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化感水稻抑草作用中的miRNAs表达模式及其功能研究

中文摘要第9-12页
ABSTRACT第12-15页
缩略词索引第16-17页
第一章 文献综述第17-30页
    1.1 水稻化感作用及其化感水稻种质资源筛选第17-19页
    1.2 水稻化感作用与农业可持续第19-21页
    1.3 水稻化感物质的分离鉴定第21-22页
    1.4 水稻化感作用的根际生物学特性第22-24页
    1.5 水稻化感作用的基因表达调控第24-26页
    1.6 高通量测序技术第26-28页
    1.7 微小RNA及其功能第28-29页
    1.8 本文的研究内容第29-30页
第二章 稻稗共培条件下化感水稻与稗草根系miRNAs表达谱的构建及其动态表达第30-50页
    2.1 供试材料第30页
    2.2 试验方法第30-36页
        2.2.1 供试材料种植第30-31页
        2.2.2 稗草胁迫第31页
        2.2.3 总RNA提取第31页
        2.2.4 总RNA中痕量基因组DNA的去除第31-32页
        2.2.5 miRNAs的测定与分析第32-34页
        2.2.6 不同共培时间下水稻及稗草根系miRNAs的提取第34页
        2.2.7 miRNAs的逆转录及其qPCR引物的设计第34-35页
        2.2.8 miRNAs的逆转录体系第35-36页
        2.2.9 miRNAs的qPCR检测第36页
    2.3 结果分析第36-48页
        2.3.1 化感水稻及共培稗草总RNA的检测第36-37页
        2.3.2 sRNA的测序质量分析第37-38页
        2.3.3 sRNA测定结果统计第38页
        2.3.4 snRNA长度分布第38-39页
        2.3.5 样品间sRNA公共序列的分析第39页
        2.3.6 sRNA与Rfam数据库对比第39-40页
        2.3.7 sRNA的基因组比对第40-41页
        2.3.8 化感水稻及共培稗草的miRNAs表达量分析第41页
        2.3.9 化感水稻及共培稗草的miRNAs靶标基因的聚类分析第41-42页
        2.3.10 miRNAs靶标基因的KEGG注释及富集分析第42-43页
        2.3.11 不同化感水稻及其共培稗草中的miRNA第43页
        2.3.12 不同共培天数下稗草植物激素信号转导相关miRNAs的动态表达第43-44页
        2.3.13 不同共培天数下稗草PPAR信号转导相关miRNAs的动态表达第44-45页
        2.3.14 不同共培天数下稗草p53信号转导相关miRNAs的动态表达第45-46页
        2.3.15 不同共培天数下稗草氨基酸、生物碱类合成相关miRNAs的动态表达第46-47页
        2.3.16 不同共培天数下稗草核苷酸切除修复相关miRNAs的动态表达第47页
        2.3.17 miRNAs在稗草共培处理的不同水稻中的动态表达情况第47-48页
    2.4 小结与讨论第48-50页
第三章 重要miRNAs在不同化感水稻共培下的稗草中的动态表达情况第50-69页
    3.1 供试材料第50页
    3.2 供试材料的种植及处理第50-56页
        3.2.1 供试材料种植第50页
        3.2.2 分别与PI312777及Lemont共培的稗草根系miRNAs的提取第50-51页
        3.2.3 与不同化感潜力的转基因PI312777共培的稗草根系miRNAs的提取第51页
        3.2.4 miRNAs的逆转录及其qPCR引物的设计第51页
        3.2.5 miRNAs的qPCR检测第51-52页
        3.2.6 总RNA的提取及纯化第52页
        3.2.7 靶基因的RT-PCR检测第52-53页
        3.2.8 水稻及稗草根系IAA含量的测定第53-54页
        3.2.9 水稻及稗草根系中的DNA损伤程度测定第54-56页
    3.4 结果分析第56-67页
        3.4.1 不同水稻的化感抑草潜力评价第56-57页
        3.4.2 不同共培密度下的稗草根系miRNAs第57页
        3.4.3 不同共培密度下稗草植物激素信号转导相关miRNAs的动态表达第57-58页
        3.4.4 不同共培密度下稗草PPAP信号转导相关miRNAs的动态表达第58-59页
        3.4.5 不同共培密度下稗草p53信号转导相关miRNAs的动态表达第59-60页
        3.4.6 不同共培密度下稗草核苷酸切除修复相关miRNAs的动态表达第60-61页
        3.4.7 不同共培密度下稗草氨基酸、生物碱类合成相关miRNAs的动态表达第61-62页
        3.4.8 靶基因在不同共培密度下的稗草中的表达变化分析第62-64页
        3.4.9 不同稻稗共培密度下,水稻与稗草根系的IAA含量第64-65页
        3.4.10 不同稻稗共培密度下,水稻与稗草根系DNA中的AP位点数测定第65-67页
    3.5 小结与讨论第67-69页
第四章 不同化感物质对稗草miRNAs及其靶基因的表达影响第69-83页
    4.1 供试材料第69页
    4.2 试验方法第69-70页
        4.2.1 供试材料的种植第69页
        4.2.2 供试材料的处理第69-70页
        4.2.3 不同处理下的稗草根系miRNAs的提取第70页
        4.2.4 不同处理下的稗草根系miRNAs的逆转录第70页
        4.2.5 qPCR检测不同处理下的稗草根系miRNAs的表达变化第70页
        4.2.6 不同处理下的稗草根系总RNA的提取及纯化第70页
        4.2.7 不同处理下的稗草根系总RNA的逆转录第70页
        4.2.8 不同处理下的稗草根系靶基因的RT-PCR检测第70页
    4.3 结果分析第70-81页
        4.3.1 不同酚酸处理下稗草根系miRNAs的检测第70-71页
        4.3.2 不同酚酸处理下稗草根系植物激素信号转导相关miRNAs的表达变化第71-72页
        4.3.3 不同酚酸处理下稗草PPAR信号转导相关miRNAs的表达变化第72页
        4.3.4 不同酚酸处理下稗草p53信号转导相关miRNAs的表达变化第72-73页
        4.3.5 不同酚酸处理下稗草氨基酸、生物碱类合成相关miRNAs的表达变化第73-74页
        4.3.6 不同酚酸处理下稗草中核苷酸切除修复相关miRNAs的表达变化第74-75页
        4.3.7 不同萜类处理下稗草根系的miRNAs检测第75页
        4.3.8 不同萜类处理下稗草根系植物激素信号途径相关miRNAs的表达第75-76页
        4.3.9 不同萜类处理下稗草中核苷酸切除修复相关miRNAs的表达变化第76-77页
        4.3.10 不同酚酸处理下稗草根系总RNA的检测第77-78页
        4.3.11 不同酚酸处理下稗草根系靶基因的表达变化第78页
        4.3.12 不同萜类处理下稗草根系根系总RNA的检测第78-79页
        4.3.13 不同萜类处理下稗草根系靶基因的表达变化第79页
        4.3.14 混合酚酸处理下稗草根系miRNAs的表达变化第79-81页
    4.4 小结与讨论第81-83页
第五章 稻稗共培下微生物数量变化及特定微生物的功能第83-101页
    5.1 试验材料第83页
    5.2 试验方法第83-87页
        5.2.1 营养液的前处理第83页
        5.2.2 微生物总DNA的提取第83-84页
        5.2.3 微生物基因组DNA的纯化第84页
        5.2.4 16srDNA ITS基因片段的扩增第84-85页
        5.2.5 16s rDNA和ITS的qPCR标准曲线的建立第85页
        5.2.6 不同稻稗共培体系中细菌、真菌和粘细菌的数量检测第85页
        5.2.7 不同化感物质处理稗草的体系下粘细菌的数量测定第85页
        5.2.8 黄色粘球菌(Myxococcus xanthus)的培养第85-86页
        5.2.9 黄色粘球菌及其发酵液处理稗草第86页
        5.2.10 不同处理下的稗草根系miRNA的提取第86页
        5.2.11 不同处理下的稗草根系miRNA的逆转录第86页
        5.2.12 qPCR检测不同处理下的稗草根系miRNA的表达变化第86页
        5.2.13 不同处理下的稗草根系总RNA的提取及纯化第86页
        5.2.14 不同处理下的稗草根系总RNA的逆转录第86页
        5.2.15 不同处理下的稗草根系靶基因的RT-PCR检测第86页
        5.2.16 黄色粘球菌及阿魏酸互作下化感抑草率测定第86-87页
        5.2.17 土壤DNA的提取及粘细菌的定量检测第87页
    5.3 结果分析第87-99页
        5.3.1 不同稻稗共培下,培养液中微生物总DNA的提取结果第87-88页
        5.3.2 不同稻稗共培下,培养液中细菌的数量差异第88-89页
        5.3.3 不同稻稗共培下,培养液中真菌的数量差异第89-91页
        5.3.4 不同稻稗共培下,培养液中粘细菌的数量差异第91-93页
        5.3.5 不同酚酸类物质处理下,培养液中水体DNA的检测第93页
        5.3.6 不同酚酸类物质处理下,培养液中粘细菌的数量差异第93-94页
        5.3.7 不同酚酸类物质处理下,培养液中水体DNA的检测第94页
        5.3.8 不同萜类物质处理下,培养液中粘细菌的数量第94-95页
        5.3.9 粘细菌及其发酵液处理下的稗草根系miRNAs第95页
        5.3.10 粘细菌及其发酵液处理下稗草的miRNAs表达第95-96页
        5.3.11 粘细菌及其发酵液处理下稗草的靶基因表达第96-97页
        5.3.12 黄色粘球菌的抑草效应第97-98页
        5.3.13 各处理下的土壤中粘细菌的数量第98-99页
    5.4 小结与讨论第99-101页
第六章 全文讨论及结论第101-109页
    6.1 全文讨论第101-106页
    6.2 结论第106-107页
    6.3 展望第107-109页
参考文献第109-117页
附录 本研究中的引物序列第117-119页
攻读博士学位期间发表的论文及其他成果第119-120页
致谢第120页

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