摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第8-14页 |
1.1 蔗糖异构酶的概述 | 第8-10页 |
1.1.1 蔗糖异构酶的来源 | 第8页 |
1.1.2 蔗糖异构酶的酶学性质 | 第8-9页 |
1.1.3 蔗糖异构酶的三级结构及研究 | 第9页 |
1.1.4 蔗糖异构酶的制备 | 第9-10页 |
1.2 异麦芽酮糖的概述 | 第10-12页 |
1.2.1 异麦芽酮糖的组成、结构及理化性质 | 第10-11页 |
1.2.2 异麦芽酮糖的生理功能 | 第11页 |
1.2.3 异麦芽酮糖的生产 | 第11-12页 |
1.2.4 异麦芽酮糖的提取工艺 | 第12页 |
1.3 立题依据和研究意义 | 第12-13页 |
1.4 主要研究内容 | 第13-14页 |
第二章 材料与方法 | 第14-25页 |
2.1 实验材料 | 第14-16页 |
2.1.1 菌种、质粒及主要试剂 | 第14-15页 |
2.1.2 主要仪器 | 第15-16页 |
2.1.3 培养基 | 第16页 |
2.2 实验方法 | 第16-22页 |
2.2.1 重组菌株的构建与培养 | 第16-19页 |
2.2.2 信号肽的更换 | 第19-21页 |
2.2.3 重组短小芽孢杆菌的构建与培养 | 第21-22页 |
2.3 分析方法 | 第22-25页 |
2.3.1 生物量的测定 | 第22页 |
2.3.2 蛋白浓度测定 | 第22页 |
2.3.3 细胞中蔗糖异构酶的分布及SDS- PAGE电泳 | 第22页 |
2.3.4 蔗糖异构酶酶活的测定 | 第22-23页 |
2.3.5 蔗糖异构酶的纯化 | 第23页 |
2.3.6 蔗糖异构酶的酶学性质分析 | 第23-24页 |
2.3.7 酶转化蔗糖生成异麦芽酮糖的反应条件优化 | 第24页 |
2.3.8 HPLC检测异麦芽酮糖含量 | 第24-25页 |
第三章 结果与讨论 | 第25-46页 |
3.1 蔗糖异构酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第25-32页 |
3.1.1 重组菌株的构建与发酵 | 第25-26页 |
3.1.2 信号肽对蔗糖异构酶酶活的影响 | 第26-29页 |
3.1.3 蔗糖异构酶在 3 L发酵罐中的发酵优化 | 第29-32页 |
3.2 蔗糖异构酶基因在B. brevis中的表达 | 第32-37页 |
3.2.1 重组菌株的构建 | 第32-34页 |
3.2.2 重组菌株在摇瓶中的发酵优化 | 第34-35页 |
3.2.3 3 L发酵罐中蔗糖异构酶发酵优化 | 第35-37页 |
3.3 蔗糖异构酶的纯化、酶学性质及应用研究 | 第37-46页 |
3.3.1 重组蔗糖异构酶的纯化 | 第37-39页 |
3.3.2 重组蔗糖异构酶的酶学性质 | 第39-46页 |
主要结论与展望 | 第46-48页 |
主要结论 | 第46-47页 |
展望 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-52页 |
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52页 |