| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-26页 |
| 1. 哺乳动物中神经免疫相互作用的研究 | 第14-16页 |
| 2. 秀丽隐杆线虫中神经免疫相互作用的研究 | 第16-26页 |
| ·秀丽隐杆线虫及其神经系统 | 第16-18页 |
| ·神经系统对逃避行为和免疫应答的调控 | 第18-23页 |
| ·线虫神经系统对逃避行为的调控 | 第18-20页 |
| ·线虫神经系统对免疫应答的调控 | 第20-23页 |
| ·逃避行为和免疫应答的相互关系 | 第23-26页 |
| 第二章 线虫应对微生物侵染中的逃避行为和免疫应答之间存在平衡关系 | 第26-40页 |
| 1. 前言 | 第26页 |
| 2. 材料和方法 | 第26-34页 |
| ·实验材料 | 第26-29页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要试剂盒 | 第27页 |
| ·主要培养基及配制方法 | 第27-28页 |
| ·常用溶液的配制 | 第28-29页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·实验所用到的线虫 | 第29页 |
| ·实验菌株 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-34页 |
| ·固体培养基培养线虫 | 第30页 |
| ·液体培养基培养线虫 | 第30-31页 |
| ·线虫同步化 | 第31页 |
| ·线虫的冻存 | 第31-32页 |
| ·细菌侵染线虫实验 | 第32页 |
| ·线虫的逃避行为实验 | 第32页 |
| ·线虫的预暴露实验 | 第32-33页 |
| ·线虫吞咽实验 | 第33-34页 |
| 3. 实验结果 | 第34-37页 |
| ·野生型线虫N2对病原菌的逃避行为和存活率是相互协调平衡的 | 第34-36页 |
| ·逃避行为和免疫应答的平衡现象是普遍存在的 | 第36-37页 |
| 4. 讨论 | 第37-40页 |
| 第三章 线虫的化感神经元AWB和ADF调控逃避行为和免疫应答的平衡 | 第40-50页 |
| 1. 前言 | 第40页 |
| 2. 材料和方法 | 第40-41页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·实验所用到的线虫 | 第40-41页 |
| ·实验菌株 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41页 |
| ·线虫培养 | 第41页 |
| ·细菌预暴露侵染 | 第41页 |
| ·线虫RN | 第41页 |
| 3. 实验结果 | 第41-48页 |
| ·lim-4基因调控线虫的逃避行为和免疫应答 | 第42-45页 |
| ·化感神经元AWB和ADF调控线虫的逃避和免疫的平衡关系 | 第45-48页 |
| ·AWB神经元调控逃避行为和免疫应答的平衡关系 | 第45-47页 |
| ·ADF神经元调控逃避行为和免疫应答的平衡关系 | 第47-48页 |
| 4. 讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 五羟色胺和多巴胺共同调控逃避行为和免疫应答的平衡 | 第50-88页 |
| 1. 前言 | 第50-51页 |
| 2 材料和方法 | 第51-59页 |
| ·实验材料 | 第51-54页 |
| ·主要的仪器设备 | 第51页 |
| ·实验药品与试剂 | 第51-52页 |
| ·试剂的配制方法 | 第52-53页 |
| ·主要试剂盒 | 第53页 |
| ·实验所用线虫突变株 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-59页 |
| ·线虫培养 | 第54页 |
| ·细菌预暴露侵染 | 第54页 |
| ·Real-time PCR | 第54-56页 |
| ·Trizol法提线虫总RNA提取 | 第54页 |
| ·cDNA的合成及基因组的去除 | 第54-55页 |
| ·RT-PCR分析mRNA水平 | 第55-56页 |
| ·五羟色胺和多巴胺含量的测定 | 第56页 |
| ·单线虫基因组提取及PCR | 第56-57页 |
| ·线虫杂交 | 第57-59页 |
| ·6-羟多巴胺处理实验 | 第59页 |
| ·图象分析 | 第59页 |
| 3. 实验结果 | 第59-83页 |
| ·神经递质五羟色胺和多巴胺相关基因cat-1和cat-4对逃避和免疫的调控 | 第59-64页 |
| ·五羟色胺(血清素)的作用 | 第60-62页 |
| ·多巴胺的作用 | 第62-63页 |
| ·6-羟多巴胺处理实验 | 第63-64页 |
| ·lim-4突变影响五羟色胺和多巴胺合成基因的表达 | 第64-72页 |
| ·LIM-4调控五羟色胺的合成 | 第64-68页 |
| ·lim-4突变影响tph-1基因的mRNA水平 | 第64-65页 |
| ·lim-4(yz12)与tph-1::GFP杂交实验 | 第65-68页 |
| ·LIM-4调控多巴胺的合成 | 第68-71页 |
| ·lim-4突变影响cat-2基因的mRNA水平 | 第68-69页 |
| ·lim-4(yz12)与cat-2::gfp杂交实验 | 第69-71页 |
| ·lim-4基因突变会导致线虫体内五羟色胺和多巴胺的含量减少 | 第71-72页 |
| ·AWB神经元影响五羟色胺和多巴胺合成基因的表达 | 第72-78页 |
| ·AWB-killed(str-1::mec-4(d)线虫与tph-1::gfp杂交实验 | 第72-75页 |
| ·AWB-killed(str-1::mec-4(d)线虫与cat-2::GFP杂交实验 | 第75-76页 |
| ·AWB神经元坏死导致线虫体内五羟色胺和多巴胺的含量减少 | 第76-78页 |
| ·ADF神经元坏死也会导致线虫体内五羟色胺和多巴胺的含量降低 | 第78-79页 |
| ·UPLC-MS/MS法检测tph-1、cat-2突变株 | 第79-81页 |
| ·线虫野生株N2预暴露前和预暴露后五羟色胺和多巴胺的变化情况 | 第81-82页 |
| ·外源五羟色胺抑制野生型线虫的免疫应答 | 第81-82页 |
| ·外源多巴胺对线虫的存活率的影响 | 第82页 |
| ·UPLC-MS/MS法检测预暴露前和预暴露后五羟色胺和多巴胺的变化 | 第82-83页 |
| 4. 讨论 | 第83-88页 |
| 第五章 受体SER-4、SER-7、DOP-1、DOP-2和DOP-3调控平衡 | 第88-106页 |
| 1. 前言 | 第88-89页 |
| 2 材料和方法 | 第89-97页 |
| ·实验材料 | 第89-92页 |
| ·主要的仪器设备 | 第89-90页 |
| ·实验药品与试剂 | 第90页 |
| ·试剂的配制方法 | 第90-91页 |
| ·主要试剂盒 | 第91页 |
| ·实验所用线虫突变株 | 第91-92页 |
| ·实验方法 | 第92-97页 |
| ·预暴露实验 | 第92页 |
| ·回复突变载体的构建 | 第92-96页 |
| ·引物设计 | 第92页 |
| ·线虫基因组提取 | 第92页 |
| ·目的基因的扩增 | 第92-93页 |
| ·PCR产物检测 | 第93页 |
| ·PCR产物回收 | 第93页 |
| ·两个片段进行overlap连接扩增 | 第93-94页 |
| ·PCR产物与pEASY~(TM)~-T5载体连接 | 第94页 |
| ·连接产物转化E.coli DH5α | 第94-95页 |
| ·重组质粒转化子的筛选和鉴定 | 第95页 |
| ·质粒提取 | 第95页 |
| ·双酶切重组质粒 | 第95-96页 |
| ·获得目的载体 | 第96页 |
| ·显微注射 | 第96-97页 |
| 3 结果 | 第97-104页 |
| ·五羟色胺受体的作用 | 第97-99页 |
| ·多巴胺受体的作用 | 第99-100页 |
| ·DOP-3受体的全身性回复突变载体的构建 | 第100-103页 |
| ·线虫突变回复载体的构建 | 第101-103页 |
| ·启动子和编码区基因的扩增 | 第101页 |
| ·转化 | 第101-102页 |
| ·目的片段与目的载体的连接、转化 | 第102-103页 |
| ·dop-3受体作用于lim-4下游 | 第103-104页 |
| 4. 讨论 | 第104-106页 |
| 第六章 类胰岛素信号途径调控逃避行为和免疫应答的平衡 | 第106-120页 |
| 1. 前言 | 第106页 |
| 2 材料和方法 | 第106-109页 |
| ·实验材料 | 第106-108页 |
| ·主要的仪器设备 | 第106-107页 |
| ·实验药品与试剂 | 第107页 |
| ·试剂的配制方法 | 第107-108页 |
| ·主要试剂盒 | 第108页 |
| ·实验方法 | 第108-109页 |
| ·Trizol法提取线虫总RNA | 第108页 |
| ·cDNA的合成 | 第108页 |
| ·mRNA转录水平分析 | 第108-109页 |
| 3 实验结果 | 第109-117页 |
| ·类胰岛素信号途径调控线虫的逃避行为和免疫应答 | 第109页 |
| ·类胰岛素DAF-2信号途径 | 第109-113页 |
| ·DAF-2-DAF-16信号途径 | 第109-112页 |
| ·类胰岛素多肽(Insulin-like peptide)INS-7 | 第112-113页 |
| ·野生型线虫没有预暴露和预暴露情况下DAF-16下游靶基因的变化 | 第113-114页 |
| ·△daf-2突变体线虫DAF-16下游靶基因的变化 | 第114-115页 |
| ·△lim-4、AWB和ADF突变体中DAF-16下游靶基因的变化 | 第115-117页 |
| ·△dop-3(vs103)线虫DAF-16下游靶基因的变化 | 第117页 |
| 4. 讨论 | 第117-120页 |
| 全文总结与讨论 | 第120-124页 |
| 附录 | 第124-131页 |
| 参考文献 | 第131-146页 |
| 攻读傅士学位期间完成的科研成果 | 第146-147页 |
| 致谢 | 第147-148页 |
