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桑树病程相关蛋白基因MuPR1c及其启动子的功能研究

符号说明第1-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-21页
   ·植物病程相关蛋白PRs的研究进展第12-20页
     ·PRs蛋白的发现及分类第12-13页
     ·PRs蛋白的结构与理化特性第13-15页
     ·PRs蛋白表达的调控第15-16页
     ·PRs蛋白的功能及作用机制第16-20页
   ·本研究的目的和意义第20-21页
2 材料与方法第21-34页
   ·材料第21-22页
     ·植物材料第21页
     ·菌株和载体第21页
     ·试剂第21页
     ·PCR引物第21-22页
   ·方法第22-34页
     ·MuPR1c基因的克隆第22-25页
       ·桑树叶片RNA的提取第22页
       ·cDNA的合成第22-23页
       ·PCR扩增MuPR1c基因第23页
       ·PCR产物纯化第23-24页
       ·目的片段与克隆载体的连接第24页
       ·大肠杆菌细胞的转化第24页
       ·阳性克隆质粒的鉴定第24页
       ·序列测定第24-25页
     ·MuPR1c基因的生物信息学分析第25页
       ·MuPR1c基因的核苷酸序列分析第25页
       ·MuPR1c基因编码蛋白的基本特性分析第25页
     ·MuPR1c基因的生物学功能分析第25-30页
       ·MuPR1c植物表达载体的构建第25-26页
       ·农杆菌GV3101感受态细胞的制备及转化第26-27页
       ·拟南芥的转化、筛选与鉴定第27-28页
       ·转基因植株中MuPR1c蛋白的亚细胞定位分析第28页
       ·拟南芥植株接种Pst DC3000第28页
       ·接种植株中Pst DC3000的CFU值测定第28-29页
       ·灰霉菌接种拟南芥植株第29页
       ·接种拟南芥叶片的胼胝体染色第29页
       ·接种拟南芥叶片的H_2O_2染色第29页
       ·接种拟南芥叶片的O_2染色第29-30页
     ·桑树MuPR1c组织表达特性分析第30页
     ·MuPR1c基因启动子的克隆及分析第30-34页
       ·桑树叶片DNA的提取第30页
       ·Tail-PCR扩增第30-31页
       ·MuPR1c基因启动子植物表达载体的构建第31-32页
       ·MuPR1c基因启动子的组织表达特性第32-33页
       ·MuPR1c基因启动子的诱导表达特性第33-34页
         ·瞬时表达分析第33页
         ·稳定表达分析第33-34页
3 结果与分析第34-54页
   ·桑树病程相关蛋白基因MuPR1c的克隆及生物信息学分析第34-40页
     ·MuPR1c基因的克隆第34页
     ·MuPR1c所编码的蛋白质结构和基本理化性质分析第34-38页
     ·桑树MuPR1c基因进化分析第38-40页
   ·桑树MuPR1c蛋白的亚细胞定位分析第40-41页
     ·MuPR1c-GFP基因融合植物表达载体的构建与鉴定第40-41页
     ·MuPR1c蛋白的亚细胞定位第41页
   ·桑树MuPR1c的组织表达特性分析第41-42页
   ·桑树MuPR1c基因的生物功能分析第42-48页
     ·MuPR1c基因植物表达载体的构建与鉴定第42-43页
     ·转基因拟南芥的验证及表型分析第43-44页
     ·桑树MuPR1c基因影响植物对Pst DC3000的抗性第44-46页
     ·桑树MuPR1c基因影响植物对灰霉菌的抗性第46-48页
   ·MuPR1c启动子的克隆及活性分析第48-54页
     ·MuPR1c启动子的克隆及分析第48-50页
     ·pMuPR1c植物表达载体的构建第50-52页
     ·pMuPR1c的活性分析第52-54页
       ·pMuPR1c瞬时表达的活性分析第52页
       ·pMuPR1c稳定表达的活性分析第52-54页
4 讨论第54-57页
   ·桑树病程相关蛋白MuPR1c基因的表达特性第54-55页
   ·桑树病程相关蛋白MuPR1c的功能和作用机制第55-57页
5 结论第57-58页
参考文献第58-68页
致谢第68-69页
攻读学位期间发表论文情况第69页

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