转基因抗虫玉米转育株Bt蛋白的表达特性分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 文献综述 | 第9-21页 |
| ·转基因玉米的主要类型 | 第9-11页 |
| ·抗玉米螟 | 第9页 |
| ·抗除草剂 | 第9-10页 |
| ·抗根虫玉米 | 第10页 |
| ·转基因玉米用于生产蛋白药物 | 第10-11页 |
| ·植物抗虫基因研究进展 | 第11页 |
| ·转Bt基因抗虫玉米的研究进展 | 第11-14页 |
| ·国外转Bt基因抗虫玉米的研究进展 | 第11-12页 |
| ·国内转Bt基因抗虫玉米的研究进展 | 第12页 |
| ·Bt蛋白的杀虫机理 | 第12-13页 |
| ·昆虫对Bt毒素蛋白的抗性 | 第13-14页 |
| ·玉米转基因技术 | 第14-16页 |
| ·技术手段 | 第14-16页 |
| ·转基因植物的筛选鉴定方法 | 第16-18页 |
| ·标记基因与报告基因鉴定 | 第16页 |
| ·PCR检测转化植株 | 第16-17页 |
| ·Northern杂交 | 第17页 |
| ·Western杂交 | 第17页 |
| ·酶联免疫吸附鉴定(ELISA) | 第17-18页 |
| ·转基因植物产品的安全性评价 | 第18-21页 |
| ·转基因植物的安全性 | 第18-19页 |
| ·转基因植物的环境安全性 | 第19-20页 |
| ·转基因植物的食品安全性 | 第20-21页 |
| 2 引言 | 第21-22页 |
| 3 材料和方法 | 第22-28页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·植株材料 | 第22页 |
| ·酶类 | 第22页 |
| ·试剂盒 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·植物组织基因组DNA提取(CTAB法) | 第23页 |
| ·目的基因组的扩增 | 第23-24页 |
| ·利用荧光定量PCR技术分析Bt基因表达水平 | 第24-26页 |
| ·材料的获得 | 第24页 |
| ·总RNA的检测和去DNA处理 | 第24-25页 |
| ·反转录获得cDNA | 第25页 |
| ·定量引物设计 | 第25页 |
| ·荧光定量PCR反应 | 第25-26页 |
| ·总蛋白的测定 | 第26-27页 |
| ·待测样的处理 | 第26页 |
| ·标准曲线的建立 | 第26页 |
| ·样品可溶性蛋白浓度的测定 | 第26页 |
| ·Bt杀虫蛋白含量测定 | 第26-27页 |
| ·Bt杀虫蛋白含量测定 | 第27页 |
| ·取样 | 第27页 |
| ·待测样的处理 | 第27页 |
| ·Bt杀虫蛋白含量测定 | 第27页 |
| ·转基因回交转育植株农艺性状检测 | 第27-28页 |
| 4 结果分析 | 第28-39页 |
| ·转育后代植株的检测分析 | 第28-30页 |
| ·除草剂抗性检测分析 | 第28页 |
| ·PCR检测分析 | 第28-30页 |
| ·Bar Bt试纸条检测分析 | 第30页 |
| ·转育后代植株的Bt基因叶片组织表达水平分析 | 第30-32页 |
| ·转育后代植株Bt蛋白含量表达特性分析 | 第32-36页 |
| ·蛋白标准曲线的绘制 | 第32-33页 |
| ·不同时期叶片组织Bt蛋白的表达水平分析 | 第33-34页 |
| ·乳熟期不同组织Bt蛋白的表达水平分析 | 第34-36页 |
| ·转基因回交植株的农艺性状分析 | 第36-39页 |
| 5 讨论 | 第39-41页 |
| 6 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |
| 硕士期间发表的主要研究论文 | 第50页 |
