| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-22页 |
| ·植物叶片衰老 | 第11页 |
| ·影响植物衰老的因素 | 第11-15页 |
| ·植物激素对植物衰老的影响 | 第12-14页 |
| ·外界环境因子对植物衰老的影响 | 第14-15页 |
| ·PPR蛋白家族 | 第15-21页 |
| ·PPR蛋白的结构 | 第15-16页 |
| ·PPR蛋白的分类 | 第16-18页 |
| ·PPR蛋白的生物学功能 | 第18-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 材料与方法 | 第22-39页 |
| ·材料 | 第22-29页 |
| ·植物材料与种植 | 第22页 |
| ·实验仪器 | 第22-23页 |
| ·实验试剂及药品 | 第23页 |
| ·质粒和菌株 | 第23-24页 |
| ·质粒载体 | 第23-24页 |
| ·菌株 | 第24页 |
| ·抗生素的使用及配制 | 第24页 |
| ·实验中所用到的引物的序列 | 第24-25页 |
| ·培养基配制 | 第25-27页 |
| ·实验用到的试剂,缓冲液的配制 | 第27-29页 |
| ·质粒提取溶液配制 | 第27-28页 |
| ·实验用到的电泳缓冲液和上样缓冲液的配制 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-39页 |
| ·拟南芥的种植 | 第29页 |
| ·PPRs基因超表达和反义抑制转基因植株的筛选和鉴定 | 第29页 |
| ·拟南芥莲座叶总RNA的抽提和检测 | 第29-30页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第30-31页 |
| ·半定量及定量PCR检测PPR基因的表达量 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取和感受态的制备及转化 | 第32-34页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| ·质粒转化大肠杆菌 | 第33-34页 |
| ·碱裂解法提取大肠杆菌中的质粒DNA | 第34页 |
| ·根瘤农杆菌GV3101感受态细胞的制备和转化 | 第34-35页 |
| ·根瘤农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第34页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第34-35页 |
| ·PPR蛋白的亚细胞定位检测 | 第35-36页 |
| ·PPRs基因超表达和反义抑制转基因植株莲座叶片衰老表型的观察 | 第36页 |
| ·PPRs基因在野生型拟南芥不同组织和器官中的表达模式分析 | 第36-37页 |
| ·PPRs基因在莲座叶中随生长和叶片衰老进程表达量的变化分析 | 第37页 |
| ·PPRs基因超表达和反义抑制转基因植株莲座叶片衰老表型的观察 | 第37页 |
| ·衰老相关基因的表达检测 | 第37-39页 |
| 结果和分析 | 第39-53页 |
| ·PPRs基因在野生型拟南芥中的表达模式 | 第39-41页 |
| ·PPRs基因在野生型拟南芥不同组织和器官中的表达模式 | 第39页 |
| ·PPRs基因在莲座叶中随生长和叶片衰老进程表达量的变化分析 | 第39-41页 |
| ·各种衰老相关因素处理对莲座叶中PPRs基因表达水平的影响 | 第41-42页 |
| ·PPRs蛋白的亚细胞定位 | 第42-44页 |
| ·PPRs基因超表达和反义抑制转基因植株的筛选和鉴定 | 第44-46页 |
| ·运用除草剂筛选拟南芥OE-PPRs和AN-PPRs转基因植株 | 第44-45页 |
| ·PPRs超表达和反义抑制转基因植株的表达水平鉴定 | 第45-46页 |
| ·PPRs转基因表型植株莲座叶片衰老的观察 | 第46-50页 |
| ·T_3代纯合体转基因植株进行PPRs基因表达水平的鉴定 | 第46页 |
| ·转基因植株莲座叶自然衰老表型的观察 | 第46-50页 |
| ·转基因植株T3代纯合体莲座叶黄绿叶比例的统计 | 第47-48页 |
| ·叶绿素含量的测定 | 第48-49页 |
| ·叶绿素荧光(Fv/Fm)的测定 | 第49页 |
| ·半定量PCR检测一些衰老相关基因的表达在6周AN-PPRs植株叶片中相对于野生型表达量的变化 | 第49-50页 |
| ·莲座叶处在生长期的PPRs超表达植株对JA体外诱导的叶片衰老进程具有明显的延迟效应 | 第50-53页 |
| 讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
