| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-18页 |
| 1.1 新城疫简介 | 第12-13页 |
| 1.1.1 新城疫概述 | 第12页 |
| 1.1.2 新城疫病毒的病原学特征 | 第12页 |
| 1.1.3 新城疫的免疫抑制 | 第12-13页 |
| 1.1.4 新城疫的流行及危害 | 第13页 |
| 1.2 树突状细胞的概述 | 第13-15页 |
| 1.2.1 树突状细胞简介 | 第13-14页 |
| 1.2.2 树突状细胞功能研究 | 第14-15页 |
| 1.2.3 树突状细胞摄取抗原的机制 | 第15页 |
| 1.3 DC-SIGN概述 | 第15-17页 |
| 1.3.1 DC-SIGN简介 | 第15-16页 |
| 1.3.2 DC-SIGN免疫调节功能 | 第16页 |
| 1.3.3 DC-SIGN与病原体感染 | 第16-17页 |
| 1.3.4 DC-SIGN介导的信号通路 | 第17页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第17-18页 |
| 第二章 NDV感染DCS对细胞表型变化及分泌细胞因子的影响 | 第18-27页 |
| 2.1 材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 病毒和细胞 | 第18页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第18页 |
| 2.1.3 主要仪器和设备 | 第18页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.2 方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 新城疫病毒的扩增及TCID50的测定 | 第19页 |
| 2.2.2 骨髓来源树突状细胞的体外分离 | 第19页 |
| 2.2.3 NDV刺激DCs细胞表型及对分泌细胞因子的变化 | 第19-21页 |
| 2.3 结果 | 第21-25页 |
| 2.3.1 流式检测NDV-GFP刺激对DCs细胞表型的变化 | 第21-22页 |
| 2.3.2 ELISA检测NDV-GFP刺激对DCs分泌细胞因子的变化 | 第22-23页 |
| 2.3.3 荧光定量PCR检测NDV刺激对DCs分泌细胞因子mRNA水平变化 | 第23-24页 |
| 2.3.4 ELISA试剂盒检测NDV刺激对DCs分泌细胞因子的变化 | 第24-25页 |
| 2.4 讨论 | 第25-27页 |
| 第三章 NDV感染DCS抑制T淋巴细胞增殖作用方式初步研究 | 第27-38页 |
| 3.1 材料 | 第27-28页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第27页 |
| 3.1.2 溶液配制 | 第27-28页 |
| 3.2 方法 | 第28-31页 |
| 3.2.1 分离和培养小鼠骨髓来源树突状细胞 | 第28页 |
| 3.2.2 NDV感染DCs对T细胞增殖影响 | 第28-29页 |
| 3.2.4 DC-SIGN抗体对NDV在DCs中复制的影响 | 第29-30页 |
| 3.2.5 Rottlerin剂量依赖实验 | 第30页 |
| 3.2.6 Rottlerin不同给药时间对DCs巨胞饮作用的影响 | 第30-31页 |
| 3.3 结果 | 第31-37页 |
| 3.3.1 DCs在NDV刺激CD4+ T淋巴细胞增殖作用 | 第31页 |
| 3.3.2 DC-SIGN对NDV感染DCs影响T细胞增殖作用 | 第31-34页 |
| 3.3.3 Western blot检测DC-SIGN对NDV感染DCs的影响 | 第34页 |
| 3.3.4 Rottlerin药物剂量依赖试验结果 | 第34-36页 |
| 3.3.5 Rottlerin不同给药时间对DCs巨胞饮作用的影响 | 第36-37页 |
| 3.4 讨论 | 第37-38页 |
| 第四章 稳定表达小鼠DC-SIGN的HELA细胞系的构建 | 第38-46页 |
| 4.1 材料 | 第38页 |
| 4.1.1 细胞和克隆载体 | 第38页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第38页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第38页 |
| 4.2 方法 | 第38-43页 |
| 4.2.1 引物设计 | 第38页 |
| 4.2.2 模板获取 | 第38-39页 |
| 4.2.3 重组质粒的构建 | 第39-41页 |
| 4.2.4 重组真核表达载体的构建 | 第41-42页 |
| 4.2.5 细胞转染 | 第42页 |
| 4.2.6 稳定表达DC-SIGN的HeLa的筛选 | 第42页 |
| 4.2.7 稳定转染HeLa细胞DC-SIGN的鉴定 | 第42-43页 |
| 4.3 结果 | 第43-45页 |
| 4.3.1 RT-PCR扩增DC-SIGN基因片段结果 | 第43页 |
| 4.3.2 DC-SIGN重组质粒双酶切鉴定及测序结果 | 第43-44页 |
| 4.3.3 RT-PCR检测稳定转染HeLa细胞中DC-SIGN | 第44页 |
| 4.3.4 Western Blot检测稳定转染HeLa细胞DC-SIGN蛋白表达结果 | 第44-45页 |
| 4.4.讨论 | 第45-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |
