博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 | 第3-5页 |
摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6页 |
英文缩略表 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-32页 |
1.1 蛋白质翻译后修饰 | 第11-12页 |
1.2 蛋白质磷酸化修饰 | 第12-14页 |
1.3 蛋白质磷酸化功能 | 第14-18页 |
1.3.1 蛋白质磷酸化与信号传导 | 第14-16页 |
1.3.2 蛋白质磷酸化与蛋白细胞定位 | 第16-17页 |
1.3.3 蛋白质磷酸化与细胞分裂 | 第17-18页 |
1.4 磷酸化蛋白组研究进展 | 第18-27页 |
1.4.1 磷酸化蛋白组研究主要内容及方法 | 第18-20页 |
1.4.2 植物磷酸化蛋白质组研究进展 | 第20-27页 |
1.5 水稻生殖发育有关的磷酸化蛋白研究进展 | 第27-29页 |
1.6 植物bZIP转录因子 | 第29-30页 |
1.6.1 植物bZIP转录因子结构特点 | 第29页 |
1.6.2 植物bZIP转录因子调控机制 | 第29页 |
1.6.3 水稻中的bZIP转录因子 | 第29-30页 |
1.7 本课题研究思路 | 第30-32页 |
第二章 水稻种子磷酸化蛋白质组学研究 | 第32-48页 |
2.1 材料与方法 | 第32-35页 |
2.1.1 实验材料与样品的收集 | 第32页 |
2.1.2 总蛋白的提取 | 第32-33页 |
2.1.3 蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第33-34页 |
2.1.4 蛋白消化(Protein Digestion) | 第34-35页 |
2.1.5 磷酸化肽段的富集 | 第35页 |
2.1.6 LC-MS/MS分析和数据分析 | 第35页 |
2.2 结果与分析 | 第35-44页 |
2.2.1 磷酸化位点、肽段、蛋白的鉴定 | 第35-37页 |
2.2.2 磷酸化蛋白的亚细胞定位 | 第37页 |
2.2.3 磷酸化位点Motif分析 | 第37-38页 |
2.2.4 差异性磷酸化的肽段和蛋白 | 第38-40页 |
2.2.5 差异磷酸化蛋白的GO分析 | 第40-41页 |
2.2.6 差异磷酸化蛋白磷酸化修饰丰度与蛋白表达量的关系 | 第41-44页 |
2.3 讨论 | 第44-48页 |
2.3.1 蛋白的磷酸化修饰与花分生组织发育 | 第44页 |
2.3.2 磷酸化激活细胞的增殖和增长 | 第44-45页 |
2.3.3 磷酸化修饰与植物激素调节 | 第45-46页 |
2.3.4 磷酸化修饰与水稻灌浆和品质形成 | 第46-48页 |
第三章 差异磷酸化转录因子OsbZIP72的研究 | 第48-75页 |
3.1 材料与方法 | 第48-63页 |
3.1.1 水稻组织总RNA的提取 | 第48-49页 |
3.1.2 大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第49-50页 |
3.1.3 载体的构建 | 第50-51页 |
3.1.4 农杆菌感受态的制备及转化 | 第51-52页 |
3.1.5 水稻转基因的方法 | 第52-56页 |
3.1.6 RNA反转录 | 第56-57页 |
3.1.7 荧光实时定量PCR | 第57-58页 |
3.1.8 RNA-seq | 第58页 |
3.1.9 酵母双杂交 | 第58-59页 |
3.1.10 融合蛋白的原核表达以及纯化 | 第59-60页 |
3.1.11 体外pull down实验 | 第60页 |
3.1.12 激酶实验 | 第60-61页 |
3.1.13 EMSA | 第61-63页 |
3.2 结果与分析 | 第63-72页 |
3.2.1 OsbZIP72差异磷酸化情况以及其表达模式 | 第63-65页 |
3.2.2 OsbZIP72受植物激素诱导表达模式 | 第65-66页 |
3.2.3 过表达OsbZIP72的RNA-seq分析 | 第66-69页 |
3.2.4 OsbZIP72与SAPK10存在互作 | 第69-71页 |
3.2.5 OsbZIP72被SAPK10磷酸化 | 第71页 |
3.2.6 磷酸化状态下OsbZIP72可以直接结合OsAOC | 第71-72页 |
3.3 讨论 | 第72-75页 |
第四章 全文结论与创新之处 | 第75-77页 |
4.1 全文结论 | 第75-76页 |
4.2 本研究的创新之处 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-90页 |
附录 | 第90-97页 |
致谢 | 第97-98页 |
作者简历 | 第98页 |