来源于Mycobacterium tuberculosis的Rv3378c的表达纯化与晶体结构分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 主要符号表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-22页 |
| ·萜类化合物 | 第10-12页 |
| ·萜类化合物分类 | 第10-11页 |
| ·萜类化合物应用 | 第11-12页 |
| ·二萜类化合物 | 第12-14页 |
| ·二萜类化合物分类 | 第12-13页 |
| ·二萜类化合物合成 | 第13-14页 |
| ·二萜合成酶 | 第14-18页 |
| ·二萜合成酶研究现状 | 第14-17页 |
| ·二萜合成酶催化机制 | 第17-18页 |
| ·二萜合成酶结构研究 | 第18页 |
| ·Rv3378c研究背景 | 第18-20页 |
| ·MTB生物学特性与致病性 | 第18-19页 |
| ·Rv3378c研究现状 | 第19-20页 |
| ·Rv3378c结构研究价值 | 第20页 |
| ·本课题研究目的及意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-39页 |
| ·实验材料 | 第22-28页 |
| ·载体和菌株 | 第22页 |
| ·实验试剂 | 第22-26页 |
| ·实验仪器和设备 | 第26-27页 |
| ·培养基配制 | 第27页 |
| ·溶液配制 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-39页 |
| ·质粒的构建 | 第28-31页 |
| ·表达菌株的构建 | 第31页 |
| ·蛋白表达 | 第31-32页 |
| ·蛋白纯化 | 第32-34页 |
| ·蛋白结晶 | 第34-36页 |
| ·X-射线收集数据 | 第36-37页 |
| ·相角的测定 | 第37页 |
| ·电子密度图的解析与模型的构建 | 第37-38页 |
| ·结构模型的修正 | 第38页 |
| ·复合物结构的确定 | 第38-39页 |
| 3 结果与讨论 | 第39-61页 |
| ·Rv3378c表达系统的建立 | 第39-40页 |
| ·Rv3378c目的基因的验证 | 第39-40页 |
| ·Rv3378c与载体连接的验证 | 第40页 |
| ·Rv3378c表达菌株的构建 | 第40页 |
| ·Rv3378c蛋白表达与纯化 | 第40-45页 |
| ·Rv3378c表达 | 第40-42页 |
| ·Rv3378c纯化 | 第42-44页 |
| ·Rv3378c纯度检测 | 第44-45页 |
| ·Rv3378c定量 | 第45页 |
| ·Rv3378c结晶 | 第45-47页 |
| ·初筛蛋白晶体 | 第45-46页 |
| ·晶体优化结果 | 第46-47页 |
| ·Rv3378c结构 | 第47-54页 |
| ·Rv3378c数据收集及处理 | 第47-49页 |
| ·汞衍生物数据收集及处理 | 第49-50页 |
| ·Rv3378c结构修正 | 第50-52页 |
| ·Rv3378c结构分析 | 第52-54页 |
| ·复合物结构 | 第54-61页 |
| ·复合物晶体 | 第54-55页 |
| ·复合物数据收集及处理 | 第55-56页 |
| ·复合物结构分析 | 第56-61页 |
| 4 结论 | 第61-62页 |
| 5 展望 | 第62-63页 |
| 6 参考文献 | 第63-70页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第70-71页 |
| 8 致谢 | 第71页 |
