摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1. 文献综述 | 第11-19页 |
1.1 背景 | 第11页 |
1.1.1 亚细胞定位概念及意义 | 第11页 |
1.1.2 植物中亚细胞定位研究概况 | 第11页 |
1.2 前期工作 | 第11-12页 |
1.3 植物蛋白亚细胞定位的常用方法 | 第12-14页 |
1.3.1 生物信息学预测法 | 第12-13页 |
1.3.2 荧光蛋白融合定位法 | 第13页 |
1.3.3 免疫组织化学定位法 | 第13-14页 |
1.3.4 蛋白质组学定位技术 | 第14页 |
1.4 常见荧光蛋白种类及其在植物研究中的应用 | 第14-17页 |
1.4.1 绿色荧光蛋白 | 第14-15页 |
1.4.2 红色荧光蛋白 | 第15-16页 |
1.4.3 其他荧光蛋白 | 第16-17页 |
1.5 本研究的目的意义及工作内容 | 第17-19页 |
1.5.1 目的意义 | 第17-18页 |
1.5.2 主要工作内容 | 第18-19页 |
2. 材料与方法 | 第19-24页 |
2.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.1.1 菌株及质粒 | 第19-20页 |
2.1.2 转化受体材料 | 第20页 |
2.1.3 主要试剂和仪器 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-24页 |
2.2.1 转基因后代水稻植株培育及潮霉素鉴定 | 第20-21页 |
2.2.2 转基因后代水稻植株培育、原生质体提取及观察 | 第21页 |
2.2.3 转基因后代水稻植株叶鞘组织荧光观察 | 第21-22页 |
2.2.4 构建GFP或RFP融合结构表达载体 | 第22-23页 |
2.2.5 水稻原生质体瞬时转化 | 第23页 |
2.2.6 水稻原生质体瞬时转化结果荧光观察 | 第23-24页 |
2.2.7 稻瘟菌侵染水稻叶鞘组织及荧光观察 | 第24页 |
2.2.8 农杆菌介导水稻遗传转化 | 第24页 |
3. 结果与分析 | 第24-46页 |
3.1 转基因植株后代检测 | 第24-26页 |
3.1.1 潮霉素抗性基因检测 | 第24-25页 |
3.1.2 PCR扩增特异性序列检测 | 第25-26页 |
3.2 转基因后代水稻原生质体检测 | 第26-31页 |
3.3 转基因后代水稻植株叶鞘组织检测 | 第31-35页 |
3.4 载体优化 | 第35-43页 |
3.5 pCXUN-表达载体原生质体瞬时转化实验 | 第43-44页 |
3.6 利用GFP-H2B水稻材料进行WRKY45-mCherry定位分析 | 第44-45页 |
3.7 稻瘟菌侵染水稻叶鞘组织及荧光观察 | 第45-46页 |
4. 讨论 | 第46-49页 |
4.1 优势及创新点 | 第46-47页 |
4.2 应用前景 | 第47-48页 |
4.3 后续工作 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
附录A 主要试剂与仪器 | 第53-55页 |
附录B 常用培养基及溶液配方 | 第55-60页 |
附录C 实验方法 | 第60-67页 |
附录D 亚细胞定位融合序列比对 | 第67-77页 |
致谢 | 第77页 |