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水稻土微生物群落结构及功能随植稻年限的变化:滩涂围垦稻田时间序列的案例研究

摘要第9-13页
ABSTRACT第13-18页
第一章 文献综述第19-35页
    1.1 土壤微生物在稻田生态系统中的作用和功能第19-20页
        1.1.1 土壤微生物对稻田土壤发育、肥力维持和养分循环具有重要意义第19页
        1.1.2 土壤微生物对水稻生长的作用第19-20页
        1.1.3 土壤微生物可以促进腐殖酸的形成第20页
    1.2 种植水稻对土壤微生物群落的影响第20-22页
        1.2.1 氧化还原状况对水稻土壤微生物群落结构的影响第20-21页
        1.2.2 施肥对水稻土壤微生物群落结构的影响第21页
        1.2.3 土壤团聚体对水稻土壤微生物群落结构的影响第21-22页
    1.3 水稻土的形成和演变第22-27页
        1.3.1 植稻年限对土壤理化性质的影响第23-25页
        1.3.2 植稻年限对土壤微生物活性的影响第25-26页
        1.3.3 土壤微生物群落对植稻年限的响应第26-27页
    1.4 土壤微生物的研究方法及应用第27-30页
        1.4.1 磷脂脂肪酸法(Phospholipid Fatty Acid,PLFA)第28页
        1.4.2 BIOLOG微平板分析方法第28页
        1.4.3 荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ Hybridization,FISH)第28-29页
        1.4.4 变性梯度凝胶电泳(Denaturing gradient Gel Electrophresis,DGGE)第29页
        1.4.5 限制性片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP)第29页
        1.4.6 克隆文库(Clone library)第29-30页
        1.4.7 焦磷酸测序(Pyrosequencing)第30页
    1.5 本论文研究的目标、内容和技术路线第30-35页
        1.5.1 研究目的和意义第30-32页
        1.5.2 研究内容第32-33页
        1.5.3 技术路线第33-35页
第二章 不同植稻年限土壤理化性质和微生物活性及功能第35-49页
    2.1 前言第35页
    2.2 材料方法第35-39页
        2.2.1 研究区域概况第35-37页
        2.2.2 土壤采集和处理第37页
        2.2.3 土壤的粒组分级第37页
        2.2.4 土壤常规理化性质分析第37-38页
        2.2.5 厌氧培养实验对CO_2和CH_4的测定第38页
        2.2.6 土壤微生物群落功能多样性分析(BIOLOG)第38页
        2.2.7 统计分析第38-39页
    2.3 结果分析第39-46页
        2.3.1 长期种植水稻对土壤基本理化性质的影响第39-40页
        2.3.2 不同植稻年限水稻土CO_2和CH_4的产生第40页
        2.3.3 不同植稻年限水稻土中微生物的功能多样性的比较第40-43页
        2.3.4 长期种植水稻条件下各团聚体的组成及其C、N含量的变化第43-44页
        2.3.5 长期种植水稻条件下本体土壤和各团聚体中总DNA、SOC和TN含量的相关性分析第44-46页
    2.4 讨论第46-47页
        2.4.1 长期种植水稻条件下土壤基本理化性质和团聚体的演变特征第46页
        2.4.2 长期种植水稻条件下土壤呼吸和微生物群落功能的变化第46-47页
        2.4.3 土壤有机碳和总氮是影响微生物生物量的重要因子第47页
    2.5 小结第47-49页
第三章 长期种植水稻对土壤中细菌群落的影响第49-67页
    3.1 引言第49页
    3.2 材料方法第49-52页
        3.2.1 供试土壤第49-50页
        3.2.2 土壤微生物总DNA的提取第50页
        3.2.3 定量PCR测定细菌群落丰度第50-51页
        3.2.4 基于454-高通量测序的细菌群落结构分析第51-52页
        3.2.5 数据处理第52页
    3.3 结果分析第52-62页
        3.3.1 不同植稻年限土壤中细菌基因丰度的变化第52页
        3.3.2 不同植稻年限土壤中高通量测序的分类总结第52-60页
        3.3.3 不同植稻年限土壤中细菌群落多样性的变化第60页
        3.3.4 长期植稻过程中土壤细菌群落结构变化的影响因素第60-62页
    3.4 讨论第62-65页
        3.4.1 长期种植水稻对土壤细菌基因丰度的影响第62页
        3.4.2 长期种植水稻对土壤细菌主要门类的影响第62-63页
        3.4.3 长期种植水稻对土壤中功能微生物和可能的病原菌的影响第63-64页
        3.4.4 环境因子在微生物群落演替过程中的影响第64-65页
        3.4.5 长期种植水稻对土壤微生物群落多样性的影响第65页
    3.5 小结第65-67页
第四章 长期种植水稻对土壤中古菌群落的影响第67-83页
    4.1 引言第67页
    4.2 材料方法第67-70页
        4.2.1 供试土壤第67页
        4.2.2 土壤微生物总DNA的提取第67页
        4.2.3 定量PCR测定古菌和产甲烷古菌群落丰度第67-68页
        4.2.4 末端限制性片段多态性分析(T-RFLP)第68-69页
        4.2.5 克隆文库构建以及系统发育分析第69页
        4.2.6 末端限制性酶切片段(T-RFs)的识别第69页
        4.2.7 数据处理第69-70页
    4.3 结果分析第70-78页
        4.3.1 不同植稻年限土壤中古菌和产甲烷古菌丰度的变化第70页
        4.3.2 不同植稻年限土壤中古菌和产甲烷古菌群落结构T-RFLP分析第70-72页
        4.3.3 古菌16S rRNA和产甲烷古菌mcrA基因克隆文库分析第72-74页
        4.3.4 古菌和产甲烷古菌限制性片段的识别和系统进化分析第74-78页
        4.3.5 土壤理化性质、古菌和产甲烷菌丰度和多样性的相关性分析第78页
    4.4 讨论第78-81页
        4.4.1 长期种植水稻对土壤中古菌和产甲烷古菌丰度的影响第78-79页
        4.4.2 长期种植水稻对土壤中古菌和产甲烷古菌群落结构的影响第79-81页
        4.4.3 长期种植水稻对土壤中古菌和产甲烷菌的生物多样性的影响第81页
    4.5 小结第81-83页
第五章 长期种植水稻对不同土壤团聚体粒组中微生物基因丰度和群落结构的影响第83-101页
    5.1 前言第83页
    5.2 材料方法第83-86页
        5.2.1 供试土壤第83页
        5.2.2 土壤样品的采集和处理第83页
        5.2.3 土壤的团聚体粒组分级第83-84页
        5.2.4 土壤理化性质的测定第84页
        5.2.5 土壤微生物总DNA的提取和定量PCR检测细菌、真菌、古菌及产甲烷菌基因丰度第84页
        5.2.6 末端限制性片段多态性分析(T-RFLP)分析不同团聚体粒组中细菌和真菌群落结构第84页
        5.2.7 变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析古菌群落结构第84-85页
        5.2.8 DGGE条带切胶回收和克隆测序第85-86页
        5.2.9 系统进化分析第86页
        5.2.10 数据处理第86页
    5.3 结果分析第86-95页
        5.3.1 不同植稻年限土壤中各团聚体粒组微生物基因丰度的变化第86-87页
        5.3.2 不同植稻年限土壤中各团聚体粒组细菌和真菌群落结构的变化第87-90页
        5.3.3 不同植稻年限土壤中各团聚体粒组古菌群落结构的变化第90页
        5.3.4 特异条带克隆测序和系统进化分析第90-93页
        5.3.5 不同植稻年限土壤中各团聚体粒组微生物群落多样性的变化第93-95页
    5.4 讨论第95-99页
        5.4.1 不同团聚体粒组大小对土壤中细菌、真菌和占菌基因丰度的影响第95-96页
        5.4.2 长期植稻对土壤中不同团聚体粒组中细菌、真菌和古菌基因丰度的影响第96页
        5.4.3 长期植稻对土壤中不同团聚体粒组中微生物群落结构的影响第96-98页
        5.4.4 长期植稻对土壤中不同团聚体粒组中微生物群落多样性的影响第98-99页
    5.5 小结第99-101页
第六章 长期种植水稻对耕层不同深度土壤细菌和真菌基因丰度和群落结构的影响第101-117页
    6.1 前言第101页
    6.2 材料方法第101-103页
        6.2.1 供试土壤第101页
        6.2.2 土壤样品的采集和处理第101-102页
        6.2.3 土壤理化性质的测定第102页
        6.2.4 红外光谱(FTIR)分析第102页
        6.2.5 土壤酶活性的测定第102页
        6.2.6 土壤微生物总DNA的提取和定量PCR检测细菌和真菌基因丰度第102页
        6.2.7 变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析细菌和真菌的群落结构第102-103页
        6.2.8 DGGE特异条带克隆测序系统进化分析第103页
        6.2.9 数据处理第103页
    6.3 结果分析第103-113页
        6.3.1 不同植稻年限耕层土壤中各深度理化性质的变化第103-106页
        6.3.2 不同植稻年限耕层土壤中各深度细菌和真菌基因丰度的变化第106-107页
        6.3.3 不同植稻年限耕层土壤中各深度酶活性的变化第107-108页
        6.3.4 植稻年限与土壤深度对土壤微生物丰度和活性的交互作用第108页
        6.3.5 不同植稻年限耕层土壤中各深度细菌和真菌群落结构的变化第108-109页
        6.3.6 特异条带克隆测序和系统进化分析第109-113页
    6.4 讨论第113-116页
        6.4.1 长期植稻条件下耕层不同深度土壤理化性质和微生物的分布第113-114页
        6.4.2 长期种植水稻对耕层土壤不同深度微生物基因丰度及活性的影响第114-115页
        6.4.3 长期种植水稻对耕层土壤不同深度细菌和真菌群落的影响第115-116页
    6.5 小结第116-117页
第七章 综合讨论、全文结论、创新点及展望第117-123页
    7.1 综合讨论第117-120页
        7.1.1 长期种植水稻过程中土壤特征及其随时间的演变关系第117-118页
        7.1.2 长期植稻条件下土壤微生物群落、多样性的演变第118-119页
        7.1.3 长期植稻过程中细菌和古菌群落的演变速度要快于土壤的演变第119-120页
    7.2 全文结论第120页
    7.3 创新点第120-121页
    7.4 研究不足与展望第121-123页
参考文献第123-145页
攻读博士硕士期间发表论文第145-147页
致谢第147页

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