| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 英文缩略词 | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-18页 |
| 1. COPD | 第14页 |
| 2. 香烟烟雾与COPD | 第14-15页 |
| 3. MRP1 | 第15页 |
| 4. AITC | 第15-16页 |
| 5. Nrf2 | 第16-18页 |
| 第一部分 AITC体外上调CSE诱导的MRP1和Nrf2基因和蛋白表达 | 第18-45页 |
| 1 材料与仪器 | 第18-23页 |
| ·细胞株 | 第18页 |
| ·实验试剂 | 第18-20页 |
| ·实验试剂的配制 | 第20-22页 |
| ·实验仪器 | 第22-23页 |
| 2 实验方法 | 第23-35页 |
| ·香烟烟雾提取物的制备 | 第23-24页 |
| ·细胞培养技术 | 第24-25页 |
| ·细胞复苏 | 第24页 |
| ·细胞传代 | 第24-25页 |
| ·细胞冻存 | 第25页 |
| ·MTT法检测香烟烟雾提取物对 16HBE细胞的毒性 | 第25页 |
| ·香烟烟雾提取物刺激 16HBE细胞后MRP1和Nrf2的基因和蛋白表达 | 第25-34页 |
| ·CSE干预细胞 | 第25-26页 |
| ·Real time RT-PCR方法检测细胞m RNA | 第26-31页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第26页 |
| ·RNA定量及纯度鉴定 | 第26页 |
| ·RNA逆转录为c DNA | 第26-27页 |
| ·Real time RT-PCR扩增目的基因 | 第27-31页 |
| ·Real time RT-PCR分析方法 | 第31页 |
| ·Western blotting检测 16HBE细胞蛋白表达 | 第31-34页 |
| ·16HBE细胞总蛋白的提取 | 第31页 |
| ·BCA总蛋白定量法 | 第31-32页 |
| ·Western blotting操作步骤 | 第32-34页 |
| ·AITC预处理细胞后，CSE刺激 16HBE的MRP1和Nrf2基因和蛋白表达 | 第34页 |
| ·数据分析与统计 | 第34-35页 |
| 3.结果 | 第35-41页 |
| ·CSE的制备和OD值测定 | 第35页 |
| ·CSE对 16HBE细胞毒性的测定 | 第35-36页 |
| ·CSE干预 16HBE不同时间点MRP1和Nrf2的基因和蛋白表达 | 第36-39页 |
| ·CSE干预 16HBE不同时间点MRP1和Nrf2m RNA的表达 | 第36-37页 |
| ·CSE干预 16HBE不同时间点MRP1和Nrf2蛋白的表达 | 第37-39页 |
| ·AITC预处理后,CSE诱导 16HBE细胞MRP1和Nrf2的表达32 | 第39-41页 |
| ·AITC预处理后，CSE诱导 16HBE细胞MRP1和Nrf2的m RNA表达 | 第39-40页 |
| ·AITC预处理后，CSE诱导 16HBE细胞MRP1和Nrf2的蛋白表达 | 第40-41页 |
| 4.讨论 | 第41-45页 |
| 第二部分 AITC对COPD大鼠肺支气管上皮中Nrf2、MRP1表达的影响 | 第45-60页 |
| 1 材料 | 第45-46页 |
| ·实验动物 | 第45页 |
| ·实验试剂 | 第45-46页 |
| ·实验仪器 | 第46页 |
| 2 方法 | 第46-47页 |
| ·COPD大鼠模型的建立 | 第46-47页 |
| ·分组及给药 | 第47页 |
| 3 指标的测定 | 第47-54页 |
| ·呼吸功能测定 | 第47页 |
| ·病理学检查 | 第47-49页 |
| ·肺组织取材及石蜡切片的制作 | 第47-48页 |
| ·肺组织标本切片HE染色 | 第48-49页 |
| ·Real time RT-PCR技术检测肺组织标本中MRP1、Nrf2基因表达 | 第49-54页 |
| ·肺组织总RNA的提取 | 第49页 |
| ·RNA定量及纯度鉴定 | 第49页 |
| ·RNA逆转录为c DNA | 第49-50页 |
| ·Real time RT-PCR扩增目的基因 | 第50-54页 |
| ·Real time RT-PCR分析方法 | 第54页 |
| 4 结果 | 第54-57页 |
| ·大鼠一般情况 | 第54页 |
| ·大鼠肺功能变化 | 第54-55页 |
| ·光镜下观察HE染色后各组肺组织的病理学改变 | 第55-56页 |
| ·Real time RT-PCR技术检测肺组织标本中MRP1、Nrf2基因表达 | 第56-57页 |
| 5.讨论 | 第57-60页 |
| 总结 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 综述 | 第71-82页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 个人简介 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
