| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-20页 |
| ·凡纳滨对虾和斑节对虾简介 | 第10-12页 |
| ·脂肪代谢相关基因研究进展 | 第12-18页 |
| ·脂肪酸结合蛋白 | 第13-14页 |
| ·脂肪酸合成酶 | 第14-15页 |
| ·脂肪酸运转蛋白 1 | 第15-16页 |
| ·脂肪酶 | 第16-17页 |
| ·过氧化物酶体增殖物激活受体 | 第17-18页 |
| ·研究目的及意义 | 第18页 |
| ·主要研究内容 | 第18-19页 |
| ·技术路线 | 第19-20页 |
| 2 研究对象的分子鉴定 | 第20-28页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·实验对象 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·引物 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-23页 |
| ·DNA 的提取及纯化 | 第20-21页 |
| ·第一步 PCR | 第21页 |
| ·ExoSAP-IT PCR Clean-up | 第21页 |
| ·Labelling (Big Dye) | 第21-22页 |
| ·Ethenol-EDTA Precipitation | 第22页 |
| ·DNA Sequences | 第22页 |
| ·DNA 测序 | 第22-23页 |
| ·Seq Ed V1.0.3 软件分析 DNA 测序结果 | 第23页 |
| ·结果与分析 | 第23-26页 |
| ·16S rRNA 基因 PCR 电泳结果 | 第23页 |
| ·16S sRNA 基因序列结果 | 第23-26页 |
| ·讨论 | 第26-28页 |
| 3 总 RNA 提取、纯化与浓缩，cDNA 双链合成及质量检测 | 第28-39页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·引物及其序列 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-34页 |
| ·采用 TRIZOL Reagent 提取 RNA | 第29页 |
| ·Protocol for the isolation of poly(A)RNA | 第29-30页 |
| ·RNA Clean-up and Concentration of RNA | 第30页 |
| ·RNA 变性电泳 | 第30页 |
| ·第一链合成反应 | 第30-31页 |
| ·第二链合成反应 | 第31-32页 |
| ·Adaptor Ligation | 第32页 |
| ·β-actin 基因克隆检测所得 cDNA 质量 | 第32-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-37页 |
| ·总 RNA 提取结果 | 第34-35页 |
| ·First-PCR 产物 | 第35页 |
| ·β-actin 基因序列分析 | 第35-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 4 胰脂酶基因克隆 | 第39-50页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·实验试剂 | 第39页 |
| ·引物及其序列 | 第39-40页 |
| ·主要仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-42页 |
| ·胰脂酶基因中间同源片段扩增 | 第40页 |
| ·RACE 反应 | 第40-41页 |
| ·通过 PCR 反应扩增 cDNA 全长 | 第41-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-49页 |
| ·凡纳滨对虾与斑节对虾胰脂酶基因全长 cDNA 克隆 | 第42-47页 |
| ·蛋白质结构分析 | 第47-48页 |
| ·进化树的构建 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| 5 不同盐度处理后的胰脂酶基因的组织表达分析 | 第50-55页 |
| ·材料 | 第50-51页 |
| ·试验材料 | 第50页 |
| ·实验试剂 | 第50页 |
| ·引物及其序列 | 第50页 |
| ·主要仪器 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-52页 |
| ·RNA 的提取与检测 | 第51页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第51页 |
| ·反转录合成的 First-strand cDNA 的质量检测 | 第51-52页 |
| ·Real-time PCR 引物特异性的检测 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-53页 |
| ·不同盐度处理后的胰脂酶基因组织表达分析 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 6 盐度对凡纳滨对虾部分脂肪相关酶影响的研究 | 第55-63页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·试验材料 | 第55页 |
| ·实验试剂 | 第55页 |
| ·主要仪器 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-59页 |
| ·盐度梯度设置 | 第55-56页 |
| ·测定方法 | 第56-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-61页 |
| ·生境盐度对凡纳滨对虾 LPS 酶活力的影响 | 第59-60页 |
| ·生境盐度对凡纳滨对虾 MDH 酶活力的影响 | 第60页 |
| ·生境盐度对凡纳滨对虾总脂肪酶活力的影响 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 7 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简介 | 第73-74页 |
| 导师简介 | 第74页 |
