| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-55页 |
| 1 基因传递 | 第13-17页 |
| ·DNA传递 | 第13页 |
| ·寡核苷酸(RNA)传递 | 第13-17页 |
| ·小干扰RNA(siRNA) | 第14-15页 |
| ·小发夹RNA(shRNA) | 第15-16页 |
| ·小干扰RNA(siRNA)和小发夹RNA(shRNA)相似与不同 | 第16-17页 |
| 2 基因传递载体 | 第17-24页 |
| ·非病毒载体 | 第17-24页 |
| ·阳离子脂质体 | 第18-19页 |
| ·高分子基因载体 | 第19-22页 |
| ·磷酸钙 | 第22-24页 |
| 3 靶向基因治疗 | 第24-28页 |
| ·靶向高分子载体/DNA复合物介导特异部位基因传递 | 第24-25页 |
| ·受体介导的靶向基因转移 | 第25-28页 |
| ·叶酸 | 第25-26页 |
| ·蛋白质和多肽 | 第26-27页 |
| ·生物素和亲和素 | 第27-28页 |
| 4 基质介导基因传递 | 第28-37页 |
| ·天然高分子基质 | 第29-33页 |
| ·胶原 | 第30-32页 |
| ·透明质酸 | 第32页 |
| ·明胶 | 第32页 |
| ·纤维蛋白 | 第32页 |
| ·琼脂糖 | 第32-33页 |
| ·壳聚糖和海藻酸 | 第33页 |
| ·化学合成高分子基质 | 第33-37页 |
| ·聚(乳酸羟基乙酸)共聚物(PLGA) | 第33-35页 |
| ·聚(DL-丙交酯)(PDLLA) | 第35-36页 |
| ·聚乙二醇(PEG)及其衍生物水凝胶 | 第36-37页 |
| ·天然-化学合成高分子基质 | 第37页 |
| 5 选题思路 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-55页 |
| 第二章 负载磷酸钙/DNA共沉淀的3D快速降解膜介导的体外局部基因传递研究 | 第55-71页 |
| 1 引言 | 第55-56页 |
| 2 实验部分 | 第56-60页 |
| ·试剂 | 第56-57页 |
| ·聚合物合成 | 第57页 |
| ·磷酸钙/DNA复合物制备 | 第57页 |
| ·磷酸钙/DNA共沉淀物的表征 | 第57页 |
| ·负载磷酸钙/DNA共沉淀物的高分子膜的制备 | 第57-58页 |
| ·体外转染 | 第58-59页 |
| ·细胞存活率 | 第59页 |
| ·DNA释放的测量 | 第59页 |
| ·膜的降解研究 | 第59-60页 |
| 3 结果与讨论 | 第60-68页 |
| ·膜介导的磷酸钙/DNA共沉淀体外的转染 | 第60-63页 |
| ·膜介导pGL3-Luc和pEGFP-Cl在HEK293T细胞中的转染 | 第63-68页 |
| 4 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-71页 |
| 第三章 包封磷酸钙/DNA共沉淀的功能化高分子微球介导体外局部基因传递研究 | 第71-88页 |
| 1 引言 | 第71-72页 |
| 2 实验部分 | 第72-75页 |
| ·试剂 | 第72页 |
| ·聚合物合成与表征 | 第72-73页 |
| ·磷酸钙/DNA共沉淀制备 | 第73页 |
| ·包封磷酸钙/DNA复合物的CA-PDLLA/PLLA-PEG-PLLA膜的制备 | 第73-74页 |
| ·包封PHEA包裹的磷酸钙/DNA共沉淀的CA-PDLLA/PLLA-PEG-PLLA微球的制备 | 第74页 |
| ·膜和微球的表征 | 第74页 |
| ·DNA释放 | 第74页 |
| ·体外转染 | 第74-75页 |
| ·细胞存活率测量 | 第75页 |
| 3 结果与讨论 | 第75-85页 |
| ·基质介导转染的膜和微球的制备和表征 | 第75-79页 |
| ·体外转染 | 第79-85页 |
| 4 结论 | 第85页 |
| 参考文献 | 第85-88页 |
| 第四章 负载阳离子脂质体/shRNA复合物的3D快速降解膜的体外局部基因传递研究 | 第88-105页 |
| 1 引言 | 第88-89页 |
| 2 实验部分 | 第89-94页 |
| ·试剂 | 第89页 |
| ·聚合物合成 | 第89页 |
| ·构建沉默荧光素酶(si-LucGL3)的shRNA(psiRNA-LucGL3)和沉默β-半乳糖苷酶(si-LacZ)的shRNA(psiRNA-LacZ) | 第89-91页 |
| ·Lipofectamine 2000/shRNA复合物制备 | 第91页 |
| ·溶液体外转染 | 第91-92页 |
| ·负载Lipofectamine 2000/shRNA复合物的高分子膜的制备 | 第92-93页 |
| ·膜介导体外转染 | 第93-94页 |
| 3 结果与讨论 | 第94-101页 |
| ·设计沉默荧光素酶(si-LucGL3)的shRNA(psiRNA-LucGL3)和沉默β-半乳糖苷酶(si-LacZ)的shRNA(psiRNA-LacZ) | 第94-95页 |
| ·膜的制备和表征 | 第95-97页 |
| ·溶液体外转染 | 第97-99页 |
| ·膜介导体外转染 | 第99-101页 |
| 4 结论 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-105页 |
| 第五章 Heparin或Heparin-Biotin包裹PAMAM/shRNA复合物的基因传递研究 | 第105-117页 |
| 1 引言 | 第105-106页 |
| 2 实验部分 | 第106-108页 |
| ·试剂 | 第106页 |
| ·PAMAM/shRNA复合物制备 | 第106页 |
| ·Heparin包裹PAMAM/shRNA复合物和Heparin-Biotin包裹PAMAM/shRNA复合物的制备 | 第106-107页 |
| ·Heparin包裹PAMAM/shRNA复合物和Heparin-Biotin包裹PAMAM/shRNA复合物的粒径和电势 | 第107页 |
| ·Heparin包裹PAMAM/shRNA复合物和Heparin-Biotin包裹PAMAM/shRNA复合物中游离shRNA含量测定 | 第107页 |
| ·体外转染 | 第107-108页 |
| 3 结果与讨论 | 第108-112页 |
| ·粒径和电位的测定 | 第108-110页 |
| ·游离shRNA含量测定 | 第110-111页 |
| ·体外转染 | 第111-112页 |
| 4 结论 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-117页 |
| 附录 作者在攻读博士学位期间已发表和待发表的论文 | 第117-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
