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香杨bHLH基因的功能分析

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
1 绪论第9-14页
   ·引言第9页
   ·转录因子第9-11页
     ·转录因子研究概况第9-10页
     ·转录因子的分类第10页
     ·转录因子活性第10-11页
   ·植物bHLH转录因子家族第11-12页
     ·bHLH转录因子的结构域第11-12页
     ·bHLH蛋白的功能第12页
     ·发展趋势第12页
   ·本项研究的目的和意义第12-14页
2 bHLH基因的克隆与生物信息学分析第14-24页
   ·材料与方法第14页
     ·植物材料第14页
     ·菌种与载体第14页
     ·主要试剂第14页
     ·溶液配制第14页
     ·培养基类第14页
   ·试验方法第14-19页
     ·香杨cDNA的合成第14-16页
     ·香杨基因组DNA提取第16页
     ·bHLH基因全长的克隆第16-18页
     ·bHLH基因启动子序列获得第18页
     ·生物信息学分析第18-19页
   ·结果第19-24页
     ·bHLH基因的序列特征分析第19-20页
     ·bHLH蛋白的空间结构预测第20-21页
     ·香杨bHLH蛋白与其它bHLH类蛋白的同源性比对和系统进化树分析第21-22页
     ·应用PLACE数据库对启动子序列进行分析第22-24页
3 香杨bHLH基因的表达特性分析第24-31页
   ·试验材料第24页
     ·植物材料第24页
     ·菌种与载体第24页
     ·主要试剂第24页
     ·溶液配制第24页
   ·试验方法第24-26页
     ·bHLH基因启动子的表达特性分析第24-26页
   ·结果与分析第26-29页
     ·bHLH启动子驱动GUS的表达第26-29页
   ·讨论第29-30页
     ·诱导型启动子的优势第29-30页
   ·本章小结第30-31页
4 bHLH上游表达调控基因研究第31-43页
   ·试验材料第31-32页
     ·菌株和载体第31页
     ·主要试剂第31页
     ·培养基第31-32页
     ·溶液配制第32页
   ·试验方法第32-37页
     ·构建pHIS2-靶DNA重组报告载体第32-33页
     ·pHIS2-靶DNA重组报告载体的3-AT浓度选择第33页
     ·香杨cDNA文库构建第33-35页
     ·重组报告载体质粒和香杨cDNA文库共转化酵母第35-36页
     ·阳性克隆的互作分析第36-37页
   ·结果与分析第37-41页
     ·pHIS2-靶DNA重组报告载体的获得第37页
     ·高质量香杨cDNA文库的构建第37-38页
     ·pHIS2-靶DNA重组报告载体的3-AT浓度选择第38-39页
     ·重组报告载体(pHIS2-靶DNA)与文库的互作筛选第39页
     ·阳性克隆的互作分析第39-41页
   ·讨论第41-42页
     ·DNA与蛋白质相互作用研究的意义第41页
     ·酵母单杂交实验中存在的问题及解决办法第41页
     ·可能与bHLH作用的蛋白的研究第41-42页
   ·本章小结第42-43页
5 ABRE元件与上游表达调控基因的互作验证第43-54页
   ·试验材料第43-44页
     ·菌株和载体第43页
     ·主要试剂第43页
     ·培养基第43-44页
     ·溶液配制第44页
   ·试验方法第44-48页
     ·构建pHIS2-靶DNA重组报告载体第44-45页
     ·pHIS2-靶DNA重组报告载体的3-AT浓度选择第45-46页
     ·香杨ABRE基因/AD质粒的构建第46页
     ·重组报告载体质粒和香杨ABRE基因/AD质粒共转化酵母细胞第46-47页
     ·阳性克隆的互作分析第47页
     ·阳性克隆的互作确认第47-48页
   ·结果与分析第48-52页
     ·pHIS2-靶DNA重组报告载体的获得第48页
     ·pHIS2-靶DNA重组报告载体的3-AT浓度选择第48-49页
     ·香杨ABRE基因/AD质粒的获得第49页
     ·重组报告载体(pHIS2-靶DNA)与ABRE基因的互作验证第49-50页
     ·阳性克隆的互作分析第50-52页
   ·讨论第52-53页
   ·本章小结第53-54页
结论第54-55页
参考文献第55-59页
附录第59-66页
攻读学位期间发表的学术论文第66-67页
致谢第67-68页

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