| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 目录 | 第11-13页 |
| 略语表 | 第13-14页 |
| 一 文献综述 | 第14-22页 |
| 1 miRNA 概论 | 第14-15页 |
| 2 肝脏中特异性表达的 miR-122 | 第15-16页 |
| 3 miRNA 在肝细胞癌中的临床应用 | 第16-18页 |
| ·与定性诊断相关的 miRNA | 第16-17页 |
| ·与预后判断及耐药性相关的 miRNA | 第17-18页 |
| 4 miRNA 在肝细胞癌发生发展中的调控机制 | 第18-20页 |
| ·参与调控细胞周期进程的 miRNA 功能研究 | 第18-19页 |
| ·与 HCC 增殖和侵袭相关的 miRNA 功能研究 | 第19-20页 |
| 5 乙肝病毒编码 miRNA 的研究进展 | 第20页 |
| 6 展望 | 第20-22页 |
| 二 实验方案设计 | 第22-25页 |
| 1 研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 研究主要内容 | 第23-24页 |
| 3 实验流程 | 第24-25页 |
| 三 材料和方法 | 第25-41页 |
| 1 材料 | 第25-27页 |
| ·样本收集和信息整理 | 第25-26页 |
| ·实验仪器 | 第26页 |
| ·实验试剂 | 第26-27页 |
| 2 方法 | 第27-41页 |
| ·血清样本中总 RNA 提取 | 第27-28页 |
| ·总 RNA 的定量和质量检测 | 第28页 |
| ·miRNA 表达谱测序 | 第28-29页 |
| ·miRNA 测序结果分析 | 第29-30页 |
| ·miRNA 的定量分析 | 第30-33页 |
| ·miRNA 的靶基因预测 | 第33-34页 |
| ·病毒编码 miRNA 的预测 | 第34页 |
| ·pre-miRNA 的初步验证 | 第34-39页 |
| ·成熟体 miRNA 的定位 | 第39-40页 |
| ·病毒 miRNA 靶基因预测 | 第40-41页 |
| 四 结果和分析 | 第41-59页 |
| 1 样本总 RNA 的质量分析 | 第41页 |
| 2 高通量测序结果及数据分析 | 第41-45页 |
| ·测序的原始数据质量基本统计 | 第42页 |
| ·Clean 序列的长度分布统计 | 第42-43页 |
| ·miRNA 表达丰度分析 | 第43-44页 |
| ·差异表达的 miRNA 筛选 | 第44-45页 |
| 3 HBV 阳性肝癌血清标志物的筛选 | 第45-53页 |
| ·引物特异性的验证与分析 | 第45-46页 |
| ·miRNA 在肝癌和正常样本中的表达差异性分析 | 第46-48页 |
| ·建立 miRNA 预测肝癌可能性的回归方程 | 第48页 |
| ·目标 miRNAs 与病理指标的相关性分析 | 第48-49页 |
| ·验证 miRNA 在 HBV 阳性肝癌和正常样本中的表达差异 | 第49-50页 |
| ·目标 miRNAs 的靶基因预测 | 第50-53页 |
| 4 HBV 编码 miRNA 的预测与验证 | 第53-57页 |
| ·HBV 编码的 pre-miRNA 的预测 | 第53-54页 |
| ·pre-miRNA 的初步验证 | 第54-55页 |
| ·成熟 miRNA 的定位 | 第55-56页 |
| ·hbv-miR-15467 的靶基因预测 | 第56-57页 |
| 5 讨论 | 第57-59页 |
| 五 总结与展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 研究生学习期间主要成果 | 第68-69页 |
| 附录 重要试剂的配制 | 第69-70页 |