| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩写表 | 第10-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 抗菌肽简介 | 第11-14页 |
| 1.1.1 结构特点与理化性质 | 第11页 |
| 1.1.2 来源 | 第11-12页 |
| 1.1.3 分类 | 第12页 |
| 1.1.4 应用前景 | 第12-14页 |
| 1.2 HBD-2简介 | 第14-16页 |
| 1.2.1 HBD-2结构 | 第14-15页 |
| 1.2.2 组织分布 | 第15页 |
| 1.2.3 功能活性 | 第15-16页 |
| 1.3 HBD-2在基因工程中的研究进展 | 第16-18页 |
| 1.4 本课题研究内容及意义 | 第18-19页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第18页 |
| 1.4.2 研究意义 | 第18-19页 |
| 第2章 人β-防御素-2在大肠杆菌宿主中的表达研究 | 第19-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-23页 |
| 2.1.1 质粒与菌株 | 第19-20页 |
| 2.1.2 试剂盒和工具酶 | 第20页 |
| 2.1.3 引物 | 第20页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第20页 |
| 2.1.5 主要溶液配置 | 第20-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-32页 |
| 2.2.1 目的基因及引物的设计与合成 | 第23-24页 |
| 2.2.2 目的片段的扩增 | 第24页 |
| 2.2.3 产物的回收 | 第24-25页 |
| 2.2.4 目的基因与T载体连接 | 第25-27页 |
| 2.2.5 目的基因表达载体的构建 | 第27-28页 |
| 2.2.6 重组大肠杆菌蛋白的诱导表达及鉴定 | 第28-30页 |
| 2.2.7 重组蛋白表达条件的优化 | 第30页 |
| 2.2.8 mHBD-2的分离纯化 | 第30-31页 |
| 2.2.9 体外活性分析 | 第31-32页 |
| 2.3 实验结果 | 第32-44页 |
| 2.3.1 目的基因的PCR扩增结果 | 第32-33页 |
| 2.3.2 重组表达质粒pHU004、pHU005酶切验证结果 | 第33-34页 |
| 2.3.3 重组表达菌株的鉴定 | 第34页 |
| 2.3.4 表达产物的SDS-PAGE分析 | 第34-35页 |
| 2.3.5 表达产物的Western-blot分析 | 第35-36页 |
| 2.3.6 mHBD-2在大肠杆菌中表达条件的选择 | 第36-38页 |
| 2.3.7 目的蛋白的纯化 | 第38-42页 |
| 2.3.8 mHBD-2抑菌活性研究 | 第42-44页 |
| 2.4 讨论 | 第44-45页 |
| 2.5 本章小结 | 第45-46页 |
| 第3章 人β-防御素-2在乳酸菌宿主中的表达研究 | 第46-64页 |
| 3.1 实验材料 | 第46-48页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第46-47页 |
| 3.1.2 试剂盒和工具酶 | 第47页 |
| 3.1.3 引物 | 第47页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第47-48页 |
| 3.1.5 主要溶液配制 | 第48页 |
| 3.2 实验方法 | 第48-55页 |
| 3.2.1 建立诱导型乳酸菌表达系统 | 第48-51页 |
| 3.2.2 建立组合型乳酸菌表达系统 | 第51-52页 |
| 3.2.3 建立串联型乳酸菌表达系统 | 第52-54页 |
| 3.2.4 体外抑菌活性的检测 | 第54-55页 |
| 3.3 实验结果 | 第55-61页 |
| 3.3.1 重组诱导型乳酸菌表达系统的鉴定结果 | 第55-57页 |
| 3.3.2 重组组合型乳酸菌表达系统的鉴定结果 | 第57-59页 |
| 3.3.3 重组串联型乳酸菌表达系统的鉴定结果 | 第59-61页 |
| 3.3.4 抑菌效果分析 | 第61页 |
| 3.4 讨论 | 第61-62页 |
| 3.5 本章小结 | 第62-64页 |
| 全文结论 | 第64-65页 |
| 论文创新点 | 第65-66页 |
| 展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
