符号说明 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-21页 |
·植物病程相关蛋白PRs的研究进展 | 第12-20页 |
·PRs蛋白的发现及分类 | 第12-13页 |
·PRs蛋白的结构与理化特性 | 第13-15页 |
·PRs蛋白表达的调控 | 第15-16页 |
·PRs蛋白的功能及作用机制 | 第16-20页 |
·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-34页 |
·材料 | 第21-22页 |
·植物材料 | 第21页 |
·菌株和载体 | 第21页 |
·试剂 | 第21页 |
·PCR引物 | 第21-22页 |
·方法 | 第22-34页 |
·MuPR1c基因的克隆 | 第22-25页 |
·桑树叶片RNA的提取 | 第22页 |
·cDNA的合成 | 第22-23页 |
·PCR扩增MuPR1c基因 | 第23页 |
·PCR产物纯化 | 第23-24页 |
·目的片段与克隆载体的连接 | 第24页 |
·大肠杆菌细胞的转化 | 第24页 |
·阳性克隆质粒的鉴定 | 第24页 |
·序列测定 | 第24-25页 |
·MuPR1c基因的生物信息学分析 | 第25页 |
·MuPR1c基因的核苷酸序列分析 | 第25页 |
·MuPR1c基因编码蛋白的基本特性分析 | 第25页 |
·MuPR1c基因的生物学功能分析 | 第25-30页 |
·MuPR1c植物表达载体的构建 | 第25-26页 |
·农杆菌GV3101感受态细胞的制备及转化 | 第26-27页 |
·拟南芥的转化、筛选与鉴定 | 第27-28页 |
·转基因植株中MuPR1c蛋白的亚细胞定位分析 | 第28页 |
·拟南芥植株接种Pst DC3000 | 第28页 |
·接种植株中Pst DC3000的CFU值测定 | 第28-29页 |
·灰霉菌接种拟南芥植株 | 第29页 |
·接种拟南芥叶片的胼胝体染色 | 第29页 |
·接种拟南芥叶片的H_2O_2染色 | 第29页 |
·接种拟南芥叶片的O_2染色 | 第29-30页 |
·桑树MuPR1c组织表达特性分析 | 第30页 |
·MuPR1c基因启动子的克隆及分析 | 第30-34页 |
·桑树叶片DNA的提取 | 第30页 |
·Tail-PCR扩增 | 第30-31页 |
·MuPR1c基因启动子植物表达载体的构建 | 第31-32页 |
·MuPR1c基因启动子的组织表达特性 | 第32-33页 |
·MuPR1c基因启动子的诱导表达特性 | 第33-34页 |
·瞬时表达分析 | 第33页 |
·稳定表达分析 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-54页 |
·桑树病程相关蛋白基因MuPR1c的克隆及生物信息学分析 | 第34-40页 |
·MuPR1c基因的克隆 | 第34页 |
·MuPR1c所编码的蛋白质结构和基本理化性质分析 | 第34-38页 |
·桑树MuPR1c基因进化分析 | 第38-40页 |
·桑树MuPR1c蛋白的亚细胞定位分析 | 第40-41页 |
·MuPR1c-GFP基因融合植物表达载体的构建与鉴定 | 第40-41页 |
·MuPR1c蛋白的亚细胞定位 | 第41页 |
·桑树MuPR1c的组织表达特性分析 | 第41-42页 |
·桑树MuPR1c基因的生物功能分析 | 第42-48页 |
·MuPR1c基因植物表达载体的构建与鉴定 | 第42-43页 |
·转基因拟南芥的验证及表型分析 | 第43-44页 |
·桑树MuPR1c基因影响植物对Pst DC3000的抗性 | 第44-46页 |
·桑树MuPR1c基因影响植物对灰霉菌的抗性 | 第46-48页 |
·MuPR1c启动子的克隆及活性分析 | 第48-54页 |
·MuPR1c启动子的克隆及分析 | 第48-50页 |
·pMuPR1c植物表达载体的构建 | 第50-52页 |
·pMuPR1c的活性分析 | 第52-54页 |
·pMuPR1c瞬时表达的活性分析 | 第52页 |
·pMuPR1c稳定表达的活性分析 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-57页 |
·桑树病程相关蛋白MuPR1c基因的表达特性 | 第54-55页 |
·桑树病程相关蛋白MuPR1c的功能和作用机制 | 第55-57页 |
5 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第69页 |