| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 启动子及其在转录调控中的作用 | 第10-11页 |
| 1.2 启动子分类 | 第11-14页 |
| 1.2.1 组成型启动子 | 第11-12页 |
| 1.2.2 特异型启动子 | 第12-13页 |
| 1.2.3 诱导型启动子 | 第13-14页 |
| 1.2.4 合成启动子 | 第14页 |
| 1.3 启动子分析方法 | 第14-16页 |
| 1.3.1 启动子及顺式作用元件的预测 | 第14-15页 |
| 1.3.2 启动子功能验证 | 第15页 |
| 1.3.3 启动子的缺失分析 | 第15-16页 |
| 1.3.4 顺式作用元件功能验证 | 第16页 |
| 1.3.5 顺式作用元件互作蛋白分析 | 第16页 |
| 1.4 水稻基因启动子研究概述 | 第16-19页 |
| 1.4.1 水稻启动子的分类 | 第17页 |
| 1.4.2 水稻启动子的发现 | 第17-19页 |
| 1.4.3 水稻启动子的应用 | 第19页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 水稻基因启动子Ospz4及其5'端缺失片段的克隆与表达载体的构建 | 第20-34页 |
| 2.1 实验材料与设备 | 第21-22页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株与载体 | 第21页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-30页 |
| 2.2.1 提取水稻基因组DNA | 第22页 |
| 2.2.2 水稻Ospz4启动子区域的PCR扩增、片段回收及T载体构建 | 第22-24页 |
| 2.2.3 大肠杆菌感受态制备及热激转化 | 第24-25页 |
| 2.2.4 大肠杆菌质粒提取与酶切鉴定 | 第25-26页 |
| 2.2.5 水稻Ospz4启动子5'端缺失片段的克隆及T载体的构建 | 第26页 |
| 2.2.6 构建水稻Ospz4启动子及其5'端缺失片段的表达载体 | 第26-28页 |
| 2.2.7 制备农杆菌EHA105感受态 | 第28页 |
| 2.2.8 各表达载体转化农杆菌及鉴定 | 第28-30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-32页 |
| 2.3.1 水稻基因启动子Ospz4的序列分析 | 第30页 |
| 2.3.2 水稻基因启动子Ospz4的PCR扩增及表达载体的构建 | 第30-31页 |
| 2.3.3 水稻Ospz4启动子5'端缺失片段表达载体的构建 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 水稻Ospz4启动子及5端缺失片段在烟草叶片中的瞬时表达检测 | 第34-38页 |
| 3.1 实验材料与设备 | 第34页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第34页 |
| 3.1.2 菌株 | 第34页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第34页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-36页 |
| 3.2.1 表达载体转化烟草叶片 | 第34-35页 |
| 3.2.2 转化烟草叶片的GUS组织化学染色 | 第35-36页 |
| 3.3 结果与分析 | 第36-37页 |
| 3.4 讨论 | 第37-38页 |
| 第四章 Ospz4启动子及5'端缺失片段遗传转化水稻及阳性植株鉴定 | 第38-44页 |
| 4.1 实验材料与设备 | 第38页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第38页 |
| 4.1.2 菌株 | 第38页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第38页 |
| 4.2 实验方法 | 第38-41页 |
| 4.2.1 遗传转化水稻 | 第38-40页 |
| 4.2.2 本实验中所用到的培养基配方 | 第40页 |
| 4.2.3 转化水稻植株的PCR鉴定 | 第40-41页 |
| 4.3 结果与分析 | 第41-42页 |
| 4.3.1 遗传转化水稻 | 第41-42页 |
| 4.3.2 转化植株的PCR鉴定 | 第42页 |
| 4.4 讨论 | 第42-44页 |
| 第五章 阳性植株GUS染色及实时荧光PCR检测 | 第44-53页 |
| 5.1 实验材料与设备 | 第44页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第44页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第44页 |
| 5.2 实验方法 | 第44-47页 |
| 5.2.1 阳性植株各组织的GUS染色 | 第44-45页 |
| 5.2.2 实时荧光PCR检测GUS基因的表达量 | 第45-47页 |
| 5.3 结果与分析 | 第47-51页 |
| 5.3.1 转Ospz4启动子的阳性水稻植株GUS组织化学染色检测 | 第47-48页 |
| 5.3.2 转5'端缺失片段的阳性水稻植株GUS组织化学染色检测 | 第48-49页 |
| 5.3.3 转Ospz4启动子及5'端缺失片段的阳性水稻植株GUS基因表达水平分析 | 第49-50页 |
| 5.3.4 转Ospz4启动子的阳性水稻植株在逆境条件下GUS基因表达水平分析 | 第50-51页 |
| 5.4 讨论 | 第51-53页 |
| 第六章 结论及下一步研究设想 | 第53-55页 |
| 6.1 结论 | 第53页 |
| 6.2 下一步研究设想 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-66页 |
| 附录1 缩略词表 | 第66-67页 |
| 附录2 DNA提取试剂 | 第67-68页 |
| 附录3 质粒提取相关试剂 | 第68-69页 |
| 附录4 GUS基因相对表达量检测结果统计 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 作者简介 | 第71页 |
