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拟南芥Tudor-SN蛋白调节植物盐逆境下生长机理分析

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
縮略词表第10-11页
第一章 文献综述第11-37页
   ·Tudor-SN蛋白的结构特征及功能研究进展第11-19页
     ·结构特征第11-12页
     ·Tudor-SN蛋白在动物中的功能研究第12-17页
     ·Tudor-SN蛋白在植物中的功能研究第17-19页
   ·GA的研究进展第19-27页
     ·GA的生物合成第19-20页
     ·GA的信号转导第20页
     ·GA与逆境忍耐的关系第20-23页
     ·GA应对非生物逆境的机制研究第23-26页
     ·拟南芥GA合成酶基因GA20ox的表达和调控第26-27页
   ·SGs的研究进展第27-33页
     ·SGs的发现第27页
     ·SGs的形成条件第27页
     ·SGs的组成及动力学平衡第27-28页
     ·SGs的聚合第28-30页
     ·影响SGs的聚合的因素第30-32页
     ·SGs的解聚第32页
     ·SGs的功能第32-33页
     ·SGs与细胞凋亡的关系第33页
   ·植物对盐逆境的响应第33-35页
   ·本研究的目的和意义第35-37页
第二章 实验材料和方法第37-54页
   ·实验材料第37页
     ·植物材料第37页
     ·宿主菌第37页
     ·质粒载体第37页
     ·各种酶及试剂第37页
   ·主要仪器第37-38页
   ·常用培养基及试剂的配制第38-40页
     ·常用培养基的配制第38-39页
     ·拟南芥原生质体转化试剂第39页
     ·拟南芥幼苗总蛋白提取液第39页
     ·RNA免疫共沉淀试剂配方第39-40页
     ·其他常用试剂溶液配方第40页
   ·实验方法第40-54页
     ·拟南芥培养第40-41页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和质粒转化第41页
     ·农杆菌电击感受态细胞的制备和转化第41-42页
     ·普通PCR扩增及载体构建的基本方法第42页
     ·载体构建的基本方法第42-43页
     ·SDS法提取植物基因组DNA第43-44页
     ·质粒DNA的提取方法第44页
     ·植物总RNA的提取第44-46页
     ·mRNA的反转录实验第46-47页
     ·半定量PCR及实时定量PCR第47页
     ·转基因植株的筛选及纯合株系的获得第47-48页
     ·种子萌发实验第48页
     ·开花及株高测量第48页
     ·根长测量第48-49页
     ·GA回复实验第49页
     ·拟南芥原生质体瞬时表达实验第49页
     ·虫草素(Cordycepin)处理幼苗实验第49-50页
     ·甘氨酸SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳第50-51页
     ·蛋白质印迹(Western Blot)实验第51-52页
     ·RNA免疫共沉淀实验第52-54页
第三章 实验结果与分析第54-91页
   ·TSN1和TSN2的氨基酸序列分析第54页
   ·TSN1/TSN2 RNAi转基因植株的获得及表型分析第54-63页
     ·TSN1/TSN2 RNAi载体的构建第54-58页
     ·TSN1/TSN2 RNAi转基因植株的获得第58页
     ·TSN1/TSN2 RNAi转基因植株中的基因表达分析第58-60页
     ·TSN1/TSN2 RNAi转基因植株正常生长下的表型分析第60-61页
     ·TSN1/TSN2 RNAi转基因植株在逆境下的表型分析第61-63页
   ·TSN1过表达转基因植株的获得及表型分析第63-70页
     ·TSN1过表达载体的构建第63页
     ·TSN1过表达转基因植株的获得与基因表达分析第63-64页
     ·TSN1过表达转基因植株在正常生长条件下的表型分析第64-68页
     ·TSN1过表达转基因植株在逆境下的表型分析第68-70页
     ·小结第70页
   ·GA20ox3功能缺失突变体的获得及表型分析第70-75页
     ·GA20ox3功能缺失突变体的获得第70-72页
     ·ga20ox3突变体在正常条件下的表型分析第72-73页
     ·ga20ox3突变体在逆境下的表型分析第73-75页
   ·赤霉素回复TSN1/TSN2 RNAi株系和ga20ox3突变体在逆境下的表型分析第75-76页
     ·小结第76页
   ·GA20ox和TSN1在盐逆境下的基因表达分析第76-77页
   ·TSN1的亚细胞定位及逆境下蛋白表达分析第77-79页
     ·TSN1的亚细胞定位第77-78页
     ·盐逆境下TSN1的蛋白表达分析第78-79页
     ·小结第79页
   ·TSN1与SGs的关系分析第79-87页
     ·TSN1-GFP与RFP-RBP47融合蛋白在原生质体中的定位分析第79-82页
     ·TSN1/TSN2 RNAi原生质体中RFP-RBP47的定位分析第82-84页
     ·TSN1定位于SGs的功能域分析第84-86页
     ·小结第86-87页
   ·TSN1调节GA20ox3 mRNA的机制分析第87-91页
     ·TSN1结合GA20ox3 mRNA的分析第87-89页
     ·TSN1调节GA20ox3 mRNA的稳定性分析第89-90页
     ·小结第90-91页
第四章 讨论第91-95页
   ·TSN通过调节GA20ox3进而调节植物在逆境下的生长第91-92页
   ·GA20ox3是维持逆境下植物生长所必需的第92页
   ·作为SGs的一个组成成分,TSN可能是盐逆境下GA20ox3的最适量翻译所必需的第92-94页
   ·Tudor域可能是TSN1参与SGs形成的次级聚合所必需的第94-95页
第五章 结论第95-96页
参考文献第96-113页
致谢第113-114页
作者简历第114页

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