| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-25页 |
| 1.1 影响猪肌内脂肪生成的因素 | 第14-15页 |
| 1.1.1 品种和性别 | 第14页 |
| 1.1.2 营养和环境 | 第14-15页 |
| 1.2 脂肪生成及其调控 | 第15-18页 |
| 1.2.1 促进脂肪细胞分化的转录因子 | 第15-16页 |
| 1.2.2 抑制脂肪细胞分化的转录因子 | 第16-17页 |
| 1.2.3 参与调控脂肪细胞分化的主要信号通路 | 第17-18页 |
| 1.3 miRNAs与脂肪生成 | 第18-21页 |
| 1.3.1 miRNA靶定转录因子调控脂肪生成 | 第19-20页 |
| 1.3.2 miRNAs参与成脂信号通路调控脂肪生成 | 第20-21页 |
| 1.4 miRNAs调控猪脂肪细胞增殖分化 | 第21-22页 |
| 1.5 miR-34c的研究现状 | 第22-25页 |
| 1.5.1 miR-34 家族成员及其进化特征和功能 | 第22-23页 |
| 1.5.2 miR-34c的生物学功能 | 第23-25页 |
| 第二章 猪背最长肌和半腱肌分离的肌内脂肪细胞体外诱导成脂研究 | 第25-38页 |
| 前言 | 第25页 |
| 2.1 材料与方法 | 第25-29页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第25-26页 |
| 2.1.2 猪肌内脂肪细胞分离培养 | 第26-27页 |
| 2.1.3 细胞活力检测 | 第27页 |
| 2.1.4 BODIPY荧光染色 | 第27页 |
| 2.1.5 油红（oil red O, ORO）染色 | 第27-28页 |
| 2.1.6 TG含量测定 | 第28页 |
| 2.1.7 总RNA提取、cDNA合成和Real time PCR | 第28-29页 |
| 2.1.8 Western Blot检测 | 第29页 |
| 2.1.9 数据分析 | 第29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-36页 |
| 2.2.1 L-IMA和S-IMA成脂诱导模式及细胞活力分析 | 第29-30页 |
| 2.2.2 L-IMA和S-IMA成脂诱导分化过程中的形态学变化 | 第30-31页 |
| 2.2.3 L-IMA较S-IMA更易充脂 | 第31-32页 |
| 2.2.4 L-IMA和S-IMA分化过程中分化相关基因转录水平表达变化 | 第32-33页 |
| 2.2.5 L-IMA和S-IMA分化过程中分化相关基因翻译水平表达变化 | 第33-35页 |
| 2.2.6 调控脂肪生成信号通路的变化 | 第35-36页 |
| 2.3 讨论 | 第36-37页 |
| 2.4 小结 | 第37-38页 |
| 第三章 猪肌内脂肪细胞分化中差异表达miRNA的鉴定 | 第38-49页 |
| 3.1 材料与方法 | 第38-40页 |
| 3.1.1 猪肌内脂肪细胞培养与收集 | 第38页 |
| 3.1.2 Small RNA文库制备、检测及上机测序 | 第38-39页 |
| 3.1.3 测序数据评估与分析 | 第39-40页 |
| 3.1.4 miRNAs鉴定 | 第40页 |
| 3.1.5 miRNAs差异表达分析 | 第40页 |
| 3.1.6 总RNA提取、cDNA合成和RT-q PCR验证 | 第40页 |
| 3.1.7 数据分析 | 第40页 |
| 3.2 结果与分析 | 第40-46页 |
| 3.2.1 猪肌内脂肪细胞的培养和分化鉴定 | 第40-41页 |
| 3.2.2 猪肌内脂肪细胞的RNA提取和质检 | 第41-42页 |
| 3.2.3 不同分化阶段猪肌内脂肪细胞分析数据质量及长度分布 | 第42-44页 |
| 3.2.4 不同分化时期猪肌内脂肪细胞miRNAs的筛选和鉴定 | 第44页 |
| 3.2.5 miRNAs测序结果定量验证 | 第44-45页 |
| 3.2.6 不同分化时期猪肌内脂肪细胞差异表达miRNAs分析 | 第45-46页 |
| 3.2.7 不同分化时期猪肌内脂肪细胞差异表达miRNAs鉴定 | 第46页 |
| 3.3 讨论 | 第46-47页 |
| 3.4 小结 | 第47-49页 |
| 第四章 miR-34c在猪肌内脂肪细胞分化过程中的作用研究 | 第49-61页 |
| 4.1 材料与方法 | 第49-52页 |
| 4.1.1 肌内脂肪细胞分离培养 | 第49页 |
| 4.1.2 细胞转染 | 第49-50页 |
| 4.1.3 油红O染色 | 第50页 |
| 4.1.4 靶基因预测 | 第50页 |
| 4.1.5 双荧光素报告载体构建 | 第50页 |
| 4.1.6 双荧光素酶活性分析 | 第50-51页 |
| 4.1.7 总RNA提取、cDNA合成和Real time PCR | 第51页 |
| 4.1.8 Western Blot分析 | 第51页 |
| 4.1.9 流式细胞仪测定细胞周期 | 第51页 |
| 4.1.10 CCK-8 检测 | 第51-52页 |
| 4.1.11 数据分析 | 第52页 |
| 4.2 结果与分析 | 第52-59页 |
| 4.2.1 miR-34c保守性分析 | 第52页 |
| 4.2.2 miR-34c表达谱分析 | 第52-53页 |
| 4.2.3 miR-34c参与的信号通路分析 | 第53页 |
| 4.2.4 过表达miR-34c抑制猪肌内脂肪细胞分化 | 第53-55页 |
| 4.2.5 E2F3和KLF4是miR-34c的靶基因 | 第55-58页 |
| 4.2.6 过表达miR-34c抑制猪肌内前体脂肪细胞增殖 | 第58-59页 |
| 4.3 讨论 | 第59-60页 |
| 4.4 小结 | 第60-61页 |
| 结论与创新点 | 第61-62页 |
| 结论 | 第61页 |
| 创新点 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-73页 |
| 缩略词 | 第73-74页 |
| 附录 | 第74-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简介 | 第79页 |
