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脑卒中大鼠纹状体及皮层投射神经元新生及分子机制研究

缩略词表(按字母顺序)第6-7页
中文摘要第7-9页
英文摘要(Abstract)第9-11页
(一) 前言第12-15页
(二) 材料与方法第15-28页
    1. 实验动物与分组第15-16页
    2. 试剂来源第16-17页
    3. 所用仪器第17页
    4. 实验方法第17-28页
        4.1 大脑中动脉线栓(MCAO)模型第17-18页
        4.2 运动康复训练第18页
        4.3 行为学测试第18页
            4.3.1 神经功能评分第18页
            4.3.2 Rota-rod转棒测试第18页
        4.4 大鼠脑立体定位注射及药物腹腔注射第18-19页
            4.4.1 逆转录病毒注射第18-19页
            4.4.2 荧光金注射第19页
            4.4.3 BrdU腹腔注射第19页
            4.4.4 AZA腹腔注射第19页
        4.5 冰冻组织切片的制备第19页
        4.6 研究断面及脑片选取第19-20页
        4.7 焦油紫(CV)染色与脑梗塞体积的检测第20页
        4.8 Fluoro-Jade B染色第20页
        4.9 免疫组织化学单标记第20-22页
            4.9.1 NeuN免疫组织化学染色第20-21页
            4.9.2 5'-meC免疫组织化学染色第21页
            4.9.3 FG、TH及DNMT1免疫组织化学染色第21-22页
        4.10 免疫组织化学双标记第22-23页
            4.10.1 GFP与FG免疫组织化学双标记第22页
            4.10.2 5'-meC与GFAP免疫组织化学双标记第22页
            4.10.3 BrdU与DCX免疫组织化学双标记第22-23页
        4.11 免疫荧光双标记第23-24页
            4.11.1 GFP与NR2及D2L免疫荧光双标记第23页
            4.11.2 FG与NeuN及MAP2免疫荧光双标记第23页
            4.11.3 NeuN与DNMT1免疫荧光双标记第23-24页
            4.11.4 GFAP与DNMT1免疫荧光双标记第24页
            4.11.5 5'-meC与DNMT1,Caspase-3免疫荧光双标记第24页
        4.12 免疫荧光三标记第24-26页
            4.12.1 BrdU,NeuN及FG免疫荧光三标记第24-25页
            4.12.2 GFP,NeuN及FG免疫荧光三标记第25页
            4.12.3 5'-meC,DNMT1及GFAP免疫荧光三标记第25页
            4.12.4 DNMT1、GFAP及Nestin免疫荧光三标记第25-26页
        4.13 免疫印迹第26-27页
            4.13.1 蛋白提取第26页
            4.13.2 Western blot第26-27页
        4.14 细胞计数及相关的统计学分析第27-28页
            4.14.1 免疫组化单标细胞计数第27页
            4.14.2 免疫组化双标细胞计数第27页
            4.14.3 数据统计学分析第27-28页
(三) 实验结果第28-38页
    1. 成年大鼠脑缺血后纹状体及皮层新生神经元向黑质网状部投射的研究第28-31页
        1.1 荧光金注射位点的检测及其在不同脑区中的表达情况第28-29页
        1.2 缺血损伤纹状体新生神经元形成投射到黑质网状部第29-30页
            1.2.1 免疫荧光三标记BrdU~+-NeuN~+-FG~+第29页
            1.2.2 免疫荧光三标记GFP~+-FG~+-NeuN~+第29-30页
        1.3 缺血损伤纹状体新生神经元表达D2L和NR2第30页
        1.4 缺血损伤皮层新生神经元形成投射到黑质网状部第30-31页
        1.5 缺血损伤纹状体新生投射神经元占新生神经元的比例第31页
    2. 缺血后运动训练对缺血诱导新生神经元投射形成的影响第31-34页
        2.1 缺血后运动训练促进脑修复及运动功能的恢复第32页
        2.2 运动训练增加缺血侧纹状体及皮层投射神经元的数量第32页
        2.3 运动训练增加缺血侧纹状体及皮层新生投射神经元的数量第32-33页
        2.4 运动训练上调轴突生长相关蛋白的表达并抑制Nogo-A表达第33页
        2.5 运动训练对缺血损伤侧黑质内多巴胺能神经元的影响第33-34页
    3. DNA甲基化在缺血损伤诱导神经发生中分子机制研究第34-38页
        3.1 缺血损伤引起纹状体内DNMT1细胞定位改变第34-35页
        3.2 缺血损伤脑内异位表达的DNMT1引起DNA甲基化水平升高第35页
        3.3 缺血损伤诱导星形胶质细胞活化伴随着DNA甲基化水平升高第35页
        3.4 异常的DNA甲基化影响神经干细胞的分化第35-36页
        3.5 DNA甲基转移酶抑制剂在缺血性脑损伤中神经保护作用第36-38页
            3.5.1 AZA部分抑制由缺血诱导的纹状体内DNA甲基化水平的升高第36页
            3.5.2 AZA对缺血性脑损伤具有明显的神经保护作用第36页
            3.5.3 AZA上调缺血损伤脑内神经分化相关蛋白及转录因子的表达第36-37页
            3.5.4 AZA促进缺血损伤脑内新生细胞的分化第37页
            3.5.5 AZA明显抑制缺血损伤脑内活化型Caspase-3的表达第37-38页
(四) 讨论第38-46页
    1. 短暂性局部脑缺血对成年大鼠脑基底神经节环路的影响第38-41页
        1.1 脑内基底神经节环路的解剖学特点第38页
        1.2 缺血损伤对纹状体内不同类型神经元的影响第38-39页
        1.3 缺血损伤对脑内纹状体-黑质通路的影响第39-40页
        1.4 缺血性脑损伤黑质内多巴胺能神经元的影响第40-41页
    2. 缺血后运动训练促进脑内新生神经元投射形成及功能恢复机制分析第41-44页
        2.1 运动训练对缺血诱导神经新生的影响第41页
        2.2 运动训练对缺血损伤脑内突触可塑性的调节第41-43页
        2.3 运动训练对黑质内多巴胺能神经元的影响第43-44页
    3. DNA甲基化在缺血诱导神经发生中的作用第44-46页
(五) 结论第46-47页
(六) 图版说明第47-62页
(七) 参考文献第62-71页
综述第71-82页
    参考文献第77-82页
附一:致谢第82-83页
附二:研究生期间发表及完成的论文第83-84页

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