组织标本的收集 | 第25页 |
| 二、食管鳞癌细胞系及其药物处理 | 第25-27页 |
| 三、食管鳞癌组织及细胞系中基因组DNA及总RNA的提取 | 第27-29页 |
| 四、甲基化特异性PCR及亚硫酸氢盐处理后测序 | 第29-34页 |
| 五、RT-PCR半定量检测mRNA的表达水平 | 第34-37页 |
| 六、western blot检测蛋白的表达水平 | 第37-40页 |
| 七、构建质粒 | 第40-44页 |
| 八、免疫荧光 | 第44-45页 |
| 九、细胞功能学实验 | 第45-51页 |
| 十、动物实验 | 第51-55页 |
| 十一、统计方法 | 第55-56页 |
| 实验结果 | 第56-90页 |
| 一、食管鳞癌组织和细胞系中EYA4基因存在异常的高甲基化 | 第56-64页 |
| 1.1 EYA4基因在食管鳞癌组织中的甲基化情况 | 第56-58页 |
| 1.2 EYA4基因甲基化水平与食管鳞癌临床病理因素的相关关系 | 第58-59页 |
| 1.3 EYA4基因在食管鳞癌细胞系中的甲基化情况 | 第59-61页 |
| 1.4 食管鳞癌细胞系中EYA4基因的表达水平 | 第61-62页 |
| 1.5 食管鳞癌细胞系经5-aza-dC处理后EYA4基因启动子区甲基化情况的检测 | 第62-63页 |
| 1.6 食管鳞癌细胞系经药物诱导后EYA4基因表达水平的检测 | 第63-64页 |
| 二、在食管鳞癌细胞系中EYA4基因功能的研究 | 第64-74页 |
| 2.1 食管鳞癌细胞系中EYA4基因的表达水平 | 第64页 |
| 2.2 建立EYA4敲降和过表达的稳转细胞系 | 第64-67页 |
| 2.3 EYA4对食管鳞癌细胞的增殖没有明显影响 | 第67-70页 |
| 2.4 EYA4能够抑制食管鳞癌细胞的侵袭和转移 | 第70-74页 |
| 三、EYA4在食管鳞癌细胞系中抑制EMT的机制研究 | 第74-80页 |
| 3.1 RT-PCR检测EYA4基因表达水平改变后EMT相关基因的表达水平 | 第74-76页 |
| 3.2 western blot检测食管鳞癌细胞系中EYA4表达水平改变后EMT相关蛋白的表达水平 | 第76-77页 |
| 3.3 免疫荧光染色检测食管鳞癌细胞系中EYA4基因敲降后EMT相关蛋白的表达情况 | 第77-79页 |
| 3.4 EYA4基因通过抑制AKT/GSK3 β信号通路发挥抑制EMT的作用 | 第79-80页 |
| 四、TGF诱导EYA4表达下调及其可能的机制 | 第80-85页 |
| 4.1 TGF-β1诱导EYA4 mRNA表达水平下调 | 第80-81页 |
| 4.2 TGF-β1诱导EYA4蛋白表达水平下调的时间和浓度效应 | 第81-82页 |
| 4.3 TGF-β1诱导EYA4 mRNA和蛋白表达水平下调的机制 | 第82-83页 |
| 4.4 在食管鳞癌细胞系中EYA4抑制TGF-β1诱导的EMT | 第83-84页 |
| 4.5 EYA4基因抑制TGF-β1诱导的EMT的机制 | 第84-85页 |
| 五、在食管鳞癌细胞系中EYA4基因能够促进DNA损伤的修复 | 第85-90页 |
| 5.1 EYA4基因能够促进顺铂诱导的DNA损伤修复 | 第85-86页 |
| 5.2 EYA4抑制食管鳞癌细胞系发生顺铂诱导的细胞凋亡 | 第86-88页 |
| 5.3 EYA4促进DNA损伤修复的机制研究 | 第88-90页 |
| 讨论 | 第90-95页 |
| 小结 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-100页 |
| 基金资助 | 第100页 |
| 在学期间发表论文 | 第100-101页 |
| 文献综述 | 第101-108页 |
| 参考文献 | 第106-108页 |
| 致谢 | 第108-110页 |
| 个人简历 | 第110-111页 |
