摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第10-22页 |
1.1 AsA的发现与其化学属性 | 第10-11页 |
1.1.1 AsA的发现 | 第10-11页 |
1.1.2 AsA的化学属性 | 第11页 |
1.2 AsA在人体中的作用 | 第11-12页 |
1.3 AsA在植物中的主要功能 | 第12-14页 |
1.3.1 抗氧化及抗胁迫作用 | 第12页 |
1.3.2 作酶的辅因子 | 第12-13页 |
1.3.3 参与细胞膨大、分裂及细胞壁的软化 | 第13页 |
1.3.4 调控花期和启动衰老进程 | 第13-14页 |
1.3.5 参与植物的光保护作用 | 第14页 |
1.3.6 参与其它物质的合成与代谢 | 第14页 |
1.4 AsA在植物中的合成 | 第14-16页 |
1.4.1 L-半乳糖途径 | 第15-16页 |
1.4.2 D-半乳糖醛酸途径 | 第16页 |
1.4.3 古洛糖途径 | 第16页 |
1.4.4 肌醇途径 | 第16页 |
1.5 AsA的氧化还原和降解 | 第16-18页 |
1.5.1 AsA的氧化还原 | 第17页 |
1.5.2 AsA的降解 | 第17-18页 |
1.6 AsA在植物中的分布与运输 | 第18-19页 |
1.7 AsA在植物中的积累 | 第19页 |
1.8 本研究的目的与意义 | 第19-22页 |
第二章 甜樱桃果实AsA积累的生理机理研究 | 第22-38页 |
2.1 材料与方法 | 第22-26页 |
2.1.1 试验材料 | 第22页 |
2.1.2 试验方法 | 第22-26页 |
2.1.2.1 形态指标测定 | 第22-23页 |
2.1.2.2 T-AsA和AsA含量的测定 | 第23页 |
2.1.2.3 GSH和GSSG含量测定 | 第23-24页 |
2.1.2.4 GalLDH活性的测定 | 第24页 |
2.1.2.5 GalDH活性测定 | 第24-25页 |
2.1.2.6 APX、MDHAR、DHAR和GR活性的测定 | 第25-26页 |
2.2 结果与分析 | 第26-35页 |
2.2.1 甜樱桃果实生长过程动态变化 | 第26-27页 |
2.2.2 甜樱桃果实生长过程AsA含量及积累量的变化 | 第27-29页 |
2.2.3 甜樱桃果实生长过程GSH含量及积累量的变化 | 第29-30页 |
2.2.4 甜樱桃果实生长过程AsA-GSH氧化还原程度 | 第30-31页 |
2.2.5 甜樱桃果实生长过程GalLDH、GalDH活性变化 | 第31-32页 |
2.2.6 甜樱桃果实生长过程AsA-GSH循环代谢相关酶活性的变化 | 第32-33页 |
2.2.7 甜樱桃果实生长过程AsA积累与代谢酶的相关性 | 第33-35页 |
2.3 讨论 | 第35-38页 |
2.3.1 甜樱桃果实生长过程AsA积累的变化 | 第35-36页 |
2.3.2 甜樱桃果实生长过程AsA合成酶的作用 | 第36页 |
2.3.3 甜樱桃果实生长过程AsA的再生能力 | 第36-38页 |
第三章 甜樱桃果实AsA积累的分子机理研究 | 第38-51页 |
3.1 甜樱桃果实AsA代谢相关酶基因的克隆 | 第38-44页 |
3.1.1 试验材料 | 第38-39页 |
3.1.1.1 植物材料 | 第38页 |
3.1.1.2 菌株与载体 | 第38页 |
3.1.1.3 酶及生化试剂 | 第38页 |
3.1.1.4 主要仪器 | 第38-39页 |
3.1.2 试验方法 | 第39-42页 |
3.1.2.1 RNA的提取 | 第39页 |
3.1.2.2 反转录 | 第39-40页 |
3.1.2.3 PCR引物设计 | 第40页 |
3.1.2.4 PCR扩增 | 第40-41页 |
3.1.2.5 目的DNA片段的获得 | 第41页 |
3.1.2.6 目的DNA与pMD19-T vector的连接 | 第41页 |
3.1.2.7 阳性克隆的筛选和鉴定 | 第41-42页 |
3.1.2.8 基因序列的测定 | 第42页 |
3.1.2.9 序列分析 | 第42页 |
3.1.3 结果与分析 | 第42-44页 |
3.1.3.1 甜樱桃果实总RNA的提取 | 第42-43页 |
3.1.3.2 甜樱桃果实AsA合成代谢相关基因全长cDNA序列的分析 | 第43-44页 |
3.2 甜樱桃果实AsA代谢相关基因的表达 | 第44-49页 |
3.2.1 试验材料 | 第44页 |
3.2.2 试验方法 | 第44-45页 |
3.2.2.1 定量引物的设计 | 第44-45页 |
3.2.2.2 总RNA的提取 | 第45页 |
3.2.2.3 cNDA的合成 | 第45页 |
3.2.2.4 实时荧光定量PCR | 第45页 |
3.2.3 结果与分析 | 第45-49页 |
3.2.3.1 甜樱桃果实AsA合成途径相关基因表达变化分析 | 第45-47页 |
3.2.3.2 甜樱桃果实AsA循环再生途径相关基因表达变化分析 | 第47-49页 |
3.3 讨论 | 第49-51页 |
3.3.1 L-半乳糖途径参与了甜樱桃果实AsA的合成 | 第49页 |
3.3.2 GGP2是甜樱桃果实L-半乳糖合成AsA的关键基因 | 第49-50页 |
3.3.3 DHAR1是甜樱桃果实循环再生途径中AsA的积累的关键基因 | 第50-51页 |
第四章 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-61页 |
附录 | 第61-65页 |
致谢 | 第65页 |