| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-19页 |
| ·海参养殖现状 | 第10页 |
| ·海参的免疫系统 | 第10-12页 |
| ·海参的细胞免疫 | 第10-11页 |
| ·海参的体液免疫 | 第11-12页 |
| ·凝集素的结构与分类 | 第12-13页 |
| ·海洋凝集素的生理活性及相关研究 | 第13-17页 |
| ·抗细菌活性 | 第14-15页 |
| ·抗真菌活性 | 第15-16页 |
| ·抗病毒活性 | 第16页 |
| ·抗肿瘤活性 | 第16-17页 |
| ·抗痛和抗炎症活性 | 第17页 |
| ·研究凝集素的意义 | 第17-19页 |
| 第二章 刺参凝集素AjL和AjMBCL基因的克隆与生物信息学分析 | 第19-31页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·实验动物 | 第19页 |
| ·实验试剂 | 第19页 |
| ·仪器设备 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-23页 |
| ·刺参体壁组织总RNA的提取 | 第19-20页 |
| ·引物设计 | 第20-21页 |
| ·3’-RACE与 5’-RACE cDNA模板的制备 | 第21页 |
| ·RACE- PCR | 第21-22页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第22页 |
| ·感受态的制备 | 第22-23页 |
| ·目的片段与T载体连接与转化 | 第23页 |
| ·菌落鉴定 | 第23页 |
| ·刺参凝集素AjL、AjMBCL基因及其氨基酸序列的生物信息学分析 | 第23页 |
| ·结果与分析 | 第23-29页 |
| ·刺参凝集素基因AjL和AjMBCL的CDs及氨基酸序列分析 | 第23-26页 |
| ·AjL与AjMBCL氨基酸的多重序列比对 | 第26-28页 |
| ·刺参凝集素AjL、AjMBCL氨基酸序列的系统进化分析 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 刺参凝集素AjL和AjMBCL基因的原核表达 | 第31-39页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·菌株与载体 | 第31页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-34页 |
| ·目的基因的调取 | 第31页 |
| ·重组质粒的构建 | 第31-32页 |
| ·重组质粒小提 | 第32页 |
| ·重组质粒的转化与诱导表达 | 第32-33页 |
| ·表达蛋白可溶性分析 | 第33页 |
| ·包涵体蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| ·纯化蛋白的Western blot分析 | 第34页 |
| ·BCA法测定纯化后的凝集素融合蛋白Aj L和AjMBCL | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-37页 |
| ·目的基因的扩增 | 第34-35页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定结果 | 第35-36页 |
| ·凝集素AjL和AjMBCL蛋白的表达分析 | 第36-37页 |
| ·原核表达重组凝集素AjL和AjMBCL蛋白的浓度测定 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 凝集素融合蛋白AjL与AjMBCL凝集活性的鉴定 | 第39-43页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·溶液配制 | 第39页 |
| ·实验步骤 | 第39页 |
| ·红细胞的处理 | 第39页 |
| ·凝集活性实验 | 第39页 |
| ·实验结果 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第五章 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学位论文 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-53页 |
